茄叶斑鸠菊的化学成分研究

史茹茹，史资，陈新，章慧

摘要 [目的]研究茄叶斑鸠菊的化学成分。[方法]利用硅胶色谱、大孔树脂层析、Sephadex LH-20和ODS反相层析等方法，对茄叶斑鸠菊提取物进行分离纯化，并根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。[结果]从茄叶斑鸠菊中分离得到了6个神经酰胺类化合物，分别鉴定为1-O-β-D-glucopyranosyl-（2S，3R，8E）-2-[（2′R）-2-hydroxypalmitoyl amino] -8-octadecene -1，3-diol、1-O-β-D-glucopyranosyl-（2S，3S，4R，8E） -2-[（2′R）- 2-hydroxypalmitoyl amino]-8 -octadecene-1，3，4-triol、Soya cerbroside I、 （2S，3S，4R，8E） -2-[（2′R）-2-hydroxy tetracosanoyl amino]-8-octadecene-1，3，4-triol、（2S，3S，4R，8E） -2-[（2′R）-2-hydroxypalmitoyl amino]-8-octadecene-1，3，4-triol、（2S，3S，4R，8E） -2-[（2′R）-2-hydroxypentracosanoyl amino]-8-octadecene-1，3，4-triol。[结论]6个化合物均为首次从该植物中分离得到，为茄叶斑鸠菊活性成分的开发利用奠定基础。

关键词 斑鸠菊属；茄叶斑鸠菊；化学成分；神经酰胺；分离纯化

中图分类号 R284.1 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2018）06-0176-03

Study on Chemical Constituents of Vernonia solanifolia

SHI Ruru，SHI Zi，CHEN Xin et al （School of Biology and Pharmaceutical Engineering，Wuhan Polytechnic University，Wuhan，Hubei 430023）

Abstract [Objective] The research aimed to study the chemical components of Vernonia solanifolia.[Method]The components were isolated and purified by silica gel chromatography，macroporous resin chromatography，Sephadex LH-20 and ODS reverse phase chromatography and other methods，and the structure of the compound was identified by physicochemical properties and spectroscopic data.[Result]Six ceramide compounds were isolated from Vernonia solanifolia，and their structure were identified as 1-O-β-D-glucopyranosyl-（2S，3R，8E）-2-[（2′R）-2-hydroxypalmitoyl amino] -8-octadecene -1，3-diol；1-O-β-D-glucopyranosyl-（2S，3S，4R，8E） -2-[（2′R）- 2-hydroxypalmitoyl amino]-8 -octadecene-1，3，4-triol；Soyacerbroside I；（2S，3S，4R，8E） -2-[（2′R）-2-hydroxy tetracosanoyl amino]-8-octadecene-1，3，4-triol；（2S，3S，4R，8E） -2-[（2′R）-2-hydroxypalmitoyl amino]-8-octadecene-1，3，4-triol；（2S，3S，4R，8E） -2-[（2′R）-2-hydroxypentracosanoyl amino]-8-octadecene-1，3，4-triol.[Conclusion]Six compounds were isolated from Vernonia solanifolia for the first time，which laid the foundation for the development and utilization of the active ingredients of Vernonia solanifolia.

Key words Vernonia；Vernonia solanifolia；Chemical constituents；Ceramide；Separation and purification

茄葉斑鸠菊（Vernonia solanifolia）是菊科斑鸠菊属的植物，又名白花毛桃、咸虾菊、凉藤、过山龙等，全草入药，治腹痛、肠炎、痧气等症。该属植物约1 000种，主产热带地区。我国有30余种，分布在西南至东南部和台湾[1]。该属植物我国民间作为草药入药，全草药用，具有发表散寒、清热止泻的作用，可治疗急性肠胃炎、风热感冒、头痛、疟疾等症[2]；美洲该属植物被用作驱虫、抗疟植物药，疗效显著。国内外学者曾对该属植物的化学成分有较多研究，发现主要成分为倍半萜类、三萜、黄酮、甾体、挥发油等，这些成分展现了多方面的药理活性，如抗肿瘤、抗真菌、抗疟等[3]。史资等[4]对茄叶斑鸠菊提取物活性进行了评价，发现该植物全草甲醇提取物具有较强的抗肿瘤活性和抗氧化活性。但有关茄叶斑鸠菊的化学成分研究较少，为了发现抗肿瘤活性物质，笔者对茄叶斑鸠菊甲醇提取物进行了化学成分研究。

1 材料与方法

1.1 试验材料 茄叶斑鸠菊全草采集于中国福建，由福建省亚热带植物研究所陈华良博士鉴定为Vernonia solanifolia，药材标本保存于武汉轻工大学天然产物资源开发与利用研究室。

1.2 仪器与试剂 Bruker AV 400型核磁共振波谱仪（瑞士布鲁克公司）；十万分之一分析天平（日本岛津公司，AUWl20D）；数显恒温水浴锅（常州丹瑞实验仪器设备有限公司，HH-D4）；柱层析硅胶（100～200目，青岛海洋化工厂）；MCI GEL CHP 20P （日本三菱化学公司）；D101大孔吸附树脂（天津兴南允能高分子技术有限公司）；ODS中压色谱柱填料（日本YMC公司）；Sephadex LH-20 （Pharmacia 公司）；化学试剂均为分析纯（国药集团化学试剂有限公司）。

1.3 试验方法 茄叶斑鸠菊全草5 kg，粉碎，以95%乙醇加热回流提取3次，将提取液合并浓缩至无醇味，加水混悬，依次用石油醚、正丁醇萃取，得石油醚部位浸膏200 g，正丁醇部位浸膏300 g。

石油醚部位浸膏，采用硅胶柱层析，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，通过TLC检测合并后得到4个组分（Fr I～IV）。Fr III经D101大孔吸附树脂乙醇梯度洗脱，反复硅胶柱层析、反相ODS柱层析和凝胶柱层析进行分离纯化，得到3个化合物，分别为化合物4（9.5 mg）、化合物5（12.8 mg）、化合物6（16.8 mg）。正丁醇部位浸膏，经硅胶柱层析（氯仿-甲醇梯度洗脱），通过TLC检测合并后得到3个组分Fr 1～3，Fr 2经过MCI树脂（甲醇-水梯度洗脱），硅胶柱层析（氯仿-甲醇梯度洗脱）、反相柱层析（甲醇-水梯度洗脱）以及凝胶柱层析（甲醇洗脱）进行分离纯化，得化合物1（18.8 mg）、化合物2（21.2 mg）和化合物3（14.9 mg）。

2 结果与分析

试验分离得到的6个化合物的结构见图1，化合物1～6经过核磁共振波谱技术测定，与参考文献进行对比，发现6个化合物均为神经酰胺类化合物，且均为首次从该植物中分离得到。

2.1 化合物1 白色胶状固体，ESI-MS m/z：716 [M+H]+，分子式为 C40H77NO9。1H-NMR（DMSO-d6，400MHz） δ：7.49 （1H，d，J=9.0Hz，NH），5.36 （2H，m，H-8，9），4.13 （1H，d，J=7.8 Hz，H-1″），3.91 （1H，m，H-1a），3.86 （1H，m，H-2′），3.78 （1H，m，H-2），3.68 （1H，dd，J=10.0，6.0 Hz，H-6″a），3.58 （1H，dd，J=10.0，3.8 Hz，H-1b），3.46 （1H，m，H-3），3.41 （1H，m，H-6″b），3.16 （1H，m，H-3″），3.12 （1H，m，H-5″），3.06 （1H，m，H-4″），2.96 （1H，m，H-2″），1.94 （4H，m，H-7，10），1.56 （4H，m，H-3′，4′），1.55 （2H，m，H-5），1.27 （2H，m，H-4），1.20～1.38 （16H，m，H-6，11-15，16，17），1.20～1.38 （22H，m，H-5′-15′），0.86 （6H，t，J=7.0 Hz，H-18，16′）；13C-NMR （DMSO-d6，100 MHz） δ：174.6 （C-1′），131.0 （C-8），128.7 （C-9），104.8 （C-1″），77.8 （C-3″），77.5（C-5″），74.4 （C-2″），71.9 （C-2′），70.5 （C-3），70.5 （C-4″），70.0 （C-1），62.0 （C-6″），53.6 （C-2），35.3 （C-3′），34.3 （C-4），33.0（C-7），32.8 （C-10），32.1 （C-16），32.1 （C-14′），28.0～29.5 （C-6，11-15），28.0-29.5 （C-5′-13′），25.6 （C-4′），25.1 （C-5），23.2 （C-17，15′），14.7（C-18，16′）。以上数据与文献[5]报道的化合物1-O-β-D-glucopyranosyl-（2S，3R，8E）-2-[（2′R）-2-hydroxypalmitoyl amino]-8-octadecene-1，3-diol基本一致。

2.2 化合物2 白色胶状固体，ESI-MS m/z：732[M+H]+，分子式为C40H77NO10。1H-NMR（DMSO-d6，400MHz） δ：7.51 （1H，d，J=9.0 Hz，NH），5.38 （2H，m，H-8，9），4.14 （1H，d，J=8.0 Hz，H-1″），4.10 （1H，m，H-2），3.85 （1H，m，H-2′），3.80 （1H，m，H-1a），3.69 （1H，m，H-6″a），3.66 （1H，m，H-1b），3.37 （1H，m，H-3），3.44 （1H，m，H-6″b），3.35 （1H，m，H-4），3.14 （1H，m，H-3″），3.10 （1H，m，H-5″），3.04 （1H，m，H-4″），2.94 （1H，m，H-2″），1.93 （4H，m，H-7，10），1.49 （4H，m，H-3′，4′），1.19～1.36 （16H，m，H-5，6，11-17），1.19-1.36 （22H，m，H-5′-15′），0.88 （6H，t，J=7.0 Hz，H-18，16′）；13C-NMR （DMSO-d6，100 MHz） δ：174.7 （C-1′），131.2 （C-8），130.8 （C-9），104.6 （C-1″），77.8 （C-3″），77.5（C-5″），75.1 （C-4），74.4 （C-2″），71.9 （C-2′），71.5 （C-3），70.9 （C-4″），69.8 （C-1），62.0 （C-6″），50.8 （C-2），35.5 （C-3′），33.2 （C-7），32.9 （C-10），32.2 （C-16，14′），29.5～30.0 （C-6，11-15），29.5～30.0 （C-5′-13′），26.4 （C-5），25.3 （C-4′），23.0 （C-17，15′），14.9 （C-18，16′）。以上數据与文献[5]报道的化合物1-O-β-D-glucopyranosyl-（2S，3S，4R，8E） -2-[（2′R）-2-hydroxypalmitoyl amino]- 8-octadecene-1，3，4-triol基本一致。

2.3 化合物3 白色无定型粉末，ESI-MS m/z：737 [M+Na]+，分子式为C40H75NO9。1H-NMR（C5D5N，400MHz） δ：8.39 （1H，d，J=9.0 Hz，NH），5.98 （2H，m，H-5，9），5.48 （2H，m，H-4，8），4.94 （1H，d，J=7.6 Hz，H-1″），4.52 （1H，m，H-6′b），4.39 （1H，m，H-6′a），4.26 （2H，m，H-1a，3″），4.23 （2H，m，H-1b，4″），4.07 （3H，m，H-2，3，2′），3.92 （2H，m，H-2′，5″），2.15 （4H，s，H-6，7），1.98 （2H，m，H-10），1.72 （2H，m，H-3′），1.38 （2H，m，H-4′），1.20～1.36 （14H，m，H-11-17），1.20～1.38 （22H，m，H-5′-15′），0.87 （6H，t，J=7.0 Hz，H-18，16′）；13C-NMR（C5D5N，100 MHz） δ：174.6 （C-1′），131.6 （C-5），131.2 （C-9），130.2 （C-4），129.5 （C-8），104.5 （C-1″），77.4 （C-3″），77.1 （C-5″），74.1 （C-2″），71.6 （C-2′），70.3 （C-3），70.3 （C-4″），69.1 （C-1），61.8 （C-6″），53.7 （C-2），34.8 （C-3′），33.9 （C-10），33.3 （C-6），33.2 （C-7），29.4～30.1 （C-11-16），29.4～30.1 （C-5′-14′），24.8 （C-4′），22.1 （C-17，15′），13.5 （C-18，16′）。以上數据与文献[6]报道的化合物Soya cerbroside I基本一致。

2.4 化合物4 白色粉末，ESI-MS m/z：682[M+H]+，分子式为C42H83NO5。1H-NMR（C5D5N，400MHz） δ：8.95 （1H，d，J=8.6 Hz，NH），5.79 （2H，m，H-8，9），5.31 （1H，m，H-2），4.96 （1H，m，H-2′），4.86 （1H，dd，J=10.6，4.7 Hz，H-1a），4.75 （1H，dd，J=10.6，4.7 Hz，H-1b），4.65 （1H，m，H-4），4.71 （1H，m，H-3），1.60～1.65 （14H，m，H-11-17），1.60-1.65 （38H，m，H-4′-23′），1.21 （6H，t，J=6.5 Hz，H-18，24′）；13C-NMR （C5D5N，100 MHz） δ：175.6 （C-1′），131.6 （C-9），131.4 （C-8），75.8 （C-3），71.8 （C-4），71.4 （C-2′），61.1 （C-1），52.3 （C-2），34.6 （C-3′），32.8 （C-5），32.1 （C-10），31.8 （C-7），25.9 （C-6），31.4 （C-16，22′），29.1～31.2 （C-11-15），29.1～31.2 （C-5′-21′），24.6 （C-4′），22.1 （C-17，23′），13.2 （C-18，24′）。以上数据与文献[7]报道的化合物（2S，3S，4R，8E） -2-[（2′R）-2-hydroxytetracosanoyl amino]-8-octadecene-1，3，4-triol基本一致。

2.5 化合物5 白色无定形粉末，ESI-MS m/z：570[M+H]+，分子式为C34H67NO5。1H-NMR（C5D5N，400MHz） δ：8.62 （1H，d，J=8.5 Hz，NH），5.61 （2H，m，H-8，9），5.06 （1H，m，H-2），4.59 （1H，m，H-2′），4.51 （1H，dd，J=10.6，4.6 Hz，H-1a），4.32 （1H，dd，J=10.6，4.6 Hz，H-1b），4.21 （2H，m，H-3，4），2.18 （4H，m，H-3′，5），1.98 （6H，m，H-6，7，10），1.65 （4H，m，H-15′，17），1.20～1.38 （22H，m，H-4′-14′），1.20～1.38 （12H，m，H-11-16），0.89 （6H，t，J=6.5 Hz，H-18，16′）；13C-NMR （C5D5N，100 MHz） δ：174.3 （C-1′），131.5 （C-9），131.2 （C-8），75.5 （C-3），71.6 （C-2′），71.0 （C-4），60.7 （C-1），51.6 （C-2），34.6 （C-3′），32.5 （C-5），32.0 （C-6），31.7 （C-4′），30.8 （C-7，10），26.8～30.1 （11-16），26.8～30.1 （5′-14′），21.6 （C-17，15′），13.2 （C-18，16′）。以上数据与文献[8]报道的化合物 （2S，3S，4R，8E） -2-[（2′R）-2-hydroxypalmitoyl amino]-8-octadecene-1，3，4-triol基本一致。

2.6 化合物6 白色无定形粉末，ESI-MS m/z：696[M+H]+，分子式为C43H85NO5。1H-NMR（C5D5N，400 MHz） δ：8.65 （1H，d，J=8.6 Hz，NH），5.59 （1H，m，H-8），5.56 （1H，m，H-9），5.15 （1H，m，H-2），4.67 （1H，m，H-2′），4.56 （1H，m，H-1a），4.49 （1H，m，H-1b），4.40 （1H，m，H-4），4.35 （1H，m，H-3），2.33 （2H，m，H-6），2.29 （2H，m，H-3′a），2.23 （2H，m，H-10），2.09 （2H，m，H-3′b），2.07 （2H，m，H-7），2.03 （2H，m，H-5），1.80 （2H，m，H-4′），1.25～1.38 （14H，m，H-11-17），1.25～1.38 （40H，m，H-5′-24′），0.86 （6H，t，J=6.7 Hz，H-18，25′）；13C-NMR （C5D5N，100MHz） δ：174.3 （C-1′），129.9 （C-9），129.6 （C-8），75.9 （C-3），71.9 （C-4），71.5 （C-2′），61.0 （C-1），52.0 （C-2），34.7 （C-3′），33.2 （C-5），32.8 （C-6），32.3 （C-10），32.0 （C-7），25.7 （C-4′），22.0～31.1 （11-17），22.0～31.1 （5′-24′），13.2 （C-18，25′）。以上数据与文献[9]报道的化合物 （2S，3S，4R，8E） -2-[（2′R）-2-hydroxypentracosanoyl amino]-8-octadecene-1，3，4-triol基本一致。

3 結论

该研究通过系统分离纯化，从茄叶斑鸠菊全草提取物中分离鉴定了6个神经酰胺类化合物，经结构鉴定分别为1-O-β-D-glucopyranosyl-（2S，3R，8E）-2-[（2′R）-2-hydroxypalmitoyl amino] -8-octadecene -1，3-diol、1-O-β-D-glucopyranosyl-（2S，3S，4R，8E） -2-[（2′R）- 2-hydroxypalmitoyl amino]-8 -octadecene-1，3，4-triol、Soya cerbroside I、 （2S，3S，4R，8E） -2-[（2′R）-2-hydroxy tetracosanoyl amino]-8-octadecene-1，3，4-triol、（2S，3S，4R，8E） -2-[（2′R）-2-hydroxypalmitoyl amino]-8-octadecene-1，3，4-triol、（2S，3S，4R，8E） -2-[（2′R）-2-hydroxypentracosanoyl amino]-8-octadecene-1，3，4-triol。经检索，6个化合物均为首次从该植物中分离得到，该类化合物具有显著的抗肿瘤、抗HIV、抗病毒、免疫调节、抗菌、抗炎等活性[10-12]。

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