循环肿瘤细胞的研究进展及临床应用

刘金威　祝英杰　阮友琴

【摘 要】循環肿瘤细胞指进入人体外周血的肿瘤细胞，通常是通过自发或因诊疗操作而从原发灶或转移灶释放进入外周血循环，是导致肿瘤转移和复发的主要原因。因为外周血中CTC含量极少，需要高敏感性及特异性的检测方法，这限制了CTC作为“液体活检”在临床的实时监测功能及应用，但大量研究显示，检测CTC在早期发现微转移，发现肿瘤复发，制定个体化治疗方案，评估预后等方面具有重要的临床意义，近几年已逐渐成为临床研究热点。本文简要探讨近年来CTC检测的研究进展及其在临床的主要应用现状。

【关键词】循环肿瘤细胞；微转移；检测；临床应用

【中图分类号】R737.14 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783（2018）05-03--02

目前，我们对于恶性肿瘤的治疗方案主要是手术，放疗，化疗以及靶向治疗等，而我们对于肿瘤的检测及发现方式主要是靠影像学方法，血清标志物以及相应的临床表现，多数肿瘤确诊的金标准则是手术之后的病理检查，但这些方法对于早期发现和预防肿瘤的复发和转移的作用往往不大，且不能够及时有效指导我们制定个体化治疗方案，我们需要一种更简便精确的方法，可以在肿瘤形成早期即可检测到肿瘤的发生，在肿瘤转移或复发的早期便可发现其微转移，以利于更积极主动的采取应对方案，进而改善肿瘤患者预后。1896年，澳大利亚学者Ashworth首次在一例因癌症死亡患者的外周血中发现并提出了循环肿瘤细胞的概念[1]，循环肿瘤细胞是由肿瘤最初的原发灶或后来的转移灶脱落，继而进入外周血循环的肿瘤细胞，研究发现，肿瘤患者外周血循环中每106～107个白细胞中才能发现一个CTC。后来人们发现在转移灶形成前的很长一段时间，这种细胞在血液和骨髓中就已经存在。人们逐渐开始在CTC对肿瘤患者的肿瘤微转转的早期发现、疗效评估和预后评价等方面做了大量的研究。随着肿瘤细胞的增殖，一些肿瘤细胞可以通过产生某种抑制粘附因子表达的物质，这种物质可以增加其自身运动能力并可使之从母体肿瘤脱落，这些脱落的肿瘤细胞再产生某种蛋白溶解酶，来破坏宿主周围结缔组织进而侵入血液循环系统。

虽然外周血中的CTC含量极少，若我们有敏感度和特异度均较高的检测技术，将有可能在肿瘤刚刚形成微转移时就捕获到肿瘤发生的信息，这样就可能早期监测到肿瘤转移的情况，成为肿瘤的“液态活检”。由此，我们就可实现对肿瘤向外侵袭的早期发现、对治疗效果的准确监测以及对预后的正确评估。

1 CTC常用的检测方法

由于外周血中的CTC数量极少，若要检测外周血CTC，首先要进行CTC的富集（分离和纯化），即基于密度、体积或免疫磁性等物理化学原理特异性地将这些细胞富集起来，以提高检测CTC时的敏感性。研究时常用的富集方法包括密度梯度离心法，膜滤过分离法，阳性和阴性免疫磁珠分离法等。富集之后，依靠细胞学方法或核酸检测技术，利用肿瘤特异性检测标志物来检测发现CTC[2]，常用的检测技术包括免疫细胞化学法，逆转录聚合酶链反应，流式细胞术，光导纤维阵列扫描技术，酶联免疫斑点术，镭射扫描细胞计数器，生物芯片技术等。

2 CTC的检测在临床中的应用前景

虽然目前CTC的检测方法限制了CTC在临床上的应用，但近年来的大量研究显示CTC在临床应用上有巨大的参考价值。目前，CTC在临床上的应用主要概括如下几个方面。

2.1 CTC与肿瘤转移和复发 转移和复发是肿瘤患者死亡的主要原因，但我们对于肿瘤转移和复发的发生发展过程知之甚少，目前研究显示，肿瘤的复发和转移主要通过淋巴及血液系统播散。即使从外周血中检测到了CTC并不意味着一定存在或将会形成远处转移灶，但可以预测转移灶形成的概率会大大增加。肿瘤细胞通过脱落、侵袭、渗入等一系列活动进入血液循环或淋巴管，然后种植于远处器官[3]，并进行增殖，最后形成微转移灶，可能是肿瘤发生远处转移的早期事件，研究结果显示，外周血中CTC水平与肿瘤远处转移具有相关性。因此，可以认为肿瘤的复发与转移有CTC的参与，CTC可能成为临床监测早期转移和复发的指标。

2.2 CTC与个体化治疗 个体化治疗是指医生针对每一个不同的肿瘤病人制定出不同的治疗方案。目前在临床上，很少有医师做严格的个体化治疗方案，一般是基于患者的一般情况、肿瘤的大小、性质、病理分期、淋巴结或远处转移等情况而选择的综合治疗。近年来对CTC的大量研究显示，检测CTC有助于临床医师制定个体化治疗方案[4]。随着肿瘤患者化疗药物的使用，肿瘤细胞基因的表达及突变可发生变化，从而导致对药物敏感性的改变。所以在个体化治疗的过程中应该对肿瘤的基因表达及突变进行实时监测，但是临床的实际情况却限制了肿瘤细胞的及时获取。而近年来开发的CTC的检测及收集技术为解决这一难题提供了可能。

2.3 CTC与肿瘤预后 临床上常用的诊断转移的影像学方法以及显微镜方法能够确定存在肿瘤转移时，事实上已经发生了肿瘤细胞向外周血及骨髓等处的播散，可见这些方法不能很好的显示患者的存活时间。CTC的检测及应用使人们第一次可以以一个量化的指标告诉医生和患者他的存活时间。CTC可以成为判断肺癌患者预后的独立预测因子[5-6]，与临床传统的影像学检查相比，可以更早期、更敏感的预测患者的OS，且可检测的重复性好[7-8]。以上研究显示恶性肿瘤外周血中CTC的数量是判断肿瘤患者预后的一个重要的预测因子，将来会对临床患者治疗效果及预后的评估有巨大的研究价值。

结论与展望CTC在临床具有巨大的潜在价值，尽管目前CTC的检测方法的敏感性和特异性等有限，限制了CTC在临床作为“液体活检”的实时监测功能，但随着检测方法越来越成熟，CTC有望成为一种新型非侵入性诊断工具。肿瘤患者在抗肿瘤治疗前后，监测外周血中CTC的数量，以判断肿瘤的转移复发情况，治疗效果，未来可能的预后情况等。这在将来也许是临床抗肿瘤治疗过程中的一项有效评估指标。这个研究领域的不断发展，有利于肿瘤转移和复发的早期发现，有利于临床肿瘤的治疗方案的制定，并有助于评估肿瘤患者的治疗效果及预后以确定进一步治疗手段，进而提高患者生活质量和预期寿命。

参考文献

毕向雁，刘苓霜，姜怡， 等.循环肿瘤细胞在肺癌中的应用[J].浙江医学，2017（23）：2179-2182.

王涛.循环肿瘤细胞研究进展[J].肿瘤研究与临床，2015（11）：784-787.

夏春伟，刘平.肺癌循环肿瘤细胞研究进展[J].国际呼吸杂志，2017（15）：1169-1172.

刘枝祥，刘国龙，吕琳.循环肿瘤细胞的研究进展[J].医学综述，2017（15）：2966-2971.

郑建洲，何流漾，夏蕾， 等.循环肿瘤细胞在肿瘤侵袭转移机制中的研究进展及应用前景[J].国际遗传学杂志，2017（6）：384-388.

王宜文.循环肿瘤细胞的研究进展[J].安徽医科大学学报，2017（12）：1897-1900.

李帅，刘晓强.循环肿瘤细胞的检测[J].医学综述，2010（6）：928-931.

赵倩雯，司徒博，郑磊.循环肿瘤细胞检测与临床应用进展[J].南方医科大学学报，2017（10）：1423-1426.