肉种鸡共轭亚油酸(CLA)饲粮中添加不同比例的大豆油对其繁殖性能的影响

刘雪兰，张 燕，伏春燕，魏祥法，阎佩佩，石天虹，董以雷，刘瑞亭

(山东省农业科学院家禽研究所，山东济南 250023)

我国商品肉鸡生产存在的比较突出的问题是皮脂和腹脂沉积过度，因此，降低商品肉鸡体脂沉积从而改善肉品质广受科研工作者的关注。肉鸡脂肪代谢的调控途径有多种，其中通过母体的脂肪酸营养来调控子代的脂肪代谢成为研究的热点之一。共轭亚油酸(CLA)是一种新型的体脂调节剂，具有抑制机体脂肪沉积的生物学活性，但是其价格昂贵，直接用于商品肉鸡会增加成本，很难推广应用，为此，设想将共轭亚油酸应用于肉种鸡饲粮，将其沉积在种蛋中进而调控商品蛋的脂肪代谢。但是前期研究发现，含有共轭亚油酸的种蛋孵化率极低，高CLA含量的种蛋孵化率甚至为零。Aydin 等[1-2]研究表明，种鸡和种鹌鹑饲粮中添加CLA，受精蛋的孵化能力完全丧失，这些研究似乎预示着通过母体共轭亚油酸调控子代脂肪代谢成为不可能，成为开展母源性CLA研究的瓶颈。该研究的目的是在孵化率极低的种鸡CLA饲粮中添加不同比例的大豆油以调控CLA种蛋中的脂肪酸构成，从而得出使其孵化率较好恢复的大豆油添加量，明确使CLA种蛋孵化能力丧失和恢复的蛋黄脂肪酸组成的差异，解决母源性CLA调控商品肉鸡脂肪代谢研究的瓶颈问题，为下一步研究提供前体条件。

1 材料与方法

1.1试验动物与试验设计

1.1.1试验动物与分组。36周龄健康肉种母鸡600只，种公鸡72只，分为6个组，每组设4个重复，每重复28只，其中母鸡25只，公鸡3只。

1.1.2试验材料。共轭亚油酸(CLA)油，购自蓬莱市海洋生物有限公司，CLA含量80%(CLA-80)；福临门大豆油，购自当地超市，大豆油中含棕榈酸7%～10%、硬脂酸2%～5%、花生酸1%～3%、油酸22%～30%、亚油酸50%～60%、亚麻油酸5%～9%。

1.1.3试验设计。第1组为对照组，饲喂普通日粮；第2～6组为试验组，饲喂0.5%CLA日粮，试验各组大豆油添加量分别为0%、2%、4%、6%、8%。

1.1.4试验饲粮。试验鸡日粮营养标准采用NY/33—2004。1～6组营养水平一致，试验饲粮配方见表1。其营养成分含量如下：粗蛋白16.5%、代谢能11 MJ/kg、蛋氨酸0.32%、蛋+胱0.61%、钙3.5%、有效磷0.42%。

表1 试验饲粮配方

1.2饲养管理试验鸡采用本交笼公母混养，自然交配。人工喂料，自由饮水，每天光照16 h，光照强度20 lx，舍内温度22～32 ℃。

1.3种蛋的收集与储存试验开始14 d后，收集拟孵化的种蛋，连续收集5 d。将每天收集的种蛋放在密闭容器中用高锰酸钾熏蒸消毒30 min，取出放入温度为15 ℃、相对湿度为75%的储藏室内。

1.4种蛋的选择与孵化管理每重复组选择75枚形状正常、大小均匀、蛋壳干净光滑、质量为52～56 g的种蛋进行孵化。孵化温度：1～7 d 38.4 ℃,7～19 d 37.8 ℃,19～21 d 37.3 ℃；孵化湿度：65%～70%；孵化器换气：孵化1～2 d把进、出气孔关上或开一个小口，使机内的温度上升快并保持平稳；3～7 d每天换气2次，每次3 h；7 d以后打开进出气孔，连续换气；翻蛋：每昼夜翻蛋4次，每6 h 1次，翻蛋角度为90°；照蛋：分别在7、11、17 d时各照蛋1次，挑出无精蛋和死胚；落盘：18 d，将蛋平码在出雏盘上。

1.5检测指标与方法

1.5.1种蛋孵化率。受精蛋孵化率=孵出数/受精蛋数×100%。

1.5.2蛋黄脂肪酸含量。将蛋黄冷冻干燥成蛋黄粉，按照GB 5009.168—2016的方法进行测定。

1.5.3种蛋蛋品质。每重复收集同一天的种蛋20枚进行蛋品质测定。蛋重、蛋白高度、蛋黄颜色和哈氏单位用EMT-5200型多功能蛋品质量测量仪测定，蛋壳强度用KQ-1A型TENOVO蛋壳强度测定仪测定。

1.5.4种蛋抗氧化指标。总抗氧化能力(TAOC)、丙二醛(MDA)采用武汉基因美试剂盒ELISA法测定。

1.6数据统计分析采用SPSS统计软件进行统计处理。采用单因子方差分析，用LSD做平均数间的两两比较，检验显著性水平0.05，试验结果以平均值±标准差表示。

2 结果与分析

2.1不同肉种鸡饲粮对受精蛋孵化率的影响从表2结果可以看出，肉种鸡饲粮添加0.5% CLA油，受精蛋孵化率仅为6.9%，远远低于添加0.5%的大豆油组；肉种鸡CLA饲粮中补充不同比例的大豆油，受精蛋孵化率会有不同程度的改善，添加2%大豆油时，孵化率恢复为56.7%;添加4%大豆油时，受精蛋孵化率达86.2%；大豆油的添加量为6%和8%时，受精蛋孵化率又逐渐降低。由此可以得出：肉种鸡日粮添加0.5%CLA不利于种蛋的孵化，但是，同时补充适量的大豆油可以提高种蛋的孵化率，补充量以4%～5%为宜。

表2 孵化结果

2.2不同肉种鸡饲粮对种蛋蛋黄脂肪酸组成的影响由表3可知，各组蛋黄中的己酸、正癸酸、月桂酸的含量差异不显著(P>0.05)，所测的其他脂肪酸含量差异均显著(P<0.05)，具体如下：2组(纯CLA饲粮组)的饱和脂肪酸C14∶0、C16∶0、C18∶0、C20∶0、C22∶0、C24∶0含量显著大于1组(纯大豆油组)(P<0.05)，单不饱和脂肪酸C14∶1、C16∶1、C18∶1、C20∶1含量显著低于1组(P<0.05)，多不饱和脂肪酸C18∶2n6c、C18∶3n3、C20∶3n6、C20∶3n3、C20∶5n3、C22∶6n3含量与1组差异不显著(P>0.05)，而C20∶4n6含量显著低于1组，CLA-c9t11、CLA-t10c12含量显著大于1组(P<0.05)；3、4、5、6组(添加CLA+不同比例的大豆油)的上述饱和脂肪酸含量低于2组，且随着大豆油添加比例的增加而逐渐降低，单不饱和脂肪含量变化规律不明显，多不饱和脂肪酸含量逐渐增加。该结果表明，肉种鸡饲粮添加不同油脂能改变种蛋蛋黄的脂肪酸构成。

2.3不同肉种鸡饲粮对种蛋蛋品质的影响从表4可以看出，各组的蛋重、蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋白高度差异不显著(P>0.05)。此结果表明，在该研究条件下(同一营养水平不同配方)的肉种鸡饲粮对种蛋蛋品质没有影响。

表3 蛋黄脂肪酸

注：同列数据后小写字母不同表示差异显著(P<0.05)

Note:Different small letters within the same column mean significant differences (P<0.05)

表4 蛋品质指标

2.4不同肉种鸡饲粮对种蛋抗氧化能力的影响从表5可以看出，不同种蛋的总抗氧化能力有显著差异，1组和4组总抗氧化能力显著高于其他组(P<0.05)，相应，种蛋中的过氧化产物丙二醛(MDA)含量显著低于其他各组(P<0.05)。该结果表明，肉种鸡共轭亚油酸饲粮中添加不同比例的大豆油对种蛋抗氧化能力具有显著影响。

3 讨论

人们一直对通过饲粮途径来提高鸡蛋中CLA含量的方法有浓厚的兴趣，但是这种方法并没有取得成功，因为CLA会使蛋清的颜色变成粉红色，使蛋黄变硬[1，3]，而且CLA会导致种鸡和种鹌鹑的种蛋孵化能力丧失[1-2]，这种由CLA引起的种禽繁殖能力丧失使它在畜禽养殖上的应用受到质疑，甚至影响到CLA在人类膳食中的应用[4]。

表5 种蛋抗氧化指标

注：同列数据后小写字母不同表示差异显著(P<0.05)

Note:Different small letters within the same column mean significant differences (P<0.05)

研究表明，饲粮中的其他脂肪酸可以调控CLA对种蛋孵化能力的不利影响[1，4]。Muma等[5]研究得出，加入2%大豆油仅使孵化能力有小的改善，4%大豆油导致孵化率部分恢复，6%大豆油使孵化率恢复到和对照组一样的水平，添加8%大豆油时，孵化率没有进一步改善，说明大豆油消除CLA所致的种蛋孵化能力丧失问题具有明显的剂量效应。该研究结果为添加2%大豆油时，孵化率恢复为56.7%，添加4%大豆油时，受精蛋孵化率达86.2%，添加量为6%和8%时，受精蛋孵化率又逐渐降低，与Muma等的结果不完全相同，可能是由于共轭亚油酸油中CLA-t10c12的含量不同，因此，CLA剂量与植物油剂量关系没有直接的可比性。

Wilson[6]报道，种蛋中脂肪酸的构成会影响胚胎的发育和种蛋孵化率。Tullett[7]研究认为，当蛋黄中的硬脂酸占总脂肪酸的比例大于12%，油酸的比例小于40%，这时油酸∶硬脂酸的比例降至4以下，对种蛋孵化率有不利影响。当饲粮中含有棉籽和木棉籽粕时也会产生孵化率降低的问题，原因是这些饼粕中含有环丙烯型脂肪酸，抑制鸡肝脏中Δ9去饱和酶的活性[8]。目前的研究认为，CLA对种蛋孵化率的影响是由种蛋中的脂肪酸组成发生改变而引起的，CLA种蛋中的饱和脂肪酸含量增加，单不饱和脂肪酸含量降低[1-2,4]。该研究结果表明，CLA饲粮组的饱和脂肪酸C14∶0、C16∶0、C18∶0、C20∶0、C22∶0、C24∶0含量显著大于对照组，单不饱和脂肪酸C14∶1、C16∶1、C18∶1、C20∶1含量显著低于对照组(P<0.05)，与前人的研究结论相同。

孙从佼等[9]报道，蛋壳质量对孵化率有一定的影响，蛋壳厚度太薄，则孵化期间水分散失过多，会导致孵化率降低；但是对于蛋壳厚度和蛋壳强度太大的种蛋，可能因为蛋壳致密性太强，阻碍了孵化期间种蛋与外界的气体交换，反而降低孵化率。该研究中，各组的蛋壳质量差异不显著，说明孵化率的差异与种蛋蛋壳质量无关，也说明大豆油和CLA油对蛋品质无影响。

种蛋孵化过程中产生的代谢产物对种蛋孵化率也会产生一定的影响，丙二醛(MDA)是蛋黄脂肪氧化的产物，对胚胎具有毒害作用。种蛋的总抗氧化能力越强，在孵化过程中产生的丙二醛(MDA)越少，种蛋孵化率越高[10]。该研究中各组种蛋的抗氧化能力有显著差异，1组和4组总抗氧化能力显著高于其他组，尤其高于2组，相应，种蛋中的过氧化产物丙二醛(MDA)含量显著低于其他各组，尤其高于2组，种蛋孵化率也显著高于其他组，远远高于2组。该研究的结果表明，种蛋中的CLA极易氧化，产生丙二醛(MDA)，使种蛋孵化率降低，随着大豆油的添加，种蛋中脂肪酸的构成发生变化，抗氧化能力增加，孵化过程中丙二醛(MDA)含量减少，也是种蛋孵化能力提高的因素之一。

4 结论

(1)影响种蛋孵化能力的因素很多，除环境因素外，种蛋的某些成分含量也是重要因素，该研究测定了种蛋的脂肪酸构成、种蛋的蛋品质和种蛋中的抗氧化能力指标，其中确定了脂肪酸构成和种蛋的抗氧化能力是导致孵化率改变的因素。

(2)肉种鸡饲粮中添加0.5%CLA(CAL-80)油，同时添加4%～5%的大豆油能使CLA种蛋的孵化率大幅提高。

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