豇豆中5种有机氯和菊酯类农药残留的毛细管气相色谱测定

周振荣 黄敏 黎小鹏 陈楠 马世柱

摘 要：本文建立了豇豆中五氯硝基苯、乙烯菌核利、异菌脲、氟氰戊菊酯和氟胺氰菊酯5种有机氯和菊酯类农药的气相色谱ECD检测器测定方法。样品经乙腈提取，氮吹浓缩后弗罗里矽柱固相萃取小柱净化，正己烷定容后上机测定。五氯硝基苯、乙烯菌核利、异菌脲、氟氰戊菊酯和氟胺氰菊酯等5种有机氯和菊酯类农药在0.05～1.0 mg/L范围内均具有较好的线性关系，相关系数均不低于0.99897，待测5种有机氯和菊酯类农药在0.3mg/kg和0.8mg/kg两个水平加标回收率为80.3%～105.4%，相对标准偏差为5.8%～11.4%。该方法灵敏度和精密度都能满足蔬菜农药残留检测的要求，且前处理较为简单，杂质干扰少，适合在同行检测机构推广使用。

关键词：气相色谱法；豇豆；有机氯农药；拟除虫菊酯类农药；残留量

豇豆是我国栽培面积较大的一种蔬菜，尤其在南方热带亚热带地区广泛种植。然后，豇豆在种植过程中容易受到虫害，若不施用农药，很难获得理想的收成。然后，施用农药很容易造成豇豆农药残留超标，自从海南毒豇豆事件爆发后，豇豆农药残留问题引起了大家的高度重视。

目前有关豇豆农药残留检测主要集中在有机磷农药和氨基甲酸酯农药[1-3]，日常有关蔬菜农药残留快速检测國标也主要是针对有机磷和氨基甲酸酯类农药。

而豇豆中有机氯和拟除虫菊酯类农药残留检测鲜见报道。本文利用气相色谱ECD检测器同时对豇豆中五氯硝基苯、乙烯菌核利、异菌脲、氟氰戊菊酯和氟胺氰菊酯5种有机氯和菊酯类农药进行快速测定，该方法回收率和灵敏度均较高，满足农药残留分析检测的要求。

一、实验部分

1.实验仪器

配有ECD检测器的7890A型气相色谱仪（美国安捷伦），BSA22型百分之一电子分析天平（赛多利斯），T-18 basic型匀浆机（IKA），HGC-24A型氮吹仪（天津恒奥），24管固相萃取装置（Supelco），VORTEX 3型旋涡混合器（IKA）。

2.实验试剂及耗材

前处理用乙腈、氯化钠、丙酮和正己烷均为分析纯，金华大品牌；弗罗里矽柱固相萃取小柱（1000mg 6mL），CNW公司生产；最终净化和定容用丙酮和正己烷均为色谱纯，Genius公司生产；过滤用2毫升一次性注射器，双鸽集团公司生产；过滤用0.22 μm有机相针筒过滤器，CNW公司生产； 2毫升进样瓶，安捷伦公司生产。

3.标准溶液的配置

五氯硝基苯、乙烯菌核利、异菌脲、氟氰戊菊酯和氟胺氰菊酯5种有机氯和菊酯类农药标准品均从农业部环境保护科研监测所（天津）采购，浓度分别为1000mg/L，用不含以上5种有机氯和菊酯类农药的豇豆正己烷基质溶液将以上5种有机氯和菊酯类农药标准品配置成浓度分别为0.05、0.1、0.2、0.5、1.0 mg/L的混合标准溶液，待上机测定。

4.样品提取和净化

用百分之一电子分析天平称取约20.0g捣碎的豇豆样品到150mL烧杯中，量取40.0mL分析纯乙腈溶液到烧杯中，以10000r/min的速度高速匀浆2min左右，将匀浆后的样品提取液过滤，滤液收集到装有7g左右氯化钠的具塞锥形瓶中，带塞剧烈震荡2min，室温静置30min，使乙腈和水相完全分层。

用移液管从具塞锥形瓶中准确移取10.00mL上层乙腈溶液到10mL刻度离心管中，放入氮吹仪边通氮气边以75℃温度加热，当刻度离心管吹至近干时，从氮吹仪拿出刻度离心管并冷却，用移液管准确移取2.00mL色谱纯正己烷溶解残渣，待固相萃取净化。

净化用弗罗里矽柱固相萃取小柱预先分别用5.0mL色谱纯丙酮+正己烷（10+90）混合溶液、5.0mL色谱纯正己烷预淋洗活化，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即倒入上述待净化正己烷溶液，15mL尖底离心管收集洗脱液，用10mL丙酮+正己烷（10+90）分两次冲洗刻度离心管后过柱。将装有洗脱液的尖底离心管置于氮吹仪，60℃氮吹至近干，用色谱纯正己烷定容至5mL，旋涡混合均匀，过0.22 μm有机滤膜，供气相色谱分析测定。

5.上机测定条件

色谱柱：HP-5柱 30 m×320 μm×0.25 μm；载气：氮气；载气流速：2.5 mL/min；尾吹气：氮气60 mL/min；进样口温度：200 ℃；检测器及温度：ECD 300 ℃；程序柱温：150 ℃，保持2min，以8℃/min升温至260℃，保持8 min；进样体积：1 μL；进样方式：分流进样；分流比：10：1；定量方法：外标法。

二、结果与讨论

1.5种有机氯和菊酯类农药的标准色谱图

由于待测的5种有机氯和菊酯类农药极性均较低，实验直接选择弱极性的固定相HP-5柱作为分析柱，按照上述1.5的上机测定条件，测定待测的5种有机氯和菊酯类农药混合标准品，得到5种有机氯和菊酯类农药混合标准品色谱图（图1），测定结果表明，5种待测有机氯和菊酯类农药在21分钟内获得了良好分离。

1.五氯硝基苯；2.乙烯菌核利；3.异菌脲；4-1.氟氰戊菊酯-1； 4-2.氟氰戊菊酯-2；5. 氟胺氰菊酯

2.标准曲线、线性范围及检出限

将上述1.3配置好的五氯硝基苯、乙烯菌核利、异菌脲、氟氰戊菊酯和氟胺氰菊酯5种有机氯和菊酯类农药豇豆正己烷基质混合标准溶液直接用气相色谱ECD检测器测定。以各种农药标准品色谱峰峰高比噪音S/N>3计算方法定性限，以各种农药标准品色谱峰面积对该农药的浓度绘制标准曲线，得到各农药的线性方程及相关系数（表1）。五氯硝基苯、乙烯菌核利、异菌脲、氟氰戊菊酯和氟胺氰菊酯5种有机氯和菊酯类农药在0.05-1.0mg·L-1范围内呈现出较好的线性关系，r2均不低于0.99897。

3.方法回收率和精密度

在不含待测五氯硝基苯、乙烯菌核利、异菌脲、氟氰戊菊酯和氟胺氰菊酯5种有机氯和菊酯类农药的空白豇豆样品中分别添加0.3mg/kg和0.8mg/kg两个水平的5种有机氯和菊酯类农药混合标准溶液进行加标回收实验，并进行6个样品重复测定，待测的5种有机氯和菊酯类农药的加标回收率在80.3%～105.4%之间，6个重复样品的相对标准偏差在5.8%～11.4%之间。方法回收率和精密度均能满足蔬菜中农药残留检测的要求。

三、结语

本文利用乙腈提取，氮吹浓缩后弗罗里矽柱固相萃取小柱净化，正己烷定容后上机测定，建立了气相色谱ECD检测器测定豇豆中5种有机氯和菊酯类农药的快速测定方法。方法灵敏度和精密度都能满足蔬菜农药残留检测的要求，且前处理较为简单，杂质干扰少，适合在同行检测机构推广使用。

参考文献：

[1] 康文靖，刘照清，彭润英.高温季节蔬菜施用有机磷农药残毒残留试验研究[J].农业环境与发展，2009，（6）： 80-84.

[2] 邵金良，黎其万，刘宏程，等.高效液相色谱法测定蔬菜中8种氨基甲酸酯类农药残留[J].现代食品科技，2011，27（7）：856-860.

[3] 秦珑，杨梦祺，王建营，等.蔬菜中多种有机磷农药残留量的毛细管气相色谱测定法[J].职业与健康，2010，26（2）：165-167.

作者简介： 周振荣（1963-）， 男，广东茂名人，大专。

通讯简介： 黎小鹏（1965-）， 女， 广东中山人，高级农艺师。