全自动细胞肿瘤筛查分析系统在良恶性腹水诊断中的应用

杨夏彤，冯惊涛，陈科全，王永，王金朋

（1.深圳市龙华区中心医院，广东 深圳 518110；2. 湖南省血吸虫病防治院，湖南 岳阳 414000；3.广州医科大学附属第一医院，广东 广州 510120）

0 引言

良恶性腹水的判断，是临床工作中经常遇到的问题，准确、快速的判断腹水的良恶性，对临床具有重要的意义。判断腹水的良恶性，最常用的方法是腹水涂片或腹水涂片联合液基细胞学，该方法虽然操作方便、易于实施，但存在恶性腹水漏检的情况。某些肿瘤标志物的检测，如癌胚抗原（CEA）、糖链抗原（CA）等，虽具有相当的参考价值，但特异性和敏感性均不足。肿瘤相关MicroRNA（miRNA）的检测，目前尚处于研究阶段，鲜有临床应用的报道[1]。DNA倍体分析是细胞学判读中的计算机辅助诊断技术，已在临床细胞学检测的多个领域广泛应用[2-3]。本课题采用全自动细胞肿瘤筛查分析系统（DNA倍体分析）判断腹水的良恶性，然后与腹水涂片联合液基细胞学镜检比较，观察全自动细胞肿瘤筛查分析系统在我院良恶性腹水判断中的应用情况。

1 材料与方法

1.1 标本来源

腹水标本为本院2016.9-2017.3期间临床送检的207例样本（男性118例，女性89例）。

1.2 方法

1.2.1 细胞收集

取送检腹水约50-200mL，3000r/min离心3分钟，小心弃上清，沉淀用于下一步实验。

1.2.2 腹水涂片联合液基细胞学镜检

腹水涂片：将上一步骤的细胞沉淀和未弃尽的上清液混匀，取混匀液一滴，用推片法涂片两张，HE 染色用于镜检。

液基细胞学：将前述混匀液用沉降式制片染色机（广州安必平医药科技股份有限公司仪器）制片一张（HE染色）。

结果的判读：以检见异型细胞为阳性结果，检见可疑异型细胞为可疑阳性结果，未检见异型细胞为阴性结果。

1.2.3 全自动细胞肿瘤筛查分析系统

取1.2.1步骤的细胞沉淀，用全自动细胞肿瘤筛查分析系统（武汉呵尔医疗科技发展有限公司仪器，SPICM-DNA型）制片（Feulgen 染色）分析。结果的判断以DNA指数（DI）在1.75-2.5之间的细胞数≥10%、或DI≥2.5的细胞≥3个为阳性，以1.25≤DI＜1.75的细胞形成峰值、或DI≥2.5的细胞＜3个为可疑阳性，其余为阴性。

1.2.4 统计学方法

不同方法之间的敏感性和特异性比较采用χ2检验。

2 结果

2.1 全自动细胞肿瘤筛查分析系统在良恶性腹水判断中的应用情况

经免疫组化、活检和/或半年以上的随访，207例临床送检的腹水中，最终确诊为恶性49例，全自动细胞肿瘤筛查分析系统阳性39例（敏感性79.6%），腹水涂片联合液基细胞学镜检阳性40例（敏感性81.6%），两者之间敏感性的差别没有统计学意义（P＞0.05）。207例腹水中，诊断为良性158例，全自动细胞肿瘤筛查分析系统阴性135例（特异性85.4%），腹水涂片联合液基细胞学镜检阴性142例（特异性89.9%），两者之间特异性的差别没有统计学意义（P＞0.05）（详见表1）。

表1 腹水涂片联合液基细胞学镜检与全自动细胞肿瘤筛查分析系统对腹水的检测结果

2.2 全自动细胞肿瘤筛查分析系统在良恶性腹水判断中的意义

DNA倍体分析在腹水中的应用价值，已有不少学者进行了探讨[4-6]。本研究采用全自动细胞肿瘤筛查分析系统对腹水细胞进行DNA倍体分析，结果发现：在24例腹水涂片联合液基细胞学镜检难以确定良恶性的腹水中（8例被证实为恶性），其中有6例阳性（5例为前述恶性腹水）；在143例腹水涂片联合液基细胞学镜检判读为良性的腹水中（1例被证实为恶性，为癌），其中有2例阳性（1例为前述癌）（详见表2）。

表2 全自动细胞肿瘤筛查分析系统与腹水涂片联合液基细胞学镜检的比较

3 讨论

目前，DNA倍体分析在我国已经得到了比较广泛应用，尤其在宫颈癌的筛查方面[2,3]。DNA倍体分析在腹水中的应用价值，也有不少学者进行了探讨[4-6]，本研究采用全自动细胞肿瘤筛查分析系统对腹水细胞进行DNA倍体分析。通过比较，本研究发现全自动细胞肿瘤筛查分析系统的敏感性和特异性与腹水涂片联合液基细胞学镜检没有不同，但可以检出部分腹水涂片联合液基细胞学镜检难以确定良恶性和甚至漏诊的标本。

腹水涂片联合液基细胞学镜检是目前判断良恶性腹水最常用的检测手段，尽管该方法可以准确地判读恶性腹水，但却常遇到难以判断良恶性的情况，甚至有时会漏诊恶性腹水。这时， DNA倍体分析将可以快速地辅助判断腹水的良恶性情况，本研究采用的全自动细胞肿瘤筛查分析系统，确实有效地辅助了腹水涂片联合液基细胞学镜检对腹水良恶性的判断。但是，DNA倍体分析也有其局限性，比如当细胞反应性增生的时候，DNA倍体分析可能出现假阳性；而当实体肿瘤为二倍体肿瘤、或者肿瘤细胞聚集成团的时候，DNA倍体分析也可能出现假阴性。本研究采用的全自动细胞肿瘤筛查分析系统的结果中，也出现了类似的假阳性和假阴性。

总之，全自动细胞肿瘤筛查分析系统比常规细胞学镜检具有重复性好、客观性强、操作简便、不需要培训良好的细胞学病理医师等优势，还具有读片（扫描）全面、准确性较高、不易疲劳、不受个人状况影响等特点。因此，其在腹水良恶性的判断中具有较高的辅助应用价值，特别对于临床上，消化内科诊断肝癌恶性腹水、胰腺癌腹膜转移、肝硬化腹水、腹膜炎腹水、子宫附件癌、胃肠恶性肿瘤腹膜转移等疾病所致的腹水具有较好的鉴别作用。

[1] 陈凤,刘崇梅,王彩霞.良恶性胸腹水病理检测中的研究进展[J].中国医药指南, 2014,12(25):78-82.

[2] 毛志远,熊梅,任力,等.DNA倍体分析在良恶性支气管刷片或支气管灌洗液中的诊断价值[J].华西医学,2014,29(12):2226-2229.

[3] David Garner.Clinical application of DNA ploidy to cervical cancer screening:A review[J].World Journal of Clinical Oncology, 2014,5(5): 931-965.

[4] 李德昌,任力,李炜,等.全自动细胞图像分析系统在鉴别良恶性腹水中的应用[J]. 诊断病理学杂志,2011,18(2):134-136.

[5] 赵焕,郭会芹,李华,等.探讨全自动DNA_ICM对浆膜腔积液细胞学的辅助诊断价值[J].中国医刊,2015,50(3):57-59.

[6] 马文,杜娟,张先明,等.脱落细胞DNA倍体分析及胸腹水CEA与血清CEA比值的诊断价值[J].贵阳医学院学报,2016,42(6):209-212.