儿童肾病综合征血清TGF-β1、CXCL16及血脂水平变化探析*

卢 洁

成都市第二人民医院 检验科(成都 610017)

肾病综合征(NS)典型病理特征为肾小球滤过膜通透性提高，表现出蛋白尿显著增多、高血脂症等综合征[1]。临床上90%左右NS为原发性NS(PNS)，其中超过85%为微小病变型，多对糖皮质激素敏感，即激素敏感型NS(SSNS)[2]。NS发病机制尚不明确，可能与细胞免疫、炎症等有关[3]。转化生长因子β1(TGF-β1)为一种常见细胞因子，可调节细胞增殖、分化及凋亡，可促炎症发生，诱导细胞外基质(ECM)聚集，导致多脏器纤维化[4]。CXC趋化因子配体16(CXCL16)为有趋化功能的细胞因子之一，可溶性CXCL16对CD4+T细胞、CD8+T细胞等多种细胞有趋化作用[5]，且B细胞、巨噬细胞等多种因子可表达CXCL16[6]，可见CXCL16与免疫反应、炎症反应密切相关。目前关于儿童NS与血清TGF-β1或CXCL16水平关系的相关研究报道较少。本研究旨在分析儿童NS血清TGF-β1、CXCL16和血脂水平的变化情况，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2016年1月至2017年12月成都市第二人民医院收治的NS患儿150例作为病例组。纳入标准：1)均符合PNS相关诊断标准[7]，且经血生化相关检查证实；2)均为初诊患儿；3)既往均未应用糖皮质激素或免疫抑制剂；4)均配合完成相关检查；5)资料完整。排除标准：1)继发性或先天性NS；2)有肾病家族史；3)患免疫性疾病、肿瘤、血液性疾病；4)其他原因引发的高血脂症者；5)肾功能异常、高血糖者。其中男96例，女54例；年龄2.0～13.5(6.25±1.02)岁；病例组活动期患儿100例，缓解期患儿50例(均为活动期随访到缓解期)。选择同期在该院作健康体检的正常儿童60例为对照组，男40例，女20例；年龄2～14(6.34±1.10)岁。病例组患儿和对照组儿童在性别、年龄等基本资料方面比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

病例组活动期患儿血尿标本采集前均未接受激素、免疫抑制剂干预。清晨空腹抽取各组受试者静脉血6 mL，常规离心，离心速度3 000 r/min,离心半径17 cm，离心5 min后提取血清保存于-20 ℃冰箱中。采用迈瑞BS-220全自动生化分析仪测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等血脂指标及血清白蛋白(ALB)水平，分别采取酶法与溴甲酚绿法；酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清TGF-β1、CXCL16水平，ELISA试剂盒由上海恒远生物科技有限公司生产，按照说明书操作。另外收集病例组活动期患儿24 h尿液，记录尿量，通过比色法测定其24 h尿蛋白定量，试剂盒由上海信裕生物科技有限公司提供。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 各组血清TGF-β1、CXCL16水平比较

病例组活动期患儿血清TGF-β1、CXCL16水平均明显高于病例组缓解期患儿和对照组儿童，差异有统计学意义(P<0.05)；病例组缓解期患儿上述指标与对照组儿童比较，差异均无统计学意义(P>0.05)(表1)。

表1 各组儿童血清TGF-β1、CXCL16水平比较

注：与对照组比较，*P<0.05；与病例组缓解期比较，#P<0.05

2.2 各组血脂指标和血清ALB水平比较

病例组活动期患儿TC、TG、LDL-C水平均明显高于病例组缓解期患儿和对照组儿童；ALB水平均明显低于病例组缓解期患儿和对照组儿童，差异有统计学意义(P<0.05)；病例组缓解期患儿上述指标与对照组儿童比较，差异均无统计学意义(P>0.05)(表2)。

表2 各组儿童血脂指标、血清ALB水平比较

注：与对照组比较，*P<0.05；与病例组缓解期比较，#P<0.05

2.3 血清TGF-β1、CXCL16水平和24 h尿蛋白定量、ALB、血脂相关性分析

Pearson相关分析表明，病例组活动期NS患儿血清TGF-β1、CXCL16分别与24 h尿蛋白定量、TC、TG、LDL-C呈正相关，与ALB呈负相关(P<0.05)(表3)。

表3 病例组活动期患儿血清TGF-β1、CXCL16水平与24 h尿蛋白定量、ALB、血脂的关系(r)

注：*P<0.05

3 讨论

PNS典型特征为高脂血症与低蛋白血症，前者多通过血脂指标评价，后者则以血清ALB为常见指标。临床上血脂指标包括TC、TG、LDL-C、HDL-C等，TC、TG、LDL-C中任一项或多项指标上升提示高脂血症，血脂中以TC、TG为主要成分，前者可促胆汁酸、细胞浆膜合成，后者以体内能量代谢参与为主。LDL-C属于血中胆固醇运载主要载体之一，借助自由基促使脂质过氧化物等物质产生，且其自身载脂蛋白B之赖氨酸可氧化修饰，之后其会被巨噬细胞的清道夫受体摄取，促胆固醇形成、聚集。本研究结果显示，相比正常儿童，病例组活动期患儿TC、TG、LDL-C水平均明显升高，而HDL-C无明显变化，提示TC、TG、LDL-C可能参与NS发病。同时，血脂指标方面比较，病例组缓解期患儿与对照组儿童比较，差异均无统计学意义，而缓解期患儿均由活动期随访到缓解期，说明TC、TG、LDL-C对儿童NS病情有一定的评估作用，特别是NS活动期。本研究发现，病例组活动期患儿血清ALB水平比对照组儿童及病例组缓解期儿童均明显降低，提示NS活动期血清ALB明显降低，表现出低蛋白血症症状，而经治疗随访到缓解期时患儿症状明显改善。

研究[8]表明，脂质对系膜细胞有刺激作用，促其和单核细胞相互影响，诱导单核细胞分泌释放出相关炎症因子。可见PNS患儿高血脂症表现时多伴炎症。TGF-β1被公认为是主要致纤维化因子，分布在染色体19q3上，外显子7个，其与炎症反应、肾纤维化等均相关[9]。庞楚越等[10]研究表明SSNS急性期血清TGF-β1水平上升，缓解期TGF-β1水平接近正常。刘涛等[11]研究发现SSNS活动期外周血单个核细胞TGF-β1 mRNA表达比正常儿童及缓解期显著高，提示TGF-β1参与NS发生、进展过程，其机制可能为TGF-β1引发肾间质纤维化、促细胞凋亡等。虽然检测方法不同，但本研究结果与之相符。趋化因子与炎症、免疫应答密切相关。CXCL16包括膜结合型与分泌型两种形式，前者在细胞表面跨膜式表达，不仅能发挥细胞表面之黏附分子作用，而且能发挥其清道夫受体的生物作用。膜结合型CXCL16于解整合素样金属蛋白酶10影响下会脱落成可溶型，有趋化活性，对T细胞、NKT细胞(均能表达CXCR6)有招募作用[12]。研究[13-14]表明可溶性足细胞源性CXCL16对T细胞、系膜细胞有趋化作用，诱导系膜细胞增殖。研究[15]发现，PNS患儿CXCL16水平上升，对疾病活动有较好的反映作用。本研究结果发现，NS活动期患儿血清CXCL16水平比缓解期患儿、正常儿童均明显升高，提示CXCE16与NS发病有关，其机制尚不明确，可能与其对足细胞损伤介导有关。

本研究对NS活动期血清TGF-β1、CXCL16与24 h尿蛋白定量、血脂、ALB的相关性进行分析发现，TGF-β1、CXCL16均与24 h尿蛋白定量、TC、TG、LDL-C呈正相关，与ALB呈负相关，提示TGF-β1、CXCL16均参与NS发病，与NS活动密切相关，同时TGF-β1、CXCL16与相关指标的关系保持一致性，说明二者具有相关性，共同参与疾病发生、发展过程。目前临床治疗PNS以激素干预为主，但部分患儿对激素不敏感，有研究重点分析激素敏感型NS相关指标，本研究不足之处为未根据激素敏感与否分组，有待日后通过大样本、多中心研究进一步分析。

综上所述，NS活动期患儿血清TGF-β1、CXCL16水平升高，TGF-β1、CXCL16与血脂相关指标、24 h尿蛋白定量、ALB均相关，监测血清TGF-β1、CXCL16可用于儿童NS病情活动评估。

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