丁金雪 , 刘 洋, 冯 娟, 徐 领, 贺绍君* (. 安徽科技学院 动物科学学院,安徽 凤阳 3300;. 解放军第四五四医院,江苏 南京 000)
近年来,我国宠物饲养量逐年攀升。宠物饲养过程中消化道疾病是临床报道最多疾病之一。胃切开术是犬消化道疾病常用的一种外科治疗技术,常用于探查胃内疾病性质、取出胃内异物、胃内肿瘤的切除、慢性胃炎或食物过敏时胃壁活组织检查等[1]。动物实施胃切开术时可能会对机体的生理功能产生影响[2]。本试验通过测定中华田园犬血清中肝肾功能指标如谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)活性及尿素、肌酐、尿酸的含量,研究胃切开术对犬肝肾功能的影响,为评估实施胃切开术时对犬机体重要器官肝、肾功能的影响和有效进行术后护理提供相关科学依据。
1.1.1 动物 选用安徽科技学院动物实验中心健康成年(1~1.5岁)中华田园犬6 只,体重5.82±1.02 kg。
1.1.2 主要药品 硫酸阿托品注射液(1 mL/支:0.5 mg,天津金耀药业有限公司)、盐酸赛拉嗪注射液(1.5 mL/支:30 mg,军事医学科学院军事兽医研究所长春,批号005013)。
1.1.3 主要仪器 离心机(上海安亭科学仪器厂,DL-5-B)、天平(上海岑达天平秤有限公司,JPT-5)、全自动生化分析仪(迈瑞,BS-200),无菌常规器械包。
1.2.1 动物编号和麻醉 随机挑选6 只健康中华田园犬,试验前禁食24 h,禁水12 h,称重,编号Ⅰ至Ⅵ号,并对犬进行体温、脉搏、呼吸数等常规检查,其检查指标结果(表1)均在犬正常生理指标范围。每只犬按速眠新Ⅱ全身麻醉推荐剂量即0.15 mL/kg,在犬股二头肌进行肌肉注射,10 min后将犬仰卧绑定在手术台上。
表1 犬的常规检查结果Table 1 Dog's routine test results
1.2.2 样品采集与处理 手术参考林德贵主编《兽医外科手术学》(2006)的方法进行,其中手术持续时间30 min(以皮肤缝合完毕为终点)。为保证手续时间均等,手术实施时选择操作熟练主刀手中等速度进行,分别对皮肤切开与隔离、胃固定及切开、胃壁缝合、皮肤缝合等关键步骤做出时间限定。手术后(以皮肤切开为起点)0、0.5 h、1 h、2 h、4 h、12 h间断进行颈静脉采血,采集的血液静置12 h(4℃保存),3 000 r/min离心10 min,分离血清,选用迈瑞全自动生化分析仪(BS-200)测定血清中谷草转氨酶、γ-谷氨酰转移酶的活性,以及尿素、肌酐 、尿酸的含量。所用试剂盒均购自深圳迈瑞生物医疗电子有限公司。
1.2.3 数据分析 Excel 2003计算各时间点数据的平均值与标准差。采用SPSS 18.0统计软件对数据进行单因素方差分析,各个时间点数据采用LSD法进行多重比较。P<0.05表示差异显著。
试验不同时间点血清中谷草转氨酶活性见图1。由图1可知,整个试验过程中,0 h与12 h相比,12 h的AST在血清中的含量在胃切开术后显著增加(P<0.05),其他各时间点血清中AST活性均无显著变化(P>0.05)。
图1 AST在不同时间的变化Fig.1 AST changes at different time periods注:标注有相同大小写字母表示差异不显著(P>0.05);不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。
试验不同时间点血清中γ-谷氨酰转移酶活性见图2。由图2可知,整个试验过程中,血清中γ-谷氨酰转移酶的活性有一定波动,但统计分析表明,差异不显著(P>0.05)。
图2 γ-GT在不同时间的变化Fig.2 γ-GT changes at different time periods
试验不同时间点尿酸含量见图3。由图3可知,整个试验过程中,尿酸的含量有一定的波动,但统计分析表明,差异不显著(P>0.05)。
图3 UA在不同时间的变化Fig.3 UA changes at different time periods
试验不同时间点肌酐含量见图4。由图4可知,整个试验过程中,肌酐的含量有轻微变化,但统计分析表明,差异不显著(P>0.05)。
图4 CREA在不同时间的变化Fig.4 CREA changes at different times
试验不同时间点尿素含量见图5。由图5可知,整个试验过程中,尿素的含量有波动,但统计分析表明,差异不显著(P>0.05)。
图5 UREA在不同时间的变化Fig.5 UREA changes at different time periods
机体正常状态下肝细胞线粒体中的谷草转氨酶不易透膜至细胞外环境,少量缓慢释放入血清中的谷草转氨酶活性处于一个相对稳定的状态。血清中谷草转氨酶活性发生较大幅度增加多见于肝细胞的变性以及坏死,导致肝细胞线粒体中的谷草转氨酶释放进入血液[3]。本试验研究结果表明,胃切开术手术0.5、1、2、4 h时血清中谷草转氨酶活性无显著变化(P>0.05)。术后12 h时,血清中谷草转氨酶活性比0 h犬血清中谷草转氨酶活性显著升高(P<0.05)。鉴于胃切开术主体手术已经完成,其升高的原因可能与手术引起机体的炎症反应产物刺激肝脏引起。这与AST在机体的肝功能发生损伤时活性会降低的报道不一致[4-6],其产生差异的原因可能与损伤的性质和损伤持续的时间不同有关。
γ-谷氨酰转移酶主要存在于胆管上皮细胞中,当肝内合成亢进或者胆汁排出受阻时,血清中的γ-谷氨酰转移酶活性升高[7]。当机体的肝部分结构功能受到损伤时,血清中γ-谷氨酰转移酶的活性也会发生显著变化[8-9]。本试验对犬进行禁水禁食处理,其体内胆汁的排泄在24 h后处于一个相对稳定的范围。胃切开术后0、0.5、1、2、4、12 h时血清中γ-谷氨酰转移酶的活性均未发生显著变化(P>0.05),表明胃切开术时胆管上皮细胞的完整性并无显著的破坏。
尿酸是体内细胞核酸中嘌呤代谢的终末产物。血中尿酸除小部分被肝脏破坏外,大部分被肾过滤排除体外[10-11]。肾小管的分泌受到抑制,肾小球的滤过减少,以及肾小管重吸收的增多都会导致血清尿酸水平的增高。资料表明,慢性心力衰竭时尿酸的含量会降低[12-15]。通过对实施胃切开术0、0.5、1、2、4、12 h的血液中尿酸的含量的测定发现,整个试验期间血清尿酸含量无显著差异(P>0.05),本试验表明犬实施胃切开术对尿酸的代谢平衡并无显著影响,且对犬肾功能也无显著影响。
机体内90%以上的尿素是由肾脏排出体外,血清尿素浓度在一定程度可以反映出机体的肾小球滤过功能的损伤程度。血清中尿素的含量是临床上常用的评价机体肾功能变化的指标[16-17]。机体食物摄入与体内分解代谢相对平衡时,血清中尿素的含量将取决于机体肾脏的排泄能力。研究发现,胃切开术后0、0.5、1、2、4、12 h的血液中尿素的含量无显著变化(P>0.05),从血清尿素含量的角度本试验表明胃切开术对犬的肾功能无显著影响。
由肌肉代谢肌酸产生的肌酐主要是肾脏排泄出体外。血清中肌酐水平的含量主要取决于肾脏排出肌酐的多少。血清中肌酐含量的检测是常用观察肾脏功能的又一重要指标[18]。许元文[19]研究表明,当机体的肾功能受损时,机体血清中的肌酐含量将会升高。胃切开术后0、0.5、1、2、4、12 h的血液中肌酐的含量无显著差异(P>0.05),提示本试验表明胃切开术对犬的肾功能无显著影响。
综上所述,胃切开术对中华田园犬血清中的谷草转氨酶的活性有一定影响,而对γ-谷氨酰转移酶的活性,以及尿素、肌酐、尿酸的含量无显著影响。临床上,实施胃切开手术时应当密切关注手术应激对肝功能的影响。
参考文献:
[1] 刘占祥, 郭兰芳, 马海俊, 等. 犬胃切开术的注意事项[J].宁夏农林科技,2010(5):3-4.
[2] 王保证,王伟,曹广芝.犬胃切开术及其腹壁切口的选择初探[J].中国兽医杂志,2004,40(3):38-39.
[3] 韩硬海, 李树桐. 临床肝脏病学[M].济南: 山东科学技术出版社,2004:350-351.
[4] 黄庆勇.蛹虫草多糖对亚急性酒精损伤小鼠血清肝功能指标的影响[J].北华大学学报(自然科学版),2018,19(1):45-48.
[5] 王宪灵,王缚鲲,张宏,等.肾综合征出血热患者各病期肝功能的动态检测[J].临床荟萃,2003,18(10):575-576.
[6] 李晓斌.中药临床试验肝肾功能指标异常值的分析与评价[D].沈阳:辽宁中医药大学,2013.
[7] 熊元治,马颖才,杨桂英,等.肝硬化患者血清CA 50水平升高的原因及临床意义的探讨[J].临床肝胆病杂志,2006,22(2):117-118.
[8] 王雪萍,余素香.血清r-GT及LDL-VLDL-r-GT测定夜明星临床应用[J].医学检验杂志,1996,11(1):50-51.
[9] 刘晓楠,董玉霞,姜源,等.γ-谷氨酰转移酶水平与急性脑梗死CISS病因分型的相关性研究[J].中国医科大学学报,2014,43(12):1096-1099.
[10] 宁梅桂.高海拔地区人群血尿酸水平观察探讨[J].中华临床医学杂志,2007,8(7):59-59.
[11] 田忠,崔永春,李凯,等.链脲佐菌素对Ⅰ型糖尿病小型猪肝肾功能的影响[J].中国组织工程研究,2013,17(18):141-148.
[12] 杨国斌.慢性心力衰竭患者血清尿酸检测的临床价值[J].中国医药论坛,2007,5(3):8-9.
[13] 王红雷.慢性心力衰竭时尿酸水平的变化及对预后的影响[J].心血管康复医学杂志,2007,16(6):554-556.
[14] 窦丽华.慢性心力衰竭时血清尿酸水平的变化规律及临床意义[J].山东医药,2008,48(1):75-76.
[15] 程纯, 吴士尧, 许左隽, 等. 慢性心力衰竭患者血清尿酸水平变化及临床意义[J].中国综合临床,2006(5):398-400.
[16] DONG J Y,WEI Y Y,DAI X X,et al.Toxicity study of VOSO4using NMR-based metabonomics[J]. ACTA CHIM SINICA, 2010, 68(17): 1758-1764.
[17] 袁腾飞,李艳,彭锐.慢性肾脏病患者血清 Cyfra 21-1 水平的变化及临床意义[J].中华心血管病杂志,2011,39(7):579-616.
[18] 林丽容,黄明生,林石生.慢性肾病患者血肌酐含量检测及其与心功能损害的关系[J].海南医学院学报,2015,21(1):61-64.
[19] 许元文.肾功能检查及其临床意义[J].新医学,2002,33(4):242-243.