中草药复合添加剂对绵羊抗氧化机能的影响

张 瑜，王倩倩，张文佳，项斌伟，赵有英，辛嘉英，陈书明，张建新

（1.山西农业大学动物科技学院，山西太谷030801；2.右玉县畜牧局，山西右玉037200；3.右玉县宏宇牧业有限公司，山西右玉037200；4.哈尔滨商业大学食品科学与工程重点实验室，黑龙江哈尔滨150076）

在规模化养殖生产中，常使用抗生素等化学合成饲料添加剂[1-2]。抗生素的长期滥用，不仅造成畜禽消化道菌群紊乱，而且畜禽产品会存在有害药物残留，对公共卫生和人类健康造成极大危害[3]。目前，许多国家已禁止抗生素类添加剂在畜禽养殖中使用。在此背景下，寻找来源广、毒副作用小、药物残留少的替代物已成为有关学者研究的方向。中草药具有绿色天然、价格低廉、毒副作用小、低抗药性等优势[4-5]，故将其开发成天然、多功能的饲料添加剂已成为目前研究的方向[6-7]。近年来，国内外对中草药在动物上的应用主要集中在提高动物生产性能和提高机体免疫力等方面[8]。高辉等[9]采用不同的补益混合方剂添加到犊牛的日粮中，结果显示，与对照组相比，试验组血清中IgG，IgA水平显著升高（P＜0.05），试验组血清总胆固醇显著下降（P＜0.05），表明该中草药配方能显著提高犊牛的免疫机能，并改善肝功能。刘爱霞[8]通过在日粮中添加3个不同剂量的中草药，对山羊进行45 d的喂养试验，结果显示，与对照组相比，其中1%中草药添加剂能显著提高奶山羊的产奶量与乳品质，并获得了良好的经济效益。马得莹等[10]研究显示，中草药添加剂能够提高蛋雏鸡的生长性能，而且还具有一定抗病毒作用。赵泮峰等[11]研究表明，在每千克饲料中添加10 g中草药，可降低腹泻率，提高断奶幼兔生长性能。刘莉莉等[12]研究了中草药对泌乳期山羊血清和乳腺组织抗氧化指标的影响，结果表明，中草药添加剂能提高奶山羊的抗氧化能力。以上研究表明，不同的中草药组方均能改善畜禽生长性能，增强机体抗病能力，增强免疫力，提高产奶量，改善乳品质及提高机体的抗氧化能力。中草药种类繁多，配方各异，功效不同。

本研究进行了杜寒杂一代绵羊的育肥试验，研究山楂、五味子等8味中草药及多种微量元素组成的中草药复合添加剂对绵羊抗氧化机能的影响，旨在为中草药复合添加剂在绵羊饲料中的使用提供理论依据，为动物的无抗养殖奠定基础。该中草药复合添加剂可提高绵羊血清中的抗氧化指标，这将对绵羊的健康有重要意义。

1 材料和方法

1.1 试验动物及分组

选取右玉县宏宇牧业有限责任公司的4月龄健康杜寒杂一代绵羊60只，按照“体况相近、公母各半”的原则，随机分成4组，每组15只，分别设为公羊对照组（标准日粮）、公羊试验组（标准日粮＋中草药复合添加剂），母羊对照组（标准日粮）、母羊试验组（标准日粮＋中草药复合添加剂）。

1.2 中草药复合添加剂的制备

根据中草药配伍理论，中草药复合添加剂组成如下：MnSO4，FeSO4·7H2O，CuSO4·5H2O，KI，ZnO，Na2SeO3·5H2O，CoCl2·6H2O，VA，VD，VE，MgO，NaHCO3，Na2SO4，Ca（HPO4）2，石粉，莫能菌素，尿素，山楂，麦芽，陈皮，何首乌，五味子，川穹，黑豆，次粉，按照配方称质量，粉碎，过筛，混匀。

1.3 基础日粮与饲养管理

饲料配方列于表1。

表1 饲料配方

每天饲喂2次，于8：00与19：00各饲喂一次，先喂精饲料，再喂粗饲料（粗饲料自由采食，精饲料每只0.75 kg/d），自由饮水，饲喂试验期为45 d。

1.4 检测指标及方法

1.4.1 血清的制备 在饲喂试验的第15，30，45天，分别采集血液，注入离心管，待血液凝固，用玻璃棒将血块轻轻剥离，2 000 r/min离心10 min，吸出血清，-80℃冻存，备用。

1.4.2 总超氧化物歧化酶（T-SOD）的测定（羟胺法） 测定步骤按照南京生物建成试剂厂生产的试剂盒说明书进行。

1.4.3 丙二醛（MDA）的测定 血清中的MDA含量测定，采用硫巴比妥酸法（TBA）[13]，脂质过氧化过程中产生的丙二醛，可与硫代巴比妥酸形成红棕色的产物，在532 nm处有一吸收峰；根据在532 nm处的吸光系数，可计算出细胞中丙二醛的含量。丙二醛含量的多少可代表机体脂质过氧化水平和膜损伤程度的大小。

1.4.4 总抗氧化能力（T-AOC）的测定 采用南京生物建成试剂厂生产的试剂盒，具体测定步骤按照试剂盒说明书进行。

1.5 数据统计分析

采用SPSS 21.0对数据进行单因素方差分析和Duncan氏多重比较，结果以“平均值±标准差”表示。

2 结果与分析

2.1 中草药复合添加剂对绵羊血清T-SOD的影响

从表2可以看出，在第15，30，45天，与公羊对照组相比，公羊试验组血清中总超氧化物歧化酶的活性分别提高了 29.52%，54.70%和 56.96%，且差异显著（P＜0.05）；与母羊对照组相比，母羊试验组各阶段血清中总超氧化物歧化酶的活性分别提高了 28.71%，55.46%和 55.07%，且差异显著（P＜0.05）；公羊、母羊对照组在15，30，45 d时血清中总超氧化物歧化酶的活性变化不大，且差异不显著（P＞0.05）；与第 15天相比，公羊、母羊试验组血清中总超氧化物歧化酶的活性在30，45 d时迅速上升，且差异显著（P＜0.05），但30 d与45 d间差异不显著。说明该中草药复合添加剂添加到日粮中，饲喂30 d血清中总超氧化物歧化酶的活性就可达最高值。

表2 中草药复合添加剂对血清T-SOD的影响 IU/mL

2.2 中草药复合添加剂对绵羊血清MDA的影响

从表3可以看出，与公羊对照组30，45 d相比，公羊试验组30，45 d血清中丙二醛的含量分别降低了 48.42%和 46.30%，且差异显著（P＜0.05）；与母羊对照组30，45 d相比，母羊试验组30，45 d时血清中丙二醛的含量分别降低了45.87%和44.84%，且差异显著（P＜0.05）；公羊、母羊对照组在15，30，45 d时血清中丙二醛的含量变化不大，差异不显著（P＞0.05）；公羊、母羊试验组血清中丙二醛的含量随着饲喂中草药复合添加剂天数的增加，丙二醛的含量逐渐下降，且30，45 d时血清中丙二醛的含量与15 d相比差异显著（P＜0.05）。说明该中草药复合添加剂添加到日粮中，饲喂30 d后即能显著降低血清中丙二醛的含量。

表3 中草药复合添加剂对血清MDA含量的影响 mmol/mL

2.3 中草药复合添加剂对绵羊血清T-AOC的影响

由表4可知，在试验第15，30，45天，与公羊对照组相比，公羊试验组血清中总抗氧化能力分别提高了 51.49% ，106.10% 和 108.89% ，且差异 显著（P＜0.05）；与母羊对照组相比，母羊试验组血清中总抗 氧 化能 力 分别 提 高 了 55.77% ，111.59% 和110.35%，且差异显著（P＜0.05）；公羊、母羊对照组在15，30，45 d各阶段血清中总抗氧化能力差异不显著（P＞0.05）；公羊、母羊试验组血清中总抗氧化能力随着饲喂中草药复合添加剂天数的增加，其活性逐渐上升，且30，45 d时血清中总抗氧化能力与15 d相比显著升高（P＜0.05）。说明该中草药复合添加剂添加到日粮中，饲喂30 d后，血清中总抗氧化能力达最大值。

表4 中草药复合添加剂对血清中T-AOC的影响 IU/mL

3 讨论

正常情况下，机体氧自由基的产生与清除保持平衡；但在衰老、疾病或特殊生理情况下，机体抗氧化酶的活性显著降低，这些氧自由基大量积累，对机体造成极大破坏作用[14]。酶促系统和非酶促系统是动物机体防御自由基攻击的两大系统，其中酶促系统最主要的是SOD。SOD是需氧生物中普遍存在的一种含金属的酶[15]，有Cu-Zn-SOD和Mn-SOD，通过催化O2-·的歧化反应生成H2O2，阻止自由基对生物膜系统的损伤，从而维护细胞正常的生理功能。如果自由基不能及时清除，就会造成大量的MDA积于体内[16]。脂质过氧化作用产生的自由基不仅能连续诱发脂质的过氧化作用，而且还可以使蛋白质脱氢而产生蛋白质自由基，使蛋白质分子发生链式聚合，从而使细胞变性，这时机体的抗氧化系统发挥作用，总抗氧化能力（T-AOC）就成为衡量机体抗氧化性能的重要指标[17]。

规模化舍饲圈养极易造成羊体内的抗氧化体系紊乱，病死率上升。许多研究显示，中草药含有多种营养物质，如蛋白质、多糖、生物碱、甙类、挥发性树脂类、有机酸、氨基酸、维生素及微量矿物元素[18]。中草药通过“驱邪扶正”改善机体的失衡状态，来提高机体的抗氧化能力。申瑞玲等[19]和李宏全等[20]在蛋鸡上的试验结果表明，中草药方剂除能显著增加产蛋率外，还可极显著地提高血清中的SOD活性，降低血清中的MDA含量。崔永华[21]研究表明，日粮中添加2%的中草药能够显著提高生长牛血清中的抗氧化性能。刘莉莉等[12]研究发现，中草药添加剂能减少脂质过氧化物丙二醛的产生，同时能够提高血清和乳腺组织中的抗氧化酶活性，增强山羊的抗氧化能力。武孝晋等[22]研究表明，中草药添加剂可提高鸡体内SOD活性，并降低MDA含量。本试验在精饲料中添加5%中草药复合添加剂，15 d时即显著提高血清中的T-SOD，T-AOC的活性，分别上升28%，51%；在30 d时，血清中的丙二醛含量即可降低45%以上，说明该中草药复合添加剂能够显著提高绵羊抗氧化机能。试验组SOD活性升高可能与该添加剂含有“五味子”有关，木脂素类是五味子的主要药用成分，而五味子乙素是木脂素的活性成分之一[23-24]，李斌等[25]试验表明，五味子乙素对羟自由基清除作用大于相同质量浓度的微生素C。马得莹等[15]用五味子等中草药作为添加剂提高了机体抗氧化性能，显著地提高了血清中SOD酶活性。此外，中草药中的山楂含有黄酮类物质，可消除链引发阶段的自由基，通过酚羟基阻断自由基链反应而发挥抗氧化作用。武晋孝等[22]研究认为，影响抗氧化性能的因素还有维生素E、硒、锌或锰；本试验组中添加的中草药复合添加剂含硒等微量元素，也是提高绵羊抗氧化机能的因素之一。除此之外，该中草药复合添加剂中的麦芽、陈皮、何首乌、川穹、黑豆、次粉等含有的多种生物活性物质均有可能对绵羊血清中抗氧化指标产生影响，但其抗氧化功效及其作用机制还有待进一步研究。

4 结论

本研究结果表明，中草药复合添加剂能显著提高绵羊血清中T-SOD与T-AOC的活性，显著降低绵羊血清中MDA的含量，显著增强绵羊的抗氧化机能。研究结果为该中草药复合添加剂在绵羊育肥中应用奠定了基础。

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