周 敏 吴海生
(1.上海光明森源生物科技有限公司,上海奉贤 201419;2.上海星辉蔬菜有限公司,上海 奉贤 201419)
金针菇由营养器官(菌丝体)和繁殖器官(子实体)组成,菌丝体由孢子萌发而成,在人工培养条件下,菌丝通常呈白色绒毛状,有横隔和分枝,很多菌丝聚集在一起便成菌丝体。和其它食用菌不同的是,金针菇菌丝长到一定阶段会形成大量的单细胞粉孢子(也叫分生孢子),条件适宜可萌发成单核菌丝或双核菌丝。试验发现,金针菇菌丝阶段的粉孢子多少与金针菇的质量有关,粉孢子多的菌株质量均较差,菌柄基部颜色较深。金针菇为腐生真菌,只能通过菌丝从现成的培养料中吸收营养物质,因此培养料对金针菇的产量和质量影响较大[1]。金针菇的菌丝栽培和子实体发育所需营养包括氮素、糖类、矿质和少量的维生素类。米糠作为金针菇栽培的重要原料之一,其质量(含金针菇菌丝生长所需营养成分的多少)决定了金针菇的产量和质量[2]。为验证米糠质量对金针菇菌丝生长速度的影响,我们采集了不同来源的5种米糠进行了对比试验,现将试验结果总结如下。
供试金针菇菌株为森源J1617,上海光明森源生物科技有限公司生产种。试验工具及用品包括电炉、烧杯、玻璃棒、量筒、漏斗、纱布、三角瓶、电子称、钥匙、称量纸、PDA粉、蒸馏水、琼脂粉、不同来源的米糠、灭菌锅、超净工作台、接种针。
试验共采集了5种米糠,加上空白对照,分别标记①、②、③、④、⑤、⑥。每个标本分别做5个平板,每个平板倒PDA20 mL,除去残渣损耗,每个标本150 mL,蒸煮过程中水分会蒸发,故每个标本加水至300 mL(⑥不需要煮,直接加热水150 mL溶解完全)。采用相同方法提取不同来源米糠浸煮液配制PDA,接种相同金针菇菌种,在同一条件下培养8 d,观察菌丝长势,判断不同来源米糠对金针菇菌丝生长的影响。
取6个干净且干燥的250 mL三角瓶分别标记①、②、③、④、⑤、⑥,并分别称取PDA粉5.85 g和琼脂粉3 g置于每个三角瓶中;另取5个干净且干燥的500 mL烧杯分别标记①、②、③、④、⑤,对应称取5种不同来源的米糠15 g置于对应的烧杯中,每个烧杯分别加蒸馏水300 mL(为加快蒸煮速度,均加入已煮沸的蒸馏水)。将5个烧杯同时放在电炉上,电炉功率一致,待烧杯内液体煮沸开始计时,煮20 min,其间不停搅拌烧杯内液体,防止糊底。将煮好的米糠浸出液用4层纱布过滤,并分别取150 mL加入对应编号的三角瓶内使其完全溶解PDA。三角瓶盖好硅胶塞,放入高压灭菌锅内,121℃灭菌30 min。取出灭好菌的PDA,在超净工作台上分别倒平板,并做好标记。平板上放置同时灭菌的无菌水摇瓶,以防形成冷凝水。平板冷却固定后,取同一母种的金针菇试管接种于平板上,然后用透气性封口膜封好平板,置于19℃恒温培养箱中培养8 d,观察记录平板菌丝长势、菌丝浓白程度、粉孢子情况,分别于培养第3 d和第8 d测量菌丝直径。
菌丝生长速度(mm/d)=[(D2-D1)/2]×(n2-n1)[3]。
D1:第n1 d测得菌丝直径(mm);D2:第n2 d测得菌丝直径(mm)。
不同来源的米糠的外观及理化性质各不同,其浸出液制成的平板培养的菌丝生长情况除了生长速度不同外还会有一些不同的感官特征(无法用数据表达)。由表1可知,米糠颜色由深到浅依次为⑤>③>④>①>②,平板颜色由深到浅依次为⑤>④>①>③>②>⑥,培养8 d菌丝长势由强到弱依次为④>⑤>⑥>①>③>②、菌丝浓白程度为⑥>①>④>③>⑤>②、粉孢子由多到少依次为⑤>②>③>④>①(⑥无粉孢子)、断圈明显程度依次为⑤>④>①>②>③(⑥无断圈)。可见,不同来源的米糠浸出液对金针菇菌丝生长影响差异较大,与对照相比,④和⑤可促进金针菇菌丝生长,而①、②、③抑制菌丝生长;5种不同来源米糠处理均出现了不同程度的粉孢子和断圈,且菌丝浓白程度各不相同,其中④和①的菌丝浓白程度接近对照,⑤粉孢子最多、断圈也最为明显。
由表2可知,各处理金针菇的菌丝生长速度各不相同。处理①、②、③、④、⑤、⑥培养第3 d的平均菌丝直径分别为11.4 mm、11.4 mm、11.8 mm、12.2 mm、11.6 mm、11.4 mm,培养第8 d的平均菌丝直径分别为50.6 mm、44.8 mm、45.4 mm、52.2 mm、51.4 mm、50.8 mm。
表2 各处理金针菇平板菌丝直径
由表3可知,各处理金针菇菌丝的生长速度存在一定差异,处理④金针菇菌丝生长速度最快(平均
表3 各处理金针菇平板菌丝生长速度方差分析
4.0 mm/d),其次为处理⑤(平均3.98 mm/d),处理②最慢(平均3.34 mm/d)。方差分析表明,处理④、⑤、①之间差异不显著,处理④、⑤、①与处理③、②差异达显著水平。结合各处理的感官分析,④号米糠质量最好,其次为①号米糠。虽然⑤号米糠金针菇菌丝生长速度较快,但感官感觉较差。其余米糠质量均较差。
用米糠浸出液制作平板,通过观察金针菇菌丝的生长发育情况,可以较清晰地分辨米糠质量的优劣。
[1] 马晓霞.金针菇高效栽培技术[J].河北农业,2010(7):8~9.
[2] 陈亚光.金针菇无公害栽培技术[J].农村百事通,2011(15):32~34.
[3] 徐珍,尚晓冬,谭琦.金针菇杂交新品种—金针菇G1[J].园艺学报,2011(8):1621~1622.