胸苷激酶1和甲状腺球蛋白检测对鉴别甲状腺结节良恶性的价值

甲状腺结节分为良性和恶性，术前鉴别主要依靠针刺细胞学检查，但该检查有创且易受到结节大小、部位以及医师经验等影响，仍存在一定的误诊率［1］。甲状腺血清相关蛋白质的检测方便快捷，易被患者接受，其中甲状腺球蛋白（thyroglobulin，Tg）应用最广，多用于甲状腺癌术后复发和转移的监测，在鉴别甲状腺结节良恶性方面报道较少。血清胸苷激酶1（serum-thymidine kinase 1，S-TK1）是新近发现的血清肿瘤标志物，与细胞异常增殖相关，在多种恶性肿瘤患者血清中高表达，但与甲状腺恶性肿瘤的相关研究较少。本研究通过检测甲状腺结节患者S-TK1和Tg水平，应用Logistic回归分析和ROC曲线等方法，比较S-TK1和Tg单项以及联合检测的灵敏度、特异性等参数，评价二者对鉴别甲状腺结节良恶性的价值。

1 材料与方法

1.1 临床资料

以2015年10月至2017年9月在四川省人民医院初治的甲状腺结节患者143例为研究对象，结节的良恶性以病理学诊断为主，未手术者以针刺细胞学以及影像学等综合判断，排除合并其他恶性肿瘤和严重器质性疾病的患者。甲状腺良性结节组62例：结节性甲状腺肿17例，腺瘤29例，炎性结节8例，甲状腺囊肿8例；男性30例，女性32例；年龄21.3～66.4岁，中位年龄44.7岁。甲状腺恶性结节组81例：甲状腺乳头状癌64例，滤泡状癌12例，髓样癌1例，未分化癌4例；男性36例，女性45例；年龄25.8～68.7岁，中位年龄49.2岁。选择本院健康体检者40例作为对照组：男性20例，女性20例；年龄22.5～60.7岁中位年龄43.3岁。

1.2 方法

采集尚未接受手术和针刺细胞学检查患者以及正常对照者空腹静脉血3 mL，3 000 r/min离心5 min分离血清，3 h内检测S-TK1和Tg；不能及时检测的血清置于-20℃冰箱保存，1周内检测。S-TK1检测采用酶免疫点印迹化学发光法，仪器和试剂分别为华瑞同康公司CIS-2化学发光数字成像分析仪和细胞周期分析试剂盒；Tg检测采用化学发光免疫分析法，仪器和试剂为美国西门子公司IMMULITE1000和配套试剂盒。

1.3 统计学分析

应用SPSS 13.0统计软件进行统计学数据分析。计量资料符合正态分布，以±s表示，组间比较采用单因素方差分析；计数资料采用χ2检验。多因素联合分析采用二元Logistic回归分析，建立回归模型，计算每个病例对应的阳性预测值P。将单项检测和P作ROC曲线，曲线下面积（AUC）比较用Z检验。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 甲状腺恶性结节组、良性结节组以及正常对照组S-TK1和Tg水平的比较

甲状腺恶性结节组患者S-TK1、Tg的水平较良性结节组以及正常对照组明显增高（P＜0.05）；良性结节组S-TK1、Tg的水平与正常对照组比较无显著性差异（表1）。

表1 甲状腺恶性结节组、良性结节组以及正常对照组S-TK1和Tg水平的比较

2.2 S-TK1和Tg的Logistic回归分析

单因素Logistic回归分析显示，S-TK1和Tg单项检测与甲状腺结节的良恶性密切相关（P＜0.05）；将S-TK1和Tg重新拟合建立回归分析模型：Logit（P）=5.757+6.453XS-TK1-0.125XTg（表2）。

2.3 S-TK1、Tg以及P的ROC曲线分析和诊断价值比较

将P与S-TK1、Tg单项检测进行ROC曲线分析，选取约登指数最大时对应的值作为Cut-off值，计算灵敏度和特异性等参数（图1，表3）。结果显示，单项检测时，TK1和Tg的Cut-off值分别为2.32 pmol/L、63.40 ng/mL；S-TK1在AUC、灵敏度和总有效率上大于Tg（P＜0.05），而特异性与Tg相近。P的Cut-off值为 0.372；AUC 达 0.989，明显大于 S-TK1和 Tg（P＜0.05）；P的特异性与单项检测相近，而灵敏度和总有效率分别为0.988和0.965，均高于S-TK1和Tg单项检测，提示联合检测具有优势。

表2 S-TK1和Tg的Logistic回归分析

图1 S-TK1、Tg和阳性预测值P的ROC曲线

表3 S-TK1、Tg和阳性预测值P的临床诊断价值比较

3 讨论

甲状腺结节分为良性和恶性。良性结节包括甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿、甲状腺囊腺瘤等；恶性结节主要为甲状腺癌，占甲状腺结节的5%～15%［2］，包括乳头状腺癌、滤泡性癌、髓样癌以及未分化癌等，是最常见的头颈部恶性肿瘤。由于甲状腺恶性结节和良性结节在症状和体征等方面存在重叠，导致临床鉴别比较困难。目前，影像学介导下的针刺细胞学检查是术前鉴别甲状腺结节良恶性的最佳方法，但该检查为创伤性检查，患者接受程度差且易受到结节大小、部位以及设备性能、医生穿刺经验等影响，误诊率较高。血清学检查方便快捷，易被接受。甲状腺球蛋白（Tg）由甲状腺滤泡上皮细胞合成，是应用最广的甲状腺血清相关蛋白，多用于甲状腺癌术后复发或转移的监测［3-5］，在鉴别甲状腺结节良恶性上也有一定报道［6-7］。血清肿瘤标志物-胸苷激酶1（TK1）存在于细胞质中，是嘧啶代谢途径中的关键酶之一，参与DNA合成，与细胞异常增殖密切相关，为恶性肿瘤发生的始动环节之一［8-9］。正常细胞增殖受到机体调控，故血清中S-TK1含量极低，而恶性肿瘤细胞增殖失控，细胞质内TK1含量较高，当肿瘤细胞受损或坏死后释放入血，血清中就可检出高水平的S-TK1。很多研究证实S-TK1在多种恶性肿瘤患者血清中明显升高［10-14］，但关于S-TK1与甲状腺恶性肿瘤的报道较少。

本研究结果显示甲状腺恶性结节组患者S-TK1和Tg水平明显高于良性结节组以及正常对照组，提示二者在鉴别甲状腺结节良恶性中均有应用价值。恶性结节患者血清Tg水平的增高是肿瘤细胞对甲状腺组织破坏的结果；S-TK1的增高与肿瘤细胞增殖失控以及肿瘤细胞坏死释放细胞质内TK1有关，其水平高低间接反映了甲状腺肿瘤细胞增殖速度。Logistic回归分析可以平衡联合检测中各单项的优点和缺点，较直观地预测个体患病的概率［15］；ROC曲线分析则是评价检测指标灵敏度和特异性的方法，ROC曲线下面积越大则检测的准确性越高，诊断效能越好。本研究应用了回归分析和ROC曲线分析，结果显示，单项检测时S-TK1的AUC高于Tg，在同Tg特异性相似的情况下，灵敏度和总有效率高于Tg，表明S-TK1鉴别甲状腺结节良恶性方面优于Tg。联合检测时，阳性预测值P的AUC达到0.989，灵敏度和总有效率均大幅高于各单项指标，但在特异性上提高不明显。因S-TK1和Tg单项检测的特异性已高达0.855和0.887，而灵敏度性相对较低（分别为0.753和0.531），联合检测提高灵敏度，大幅降低了漏诊甲状腺恶性结节的概率。临床上通常选取一组灵敏度高的检验指标进行联合检测，以提高阳性检出率，为疾病的早诊断提供线索，但有时特异性会下降，需引起注意。

综上所述，S-TK1作为一种较新的血清肿瘤标志物，在鉴别甲状腺结节良恶性方面优于Tg；S-TK1和Tg单项检测有一定局限性，而联合检测具有较好的互补性，因此S-TK1和Tg联合检测对鉴别甲状腺结节良恶性的价值更大。由于本研究病例数较少，不能完全说明二者的应用价值，仍需加大样本量进一步研究。

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