突触融合蛋白6与突触融合蛋白8的表达在胃癌预后中的价值

马丽，仝建军，薛建波，徐涛

（首都医科大学大兴教学医院 消化内科，北京 102600）

胃癌（gastric cancer, GC）是导致患者死亡的第2大常见恶性肿瘤，全球每年有约80万人因胃癌致死[1]。尽管关于胃癌的早期诊断和各种治疗方法有了较大的进展，但依然存在治愈难、预后差的难题[2-3]。因此，为了提高胃癌患者的临床疗效，需要进一步的探索胃癌发生、发展进程中相关的分子机制，寻找潜在的治疗靶点和预后标志。可溶性N-己基顺丁烯二酰亚胺敏 感 因子（N-ethyl-maleimide-sensitive factor, NSF）附着蛋白（soluble NSF attachment proteins, SNAP）的膜受体SNARE（SNAP receptors）蛋白在肿瘤的发生、发展及侵袭转移进程中扮演着重要的角色[4-5]。其成员突触融合蛋白Syntaxin 6（STX6）、Syntaxin 8（STX8）蛋白分别在食管鳞癌[6]和脑胶质瘤[7]的发生、发展进程中发挥重要作用，敲低STX8基因能够有效抑制肿瘤细胞增殖。但STX6和STX8是否与胃癌的发生、发展及预后有关，目前还不清楚。因此，本文通过Kaplan-Meier plotter（KM plotter）在线数据库分析STX6和STX8表达与胃癌患者临床病理特征的相关性，并探讨其在胃癌患者预后中的意义和价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 KM plotter在线数据库分析

通过在线数据库KM plotter（http：//kmplot.com/gastric）获得的882例胃癌患者临床病理信息，包括临床分级、淋巴结转移状态、远处转移状态、Lauren分类、分化程度及HER2状态。对STX6和STX8在胃癌患者总生存期（overall survival, OS）中的预后价值进行在线分析。根据STX6和STX8基因表达水平高于或低于中位数，分为高表达和低表达，并得出相应的风险比（hazard ratio, HR）、95%置信区间（CI）和P值。

1.2 统计学方法

数据分析采用SPSS 16.0统计软件，采用χ2检验对临床资料进行相关性分析，采用Kaplan-Meier法对患者的生存危险比及95%CI进行分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 STX6和STX8 mRNA表达与胃癌预后分析

STX6的Affymetrix ID为：212799_at。KM plotter在线数据分析发现，STX6 mRNA的高表达与胃癌患者较好的OS相关，STX6 mRNA高表达胃癌患者的OS要好于低表达患者（P＜0.05），风险比（95%CI：0.57，0.86）]。STX8的Affymetrix ID为：204690_at。STX8 mRNA的高表达与胃癌患者OS相关，STX8 mRNA高表达胃癌患者的OS要好于低表达患者（P＜0.05），风险比见附图。

2.2 STX6和STX8 mRNA表达与胃癌患者临床病理特征的相关性

进一步探究STX6、STX8 mRNA表达与胃癌临床病理特征的相关性，发现STX6 mRNA表达与胃癌患者的Lauren分型中混合型、HER2状况、淋巴结转移、无远处转移相关（P＜0.05）（见表1）。STX8 mRNA表达与胃癌患者的临床分级的Ⅱ级和Ⅳ级、Lauren分型中肠型和弥漫型、HER2阴性、无远处转移相关（P＜0.05）（见表2）。

附图 STX6及STX8 mRNA表达与胃癌患者生存时间曲线图

表1 STX6 mRNA表达与胃癌患者临床病理特征的相关性

表2 STX8 mRNA表达与胃癌患者临床病理特征的相关性

3 讨论

随着对幽门螺杆菌、易致癌食物等易导致胃癌发生的危险因素的不断控制以及肿瘤治疗手段的长足发展，胃癌发生率及病死率有一定程度的降低，但由于其转移复发率依然居高不下，胃癌患者的预后及远期生存仍是亟待解决的难题[8]。Kaplan-Meier plotter通过采用（Gene Expression Omnibus, GEO）数据库检测某个基因在癌症患者中的预后价值。Kaplan-Meier plotter作为1个有效的工具，目前已经通过该平台确定许多可以作为预后标志或潜在药物靶点的基因[9-12]。

SNARE蛋白是作为跨膜蛋白是真核生物中调节膜融合的关键因子，参与细胞各种生理活动[13-14]。其中STX6和STX8是其亚家族Syntaxin的成员，STX6作为一种囊泡转运蛋白，参与胞内蛋白质转运，尤其是在细胞膜重建过程中发挥关键作用[15]。STX8在胞内主要定位于高尔基体、溶酶体和胞内体的膜上，参与细胞内物质运输及膜融合过程[16-17]。研究表明[18]，STX8能够与STX7蛋白、小泡运输通过相互作用t-SNAREs同源物蛋白（vesicle transport through interaction with t-SNAREs homolog 1B, vti1b）或vti1a蛋白以及小泡相关 膜 蛋 白7（vesicle-associated membrane protein 7,VAMP7）或VAMP8蛋白在膜融合过程中形成SNARE复合体，启动囊泡融合，促进蛋白降解。研究发现[19]，STX6在肺癌、食管癌、膀胱癌等肿瘤组织中表达异常，影响食管鳞状细胞癌的生长和迁移。STX8在多形性脑胶质瘤中与有丝分裂诱导基因6（mitogen-inducible gene-6, MIG-6）蛋白形成复合体，参与表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）的降解，影响EGFR介导的促肿瘤信号，进而影响脑胶质瘤的发生发展进程[20]。但STX6及STX8在胃癌的预后中的作用和价值还未被广泛的研究。

本研究发现，胃癌组织中STX6 mRNA的高表达与患者较好的OS密切相关，STX6 mRNA高表达的胃癌患者的OS要高于低表达患者；其表达与胃癌患者的Lauren分型中混合型、HER2状况、淋巴结转移、无远处转移密切相关。DU等[6]研究发现，STX6在食管鳞状细胞癌中上调表达，沉默STX6能抑制食管鳞状细胞癌细胞增殖，提示STX6具有一定的促癌作用。但本研究中，STX6 mRNA高表达的胃癌患者OS较好，提示STX6在胃癌发生、发展进程中发挥一定的抑癌作用。因此，STX6在不同的肿瘤中可能发挥不同的功能，也可能是由于存在肿瘤差异性导致，但目前有关STX6在肿瘤中具体的作用机制尚不清楚，还需要进一步的探索。本研究发现，STX8 mRNA的高表达与胃癌患者较好的总生存期OS密切相关，STX8 mRNA高表达胃癌患者的OS要好于低表达患者；其表达与胃癌患者的临床分级的Ⅱ级和Ⅳ级、Lauren分型中肠型和弥漫型、HER2阴性、无远处转移密切相关。有报道称STX8在原发性肝癌组织中表达下调，并与肿瘤的TNM分期及淋巴结转移相关[21]，提示STX8可能在肝癌的发生发展进程中发挥抑癌基因作用；但有研究表明[7]，在脑胶质细胞瘤U251细胞中靶向敲低STX8基因能够有效抑制细胞增殖、迁移及侵袭能力，提示STX8可能在脑胶质瘤的发生、发展进程中发挥促癌基因功能。因此，STX8基因可能在不同的肿瘤中发挥不同的作用。本研究发现STX8 mRNA高表达胃癌患者OS较好，提示STX8可能对胃癌的发生、发展产生一定的抑癌作用，但还需要进一步的研究证实。胃癌中STX6、STX8的表达水平能够作为一种潜在的胃癌远期预后的评价指标。但还需要大样本的临床数据对此进行更进一步的检测和验证。

综上所述，STX6、STX8 mRNA高表达可以提高胃癌患者的OS，与胃癌较好的预后密切相关。通过检测胃癌组织中STX6、STX8的表达水平，或许能够作为胃癌患者预后的一种预测指标，这将有助于开发出能够更准确地预测患者预后的工具。尽管通过统计分析表明STX6及STX8在胃癌中具有一定的抑癌作用，但有关其具体的作用机制还尚不可知，仍需要基础研究来探讨。