争议父与生父存在近亲血缘关系1例

陈 芳，顾玉娣 ，余家树 ，常彩琴，严品华，徐恩萍

（1.浙江汉博司法鉴定中心，浙江 杭州 310000；2.浙江大学司法鉴定中心，浙江 杭州 310000）

1 案 例

1.1 简要案情

当事人王某怀疑孩子为其妻子与父亲所生，携带本人、孩子生母及孩子血样来本中心，要求鉴定自己与孩子之间是否存在亲生血缘关系。经常染色体STR分型检测和Y-STR分型检测之后无法排除王某与孩子之间的亲生血缘关系，因此补送王某父亲样本进行检测。

1.2 检验方法

1.2.1 DNA提取

采用常规Chelex-100法[1]分别提取王某、王某父亲、孩子母亲与孩子血样DNA，采用人类STRtyper-21G扩增荧光检测试剂盒、STRtyper-10G试剂盒（宁波海尔施基因科技有限公司）进行27个常染色体STR基因座和Amelogenin性别基因座分型检测，采用Goldeneye®DNA身份鉴定系统20Y［基点认知技术（北京）有限公司］进行20个Y-STR基因座的分型，采用Investigator DIPplex试剂盒（德国QIAGEN公司）进行30个常染色体InDel位点检测，扩增体系和扩增程序按相关操作手册进行。

1.2.2 STR分型

采用9700型PCR仪（美国AB公司）进行PCR扩增，使用3130xl基因分析仪（美国AB公司）进行电泳分离，使用GeneMapper®ID v3.2.1软件（美国Thermo Fisher Scientific公司）处理电泳数据，实验过程参照操作手册。

1.3 检验结果

1.3.1 常染色体STR基因分型及Y-STR基因分型结果

对27个常染色体STR基因座（D19S433、D5S818、D21S11、D18S51、D6S1043、D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、CSF1PO、Penta D、vWA、D8S1179、TPOX、Penta E、TH01、D12S391、D2S1338、FGA、D1S1656、D18S1364、D13S325、D2A1772、D11S2368、D22-GATA198B05、D8S1132、D7S3048）和 Amelogenin 性别基因座进行STR分型检验，其中王某与孩子在D19S433、D3S1358基因座不符合遗传规律：王某D19S433基因座分型为13/13，孩子D19S433基因座分型为14/16.2；王某D3S1358基因座分型为15/17，孩子D3S1358基因座分型为14/16，且不符合等位基因之间均只存在增加或者减少一个重复单位差异的遗传定律。王某父亲与孩子在27个常染色体STR基因座均符合遗传定律。在20个Y-STR基因座的分型检测中，王某、王某父亲及孩子Y-STR分型结果均一致。

1.3.2 30个常染色体InDel位点检测结果

对王某及孩子样本进行30个常染色体InDel位点检测结果见图1～2。王某与孩子在D40、D125、D64三个InDel位点不符合遗传规律。王某父亲与孩子在30个常染色体InDel位点检测结果均符合遗传规律。

图1 王某（上）与孩子（下）D40 InDel位点不符合遗传规律

图2 王某（上）与孩子（下）D125、D64位点不符合遗传规律

2 讨 论

本案例经常染色体STR分型检测，王某与孩子在D19S433、D3S1358基因座不符合遗传规律，且不符合等位基因之间均为增加或者减少一个重复单位差异的遗传定律，无法给出明确鉴定结论。运用Investigator DIPplex试剂盒进行30个常染色体InDel位点补充鉴定，在30个常染色体InDel位点基因座中，有三个InDel位点不符合遗传规律。结合常染色体STR分型结果及InDel分型结果，可以排除当事人王某与孩子之间存在亲生血缘关系。

日常检验鉴定中，受理案件时，一定要充分理解被鉴定人的委托要求，特别是对一些争议父与生父存在近亲血缘关系的案例[2]。此类案件，孩子生母一定要参与，涉案的被鉴定父亲和怀疑父亲尽可能都参与鉴定。本案中，如果事先没有了解被鉴定人的委托要求，仅仅当成普通的三联体亲子鉴定，在进行27个常染色体STR检测之后，出现2个基因座位点不符合遗传规律，均为增加或者减少一个重复单位的差异，且累积亲权指数（cumulative paternity index，CPI）大于10000，这种情形很容易给出错误的鉴定意见。在乱伦亲子鉴定中，增加检测常染色体STR比增加检测性染色体STR更有效，在常染色体STR不能满足鉴定要求时，也可以补充InDel位点和SNP位点进行补充鉴定。

InDel是基因组等位基因中插入或者缺失长度不等的小DNA片段[3]，在个体分布上呈现长度多态性，因而可以作为DNA的分子标记用于祖先遗传信息、群体遗传结构等分析及法医物证学鉴定。作为新一代遗传标记，InDel兼具STR和SNP的优点。InDel标记位点遍布基因组[4]，数量多、突变率低、片段短，适用于高度降解样本的检测，并可通过DNA毛细管电泳分型技术平台进行分析，易于普及，在群体中有较好的遗传多态性，可作为特殊检案有效的补充鉴定工具。