半胱胺对配种季节雄性藏绵羊部分生殖激素和精子活力的影响

鲍宇红 ，冯 柯 ，刘孟君 ，马金英，参木友 ，宋天增

（1.西藏自治区农牧科学院草业科学研究所，拉萨 850000；2.西藏自治区拉萨市动物疫病预防控制中心，拉萨 850000；3.西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所，拉萨 850009）

半胱胺（Cysteamine，CS）又名 β-巯基乙胺，分子式为NH2-CH2-CH2-SH，是CoA分子的组成部分。关于CS消耗体内生长抑素（SS），促进动物生长，提高饲料转化率方面的研究已经比较深入［1-2］。在动物繁殖生产方面的研究表明，CS可促进妊娠大鼠乳腺发育［3］，提高鸡的产蛋性能［4-5］及奶牛哺乳期的产奶量［6-7］。尽管 CS 对动物部分繁殖生产性能方面的研究取得了良好的进展，但对高海拔地区藏绵羊配种季节雄性藏绵羊繁殖性能的影响尚未见报道。本研究旨在探讨藏绵羊饲料中添加CS对配种季节雄性羊部分生殖激素（FSH、LH、E、T）和精子活力的影响，为今后开展半胱胺在高海拔地区绵羊营养研究应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物与材料

1.1.1 试验动物与试验地点 3～5岁雄性健康藏绵羊25只。时间2016年9—11月，地点在西藏拉萨市当雄县龙仁乡郭庆村和西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所。

1.1.2 主要设备与试剂 紫外可见分光光度计（752N上海精科），精子质量分析仪（JFX-B海力孚-华众），电热恒温水槽（DKB-450A上海森信），变频冰箱（BCD-649WDVC海尔），包被半胱胺亚酸盐（潍坊加易加生物科技有限公司），促卵泡素（FSH）ELISA试剂盒、黄体激素（LH）ELISA试剂盒、雌激素（E）ELISA试剂盒及睾酮（T）ELISA试剂盒均购自武汉纯度生物科技有限公司。

1.2 试验内容

使用相应的ELISA试剂盒，检测试验羊血清FSH、LH、E和T水平；精子质量分析仪分析鲜精和用等温的维生素B12做4倍稀释并于4℃保存8 h后的精子活力。

1.3 试验设计

雄性健康藏绵羊25只，随机分为5个处理。在2016年9月1日开始的35 d试验期内，均为白天自由放牧，每晚每只羊补饲基础日粮［8］（基础日粮组成及营养水平见表1）250 g，试验组分别添加CS 0 mg/（kg·BW）、5 mg/（kg·BW）、10 mg/（kg·BW）、15 mg/（kg·BW）和20 mg/（kg·BW），每隔一天添加1次。预试期7 d。

试验用25只雄性健康藏绵羊隔2 d的上午9：00空腹颈静脉采血5 mL，同时采精1次，共采集7次。

采集的5 mL颈静脉血，10 000 r/min离心5 min，分离血清于4℃保存备用。

每次每只雄性健康藏绵羊精液试验分为2组，每组3个重复。

表1 基础日粮组成及营养水平%

1.4 数据处理

所得数据采用Excel进行前期处理，再用SPSS 11.5软件进行One-WayANOVA方差分析，并进行多重比较，结果用平均数±标准差表示，检验误差为5%和1%。

2 结果与分析

由图1～4可知，随着CS添加量的增加，血清中卵泡刺激素（FSH）和促黄体素（LH）分泌水平逐渐降低；雌激素（E）和睾酮（T）随着CS添加量的增加，分泌水平逐步提高，当CS添加量为10 mg/（kg·BW）时，分泌水平达到峰值，之后随着添加量的增加分泌水平下降。

由表2可知，在配种季节雄性藏绵羊补饲日粮中添加CS，可提高鲜精活力，但未达到显著水平（P＞0.05），以CS 10 mg/（kg·BW）添加量为最高；鲜精经维生素B12做4倍稀释并于4℃保存8 h后（如表3），10 mg/（kg·BW）添加组和15mg/（kg·BW）添加组均较对照组、5mg/（kg·BW）添加组和20 mg/（kg·BW）添加组精子活力显著提高（P＜0.05），但对照组与5 mg/（kg·BW）组和20 mg/（kg·BW）组间差异均不显著（P＞0.05），且10 mg/（kg·BW）添加组与15 mg/（kg·BW）添加组间的精子活力也无差异（P＞0.05），且以CS 10 mg/（kg·BW）添加组为最高。

图1 添加CS对配种季节雄性藏绵羊FSH的影响

图2 添加CS对配种季节雄性藏绵羊LH的影响

图3 添加CS对配种季节雄性藏绵羊E的影响

图4 添加CS对配种季节雄性藏绵羊T的影响

表2 添加CS对配种季节雄性藏绵羊鲜精精子活力的影响

表3 添加CS对配种季节雄性藏绵羊鲜精经维生素B12做4倍稀释并于4℃保存8 h后的精子活力的影响

3 讨论

卵泡刺激素（FSH）与LH协同间接通过刺激睾酮分泌促精子形成。雌激素（E）可通过与下丘脑或垂体的受体结合，对LH的分泌产生负反馈调节。在雄激素分泌过多时，通过负反馈抑制下丘脑分泌、释放GnRH和垂体分泌、释放FSH、LH。雄激素对雌激素有颉颃作用。

随着CS添加量的增加，血清中卵泡刺激素（FSH）和促黄体素（LH）分泌水平逐渐降低，而雌激素（E）和睾酮（T）随着CS添加量的增加分泌水平逐步提高，当CS添加量为10 mg/（kg·BW）时，分泌水平达到峰值，之后随着添加量的增加分泌水平下降。此结果与王彦迪等［9］的研究结果一致，但睾酮（T）分泌水平差异较大，这可能与试验动物的高海拔生存环境有关。CS具有抗氧化作用［10-11］，鲜精和鲜精经维生素B12做4倍稀释后的精子活力均以CS 10 mg/（kg·BW）添加量为最高。

4 结论

在配种季节雄性藏绵羊补饲日粮中添加CS可抑制卵泡刺激素（FSH）和促黄体素（LH）的分泌水平，提高雌激素（E）和睾酮（T）的分泌水平，以及精子活力。且以CS 10 mg/（kg·BW）添加量为最佳。