自体CIK细胞联合化疗治疗老年急性髓细胞白血病的临床研究

刘金荣，韩宗政，熊　勤，赵　杰，李　苗,姚　芬

(湖北省汉川市人民医院,湖北 汉川 431600)

白血病发病原因为机体造血干细胞功能异常，细胞无法完全成熟导致细胞发育停滞[1]。随着我国老龄化趋势日益加剧，白血病在老年人群中的患病率激增，绝大部分患者为急性白血病，老年人群自身各器官功能减弱，免疫力降低，使得发生急性白血病后病死率较高。如何有效延缓病情进展、降低老年急性白血病病死率成为目前学术界研究的重点[2]。本研究采用自体CIK细胞联合化疗治疗老年急性髓细胞白血病患者取得了满意的临床效果，现报道如下。

1　临床资料

1.1一般资料选取我院2014年1月—2016年12月收治的12例老年急性髓细胞白血病患者，均符合白血病的临床诊断标准[3]，年龄61～85岁，患者或监护人签署知情同意书，排除年龄低于60岁者，严重肝肾脏器疾病者，对本研究使用药物过敏者及伴其他影响本次研究结果因素者。随机将患者分为2组：观察组6例，男4例，女2例；年龄61～85(68.19±7.93)岁；病理分期M4期2例，M5期2例，M6期2例；基础疾病为高血压1例，糖尿病2例，其他慢性疾病3例。对照组6例，男3例，女3例；年龄62～84(68.55±8.58)岁；病理分期M4期1例，M5期3例，M6期2例；基础疾病为高血压2例，糖尿病1例，其他慢性疾病3例。2组性别、年龄、病理分期及基础疾病情况比较差异均无统计学意义(P均>0.05)，具有可比性。

1.2治疗方法对照组给予常规化疗：米托蒽醌6 mg/(m2·d)静滴，第1—3天：阿糖胞苷100～150 mg/(m2·d)静滴，第1—5天。每疗程间隔2～3周。完全缓解后用原方案巩固2个疗程。观察组在常规化疗基础上给予自体CIK细胞回输。由取得专业CIK质控资格的技术工作人员制备自体CIK细胞，然后采集患者入组时清晨空腹静脉血60 mL, 严格按照操作规范在无菌条件下分离单个核细胞，调整细胞浓度至 4×106mL-1， 加入重组人γ-干扰素(rhIFN-γ)2 000 IU/mL，置于37 ℃，CO25%无血清培养基中悬浮培养，第2天在培养基中添加anti-CD3McAb 50 ng/mL和注射用重组人白细胞介素-2(rhIL-2，江苏金丝利药业有限公司生产，国药准字S10970054)1 000 IU/mL， 分别于第4，7，10，13天添加rhIL-2以调节细胞密度。当CD8+细胞比例>40%、CD3+细胞比例>70%、CD3+CD56+细胞比例>30%时定义为CIK细胞表型成熟[4]。然后每次给予CIK细胞(2～4)×109个回输，2次/d，回输结束给予rhIL-2，2 mIU/d, 10 d为1个疗程，共3个疗程。

1.3观察指标统计2组患者治疗前后外周血中CD3+、CD8+及CD3+CD56+水平变化情况、出现感染次数及持续时间、临床输血量。

1.4统计学方法采用SPSS 20.0软件包进行数据处理。计数资料比较采用2检验；计量资料采用表示，组间比较采用t检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2　结　　果

2.12组治疗前后免疫细胞指标比较治疗前2组外周血CD3+、CD8+及CD3+CD56+水平比较差异无统计学意义(P均>0.05)；治疗后观察组上述指标显著增高(P均<0.05)而对照组显著降低(P均<0.05)，且观察组显著高于对照组(P均<0.05)。见表1。

2.22组治疗前后感染控制情况比较治疗前2组感染次数及持续时间比较差异无统计学意义(P均>0.05)；治疗后观察组感染次数显著少于治疗前及对照组(P均<0.05)，持续时间明显短于治疗前及对照组(P均<0.05)，而对照组感染次数及持续时间均无明显变化(P均>0.05)。见表2。

表1　2组治疗前后免疫细胞指标比较

注：①与治疗前比较，P<0.05;②与对照组比较，P<0.05。

表2　2组治疗前后感染控制情况比较

注：①与治疗前比较，P<0.05;②与对照组比较，P<0.05。

2.32组治疗前后输血量比较治疗前2组输血量比较差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后观察组输血量显著减少(P<0.05)，对照组无明显变化(P>0.05)。见表3。

表3　2组治疗前后输血量变化情况比较

注：①与治疗前比较，P<0.05;②与对照组比较，P<0.05。

3　讨　　论

急性髓细胞白血病患者由于机体造血系统异常而发病，老年患者由于机体器官功能及免疫力降低，发病率要高于低龄人群[5]。而老年人群普遍合并多种慢性基础疾病，故发病后病情进展快速[6]。针对急性髓细胞白血病的临床治疗主要以常规化疗为主，但老年患者由于机体器官功能及免疫力较弱，化疗后易反复感染，且感染持续时间长，导致疾病复发率较高，治疗效果不佳，病死率增高[7]。

为了提高老年急性髓细胞白血病患者的化疗耐受性，提高治疗效果，改善机体内环境，减少复发与死亡，医学工作者开始使用自体CIK细胞回输联合化疗治疗[8]。

CIK细胞临床特点为细胞增殖速度快，抗肿瘤活性细胞通过高速增殖，可改善机体免疫活性[9]；细胞具有识别肿瘤的机制，对正常的细胞无毒性作用；属于自体活化细胞，进入体内无排异性[11]。由于CIK细胞同时表达CD3+和CD56+2种膜蛋白分子，故该细胞即具备T淋巴细胞强大的抗瘤活性，又具备NK细胞的非MHC限制性杀瘤优点，临床又将CIK细胞叫做NK细胞样T淋巴细胞[11]。CIK细胞免疫疗法属于肿瘤治疗技术的新研究方向，该技术采集患者体内少量外周血，通过无菌实验室内诱导、培养免疫细胞，之后回输给患者，可刺激、激活机体免疫活性，有效拮抗肿瘤细胞生成与正常细胞癌变[12]。CIK细胞溶瘤效果属于非MHC限制性，肿瘤组织类型对其治疗作用无影响，具有广谱抗肿瘤效果，特别是对高抗原表达的癌症作用更好，如髓性白血病[13]。

本研究结果显示，治疗后观察组患者感染次数明显减少，感染持续时间明显缩短，外周血CD3+、CD8+及CD3+CD56+水平较治疗前显著增高，输血量较治疗前显著减少；而对照组外周血指标均降低，其余指标无明显变化。说明CIK细胞回输后患者机体中免疫功能细胞显著增多，机体免疫功能增强，从而提高了机体抗感染能力，减少了感染频次，缩短了感染持续时间，输血量也显著减少，与文献[14]报道相符，提示自体CIK细胞回输联合常规化疗有助于改善患者机体细胞免疫功能，降低感染率，临床应用前景广阔。