喜炎平注射液对乳酸脱氢酶的体外干扰研究

张 娜 朱 峰 张 强 王立平 陈 鑫

河北省沧州中西医结合医院东院区实验诊断科，河北沧州 061000

临床治疗过程中，临床医师往往需要依据检验结果对患者的病情及治疗效果进行评估，药物对检验结果的干扰也会影响医师做出正确判断，此时正确分析药误对检验结果的影响显得尤为重要[1]。对临床实验室而言，降低或避免药物对检验结果的影响，明确干扰物质所产生的检验结果的差异是很有必要的[2-3]。药物对检测结果的影响主要包括分析干扰（体外影响）和生物学干扰（体内影响）,药物和(或)其代谢物能干扰另一物质定量分析的一个或多个阶段[4]。对于干扰的定义，Kroll[5]认为：样品中的一种能改变结果准确值的物质，会影响分析物的浓度或活性。近年来，药物对临床检验项目的影响越来越普遍，其中中药制剂对检测结果的影响也日渐受到重视。本研究根据临床实验室标准化委员会CLSI的EP7-A2[6]文件做了喜炎平注射液对常规生化项目检测方法有无干扰的筛选试验[7],实验表明，其对乳酸脱氢酶产生干扰，进而研究喜炎平对乳酸脱氢酶产生干扰的剂量效应。

1 资料与方法

1.1 仪器

HITACHI7600-010全自动生化分析仪

1.2 试剂

乳酸脱氢酶检测试剂盒，德赛诊断系统（上海）有限公司生产，批号00003288，线性范围5.4 ～1300U/L，检测方法为乳酸底物法。

1.3 实验药品

喜炎平注射液（江西青峰药业，每支装2mL：50mg），取5支备用。喜炎平的用量为肌内注射：成人一次50～100mg，2～3次/d。静脉点滴，250～500mg/d，0.9%氯化钠注射液或5%葡萄糖注射液稀释后进行滴注。儿童：按体重每日5～ 10mg/kg（0.2～ 0.4mL/kg），不得超过 250mg，0.9%氯化钠注射液或5%葡萄糖注射液100～250mL稀释后静脉点滴，30～40滴/min，一次/d。

1.4 基质血清

选取50名健康体检正常的健康人群，要求采血前三天禁止服用任何药物[8]，采集血液标本后，3500转/分，离心5min，将血清混合作为基础样本。

1.5 测定重测次数

对基础样本连续测定10次，将测定得到乳酸脱氢酶的标准差（s）计算出来。根据CLIA’88对允许误差范围的标准设定乳酸脱氢酶的临床可接受范围，设定LDH连续测定10次后计算得出平均值的20%[9]作为其有临床意义的差别标准dmax，计算dmax/s。计算基础混合样本标准差为2.5，计算乳酸脱氢酶的dmax/s值为14，查阅EP7-A2中的dmax/s与重测次数对应表[1]，依据此表得出重测次数为3次。见表1。

表1 dmax/s与重测次数对应表

1.6 操作步骤

取喜炎平注射液，用注射用水稀释成5%、15%、25%、50%、75%、100% 浓度浓度。将各个浓度的药物与基础样本按1∶20的比例混合作为实验样本，混合后的实验样本稀释倍数为1∶400（含穿心莲内酯磺化物0.0625mg/mL），1∶133（含穿心莲内酯磺化物0.188mg/mL），1∶80（含穿心莲内酯磺化物0.313mg/mL），1∶40（含穿心莲内酯磺化物0.625mg/mL），1∶27（含穿心莲内酯磺化物0.926mg/mL），1∶20（含穿心莲内酯磺化物1.25mg/mL），设置样本对照，即将注射用水与基础样本按照1∶20的比例进行混合。将制备好的样本对照与不同稀释倍数的实验样本在HITACHI-7600-010全自动生化分析仪上按照浓度由低到高的顺序对其乳酸脱氢酶连续测定3次。

1.7 统计学处理

使用SPSS17.0统计软件对数据进行统计学处理，得出乳酸脱氢酶的干扰效应点估计值（dobs）、干扰临界值（dc）以及该项目的干扰率。

1.8 干扰判断

干扰效应点估计值（dobs）=实验样本各项目平均值-对照样本各项目平均值，

（dnull为无效假设规定的值，通常为0，S表示标准差，α=0.05，Z1-α/2=1.96，n表示重测次数），如|dobs|＞dc则该浓度的药物对乳酸脱氢酶存在干扰，相反，如|dobs|＜dc,则该药物浓度对乳酸脱氢酶无干扰[1]。

1.9 干扰率计算

2 结果

2.1 计算干扰临界值

基础样本乳酸脱氢酶测定结果中x=180.9，S=2.5，依据干扰临界值公式得出dc=2.83。

2.2 喜炎平注射液对LDH的干扰分析

喜炎平注射液对LDH（乳酸底物法）的测定有正向干扰，干扰率按稀释倍数由低到高分别为19.8%，14.7%，9.4%，5.7%，2.1%，0.77%。产生干扰的最低稀释倍数为1：133（含穿心莲内酯磺化物0.188mg/mL），dobs=3.6，dc=2.83。

2.3 喜炎平注射液浓度与LDH干扰效应点估计值的关系

表 达 式 为：Y=0.7768X2-12.069X+45.31，R2=0.9981。见表2。

3 讨论

喜炎平注射液是一种中药制剂，从穿心莲叶中制取出穿心莲乙素，经过磺化后制成磺酸盐注射溶液，其有效成分为穿心莲内酯磺化物。通过改变穿心莲内酯的空间结构，阻断DNA复制，使细菌和病毒受到抑制[10]。与传统中药注射剂比较，喜炎平注射剂成分很明确，穿心莲内酯磺化物具有抗病毒、提高机体免疫力的作用[11]。

表2 不同浓度的喜炎平注射液对LDH的分析干扰（n=3）

喜炎平注射液有相对较好的安全性及有效性[12]，其对上呼吸道感染、手足口、小儿腹泻、老年带状疱疹、哮喘，但用药时也需要注意迟发性过敏反应的发生[13-18]。喜炎平在儿童疾病治疗过程中，一定注意用量。剂量过大、频率过高都会加大不良反应出现的概率，需按患者年龄、体质规范用药[19]，临床用药时需遵循辨证论治原则，合理用药，安全用药[20]。

本研究通过体外干扰筛选和剂量效应试验得知，不同浓度的喜炎平注射液对乳酸脱氢酶测定（乳酸底物法）有一定的正向干扰，干扰原因尚未明确，亟待进一步研究。实验表明，注射喜炎平注射液作为干扰物对乳酸脱氢酶测定的最低干扰稀释倍数为1：133（含穿心莲内酯磺化物0.188mg/mL）。随着中药制剂的发展，越来越多的中药制剂应用于临床治疗过程中，中药注射剂在起到治疗作用的同时，也存在不少的安全隐患[21]，特别是随着医学检验检测技术水平的提高，临床医师对患者病情的疗效观察越来越依赖检测数据，这使临床医师选择的用药剂量及用药后的检测时间段就成了反映患者检测项目结果与患者自身真实病情的关键所在。此外，药品说明中可写入该药物对检验结果的影响，从而使检验结果更加准确地反映患者的自身情况[22]。在日常的检测工作中，检验人员需与临床医师多沟通，了解患者的用药方案，对可疑结果应建议停掉可能产生干扰的药物一段时间后再进行复查[23]。作为一名检验人员，我们更应该注意分析前的质量保证，加强与临床科室的沟通，以便更好的服务患者，避免误诊，提高患者的治愈率。