血清内脏脂肪素水平与冠心病患者氧化应激、颈动脉粥样硬化的相关性及通心络胶囊的干预作用

严建军，刘倩，张贞胜，周双林，蒯正平，王连生

近年来，随着人们物质生活水平提高和生活方式改变，我国冠心病发病率、死亡率呈现不断升高趋势。研究表明，炎性反应、应激反应可导致动脉内皮细胞氧自由基增多并导致清除氧自由基的酶如超氧化物歧化酶（SOD）活性降低，造成氧自由基蓄积并与细胞膜上不饱和脂肪酸反应而产生丙二醛（MDA），进而破坏细胞膜结构和功能，引发动脉粥样硬化及斑块进展、破裂等［1］。内脏脂肪素（visfatin）是一种新型脂肪细胞因子，主要由内脏脂肪细胞分泌，与轻度慢性炎症和多种疾病严重程度相关［2-4］。研究表明，visfatin表达升高可增加细胞内氧自由基含量并加重氧化应激损伤，抑制visfatin表达可有效减轻氧化应激损伤［5-6］，但有关其与冠心病患者氧化应激损伤相关性的研究报道较少。

通心络胶囊是一种国家级新药，具有活血通络、理气止痛功效，可通过下调C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子α（TNF－α）、白介素6（IL－6）、可溶性细胞间黏附分子1、血管细胞黏附分子1等而发挥抗炎、抗氧化应激作用，已被广泛用于治疗冠心病等心血管疾病［7-11］，但其对冠心病患者血清visfatin水平的干预作用研究报道较少。本研究旨在探讨血清visfatin水平与冠心病患者氧化应激、颈动脉粥样硬化的相关性及通心络胶囊的干预作用，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2010年9月—2012年10月南京医科大学第一附属医院收治的冠心病患者100例作为病例组，均符合1999年美国心脏病学会／美国心脏协会（ACC/AHA）制定的冠心病诊断标准［7］，按照入院顺序分为对照组和干预组，每组50例；另选取同期体检健康者50例作为健康组。排除标准：（1）伴有其他类型心肌病、出血性疾病、肾衰竭、糖尿病者；（2）伴有急慢性感染性疾病、恶性肿瘤者。健康组、对照组、干预组受试者性别、年龄、身高、吸烟率、体质指数（BMI）、收缩压、舒张压、空腹血糖、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL－C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL－C）比较，差异无统计学意义（P＞0.05，见表1），具有可比性。本研究经南京医科大学第一附属医院医学伦理委员会审核批准。

1.2 治疗方法 对照组患者给予常规治疗，包括使用血管紧张素转换酶抑制剂、β－受体阻滞剂、硝酸酯类药物、他汀类药物、阿司匹林等；干预组患者在常规治疗基础上给予通心络胶囊（石家庄以岭药业股份有限公司生产，生产批号：20100828），3粒/次，3次/d，连续治疗12个月。

1.3 观察指标

1.3.1 血清visfatin、MDA、SOD水平 采集健康组受试者体检当日、病例组患者治疗前后空腹12 h静脉血15 ml，留取中段血液并置于含乙二胺四乙酸（EDTA）的真空采血管中，4 000 r/min离心5 min（离心半径7.7 cm），取上清液移至干净EP管中并置于－80 ℃环境下冻存待测；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清visfatin水平，试剂盒购自Phoenix X Pharmaceuticals；采用硫代巴比妥酸显色法检测血清MDA水平；采用黄嘌呤氧化酶法检测血清SOD水平，试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.3.2 颈动脉内－中膜厚度（IMT）、斑块面积 健康组受试者于体检当日、病例组患者于治疗前后采用HP5500（美国）彩色多普勒超声进行双侧颈动脉检查，检查时受试者取仰卧位并垫高肩部，颈后仰以充分暴露颈部，在颈总动脉结构显示最清晰处测量3次IMT取平均值，以IMT≤0.9 mm为正常，1.0 mm≤IMT≤1.2 mm为动脉壁增厚，IMT＞1.2 mm为斑块形成；采用二维彩色多普勒超声测量斑块面积，测量纵切面上斑块最大厚度（Tmax）并计算其横切面最大面积（Smax），同时发现数个斑块则取最大者。

1.3.3 不良反应 观察两组患者治疗期间不良反应发生情况。

1.4 统计学方法 采用SPSS 13.0统计学软件进行数据分析，计量资料以（±s）表示，两组间比较采用成组t检验，多组间比较采用单因素方差分析；计数资料以相对数表示，采用χ2检验；血清visfatin水平与血清MDA、SOD水平及颈动脉IMT、斑块面积间的相关性分析采用Pearson相关分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

表1 3组受试者一般资料比较Table 1 Comparison of general information in the three groups

2 结果

2.1 健康组与病例组患者血清visfatin、MDA、SOD水平及颈动脉IMT、斑块面积比较 病例组患者血清visfatin、MDA水平高于健康组，血清SOD水平低于健康组，颈动脉IMT、斑块面积大于健康组，差异有统计学意义（P＜0.05，见表2）。

表2 健康组与病例组患者血清visfatin、MDA、SOD水平及颈动脉IMT、斑块面积比较（±s）Table 2 Comparison of serum levels of visfatin，MDA and SOD，carotid IMT and plaque area between health control group and case group

表2 健康组与病例组患者血清visfatin、MDA、SOD水平及颈动脉IMT、斑块面积比较（±s）Table 2 Comparison of serum levels of visfatin，MDA and SOD，carotid IMT and plaque area between health control group and case group

注：visfatin=内脏脂肪素，MDA=丙二醛，SOD=超氧化物歧化酶，IMT=内－中膜厚度

组别　　例数　visfatin（ng/L）MDA（μmol/L）SOD（kU/L）颈动脉IMT（mm）颈动脉斑块面积（mm2）健康组　50　9.82±0.90　9.89±1.64　93.29±12.11　1.03±0.16　10.13±2.53病例组　100　12.10±0.76　14.21±1.22　76.49±13.82　1.19±0.13　15.27±1.16 t值　26.760　14.004　7.782　4.404　8.058 P值　　＜0.001　　＜0.001　0.006　0.038　0.006

2.2 相关性分析 Pearson相关分析结果显示，血清visfatin水平与冠心病患者血清MDA水平（r=0.486）及颈动脉IMT（r=0.388）、斑块面积（r=0.354）呈正相关，与血清SOD水平（r=－0.343）呈负相关（P＜0.05，见图1）。

2.3 对照组与干预组患者治疗前后血清visfatin、MDA、SOD水平及颈动脉IMT、斑块面积比较 治疗前两组患者血清visfatin、MDA、SOD水平及颈动脉IMT、斑块面积比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后干预组患者血清visfatin、MDA水平低于对照组，血清SOD水平高于对照组，颈动脉IMT、斑块面积小于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05，见表3）。

2.4 不良反应 对照组、干预组患者治疗期间均未出现过敏、肝肾功能损伤等不良反应。

3 讨论

活性氧（ROS）产生过多和机体清除ROS能力下降是导致氧化应激的主要原因，心血管系统中最重要的ROS是超氧阴离子自由基，可引起脂质过氧化并导致脂质过氧化产物MDA蓄积［12］，因此血清MDA水平可作为诊断冠心病及判断患者预后的敏感指标［13］。SOD是体内重要的氧自由基清除剂，能清除细胞代谢产生的ROS并保护细胞免受损伤。冠状动脉粥样硬化患者SOD活性下降，故提高SOD活性可有效增强冠心病患者抗氧化应激损伤能力［14］。近年研究发现，visfatin可通过激活PI3k、NF－κB信号通路而促进ROS产生，加重氧化应激损伤［4-5］。

中医学理论认为，冠心病病位在心，与肝、肾、脾关系密切，主要由心、肾、脾亏虚，心气不足，气血运行不畅，痰瘀内生，脉络不通所致［15］。通心络胶囊依据冠心病络脉瘀阻、络脉绌急的病机特点研制而成，由人参、水蛭、全蝎、土鳖虫、蜈蚣、蝉蜕、赤芍、冰片等组成，其中人参具有补益心气功效，水蛭、全蝎、土鳖虫、蜈蚣、蝉蜕具有活血通络功效，赤芍具有活血化瘀功效，冰片具有芳香通窍功效，上药合用共奏活血、解痉、通络、止痛之功效［16-17］。现代药理学研究表明，全蝎、蜈蚣具有抗惊厥、镇静、镇痛作用，可用于治疗多种痹痛；芍药主要有效成分芍药苷具有解痉、镇痛、抗感染等作用［18］。陈志等［18］研究表明，采用通心络胶囊治疗16周后高脂血症患者颈动脉IMT、斑块面积减小，证实通心络胶囊具有抗动脉粥样硬化作用。

图1 血清visfatin水平与冠心病患者血清MDA、SOD水平及颈动脉IMT、斑块面积的相关性Figure 1 Correlations of serum visfatin level with serum levels of MDA and SOD，carotid IMT and plaque area in patients with coronary heart disease

表3 对照组与干预组患者治疗前后血清visfatin、MDA、SOD水平及颈动脉IMT、斑块面积比较（±s）Table 3 Comparison of serum levels of visfatin，MDA and SOD，carotid IMT and plaque area between control group and intervention group

表3 对照组与干预组患者治疗前后血清visfatin、MDA、SOD水平及颈动脉IMT、斑块面积比较（±s）Table 3 Comparison of serum levels of visfatin，MDA and SOD，carotid IMT and plaque area between control group and intervention group

组别　　例数　visfatin（ng/L）　MDA（μmol/L）　SOD（kU/L）　　颈动脉IMT（mm）　　颈动脉斑块面积（mm2）治疗前　　治疗后　　治疗前　　治疗后　　治疗前　　治疗后　　治疗前　　治疗后　　治疗前　　治疗后对照组　50　11.89±0.45　9.30±0.33　14.24±1.25　11.62±1.01　76.43±12.26　88.92±13.82　1.19±0.37　0.98±0.11　15.28±1.36　14.13±1.39干预组　50　12.20±0.77　8.34±0.12　14.19±1.78　10.21±1.02　76.49±14.01　94.55±12.31　1.18±0.23　0.85±0.20　15.20±1.91　13.41±2.02 t值　2.790　5.438　1.897　5.564　0.005　9.938　0.014　7.180　0.019　4.363 P值　0.098　0.021　0.172　0.023　0.946　0.002　0.907　0.008　0.890　0.038

本研究结果显示，病例组患者血清visfatin、MDA水平高于健康组，血清SOD水平低于健康组，颈动脉IMT、斑块面积大于健康组，且血清visfatin水平与冠心病患者血清MDA水平、颈动脉IMT及斑块面积呈正相关，与血清SOD水平呈负相关，提示冠心病患者血清visfatin水平明显升高，并与氧化应激、颈动脉粥样硬化有关，降低血清visfatin的表达可能有利于改善冠心病患者预后［19］。本研究结果显示，治疗后干预组患者血清visfatin、MDA水平低于对照组，血清SOD水平高于对照组，颈动脉IMT、斑块面积小于对照组，表明通心络胶囊可通过降低血清visfatin水平而抑制冠心病患者氧化应激反应，发挥抗动脉粥样硬化作用，与既往研究结果一致［20］。本研究结果还显示，对照组、干预组患者治疗期间均未出现过敏、肝肾功能损伤等不良反应，表明通心络胶囊治疗冠心病患者的安全性较高。

综上所述，冠心病患者血清visfatin水平明显升高，并与氧化应激、颈动脉粥样硬化有关；通心络胶囊可通过降低血清visfatin水平而抑制冠心病患者氧化应激反应，发挥抗动脉粥样硬化作用，且安全性较高。但本研究样本量较小，通心络胶囊降低血清visfatin水平的具体作用机制仍不十分清楚，而基于动物及细胞水平的通心络胶囊作用机制研究将有助于阐明其抗炎、抗氧化应激及抗动脉粥样硬化的确切机制。

本文无利益冲突。