六味丁香散质量标准的起草研究

韩秀兰 才毛

（1青海省海西州食品药品检验所 青海 德令哈 817099）

（2青海省药品检验检测院 青海 西宁 810000）

六味丁香散为我省藏医院的制剂产品，本品系藏族验方，具有清热解毒，用于咽喉肿痛，声音嘶哑，咳嗽。该品种为医院制剂，目前该品种无生产企业注册。截止2016年12月，收集到七家医院生产的十批样品。其检验项目为散剂的常规项，为了进一步控制制剂质量，本文对该制的质量控制方法进行了实验研究。

1.仪器与试药

美国Agilent1260高效液相色谱仪，Agilent1260汉字色谱工作站，美国Agilent1260紫外检测器，甲醇为色谱纯，水为新制重蒸馏水，丁香对照药材（中国生物制品检定所，批号：120907-201010）；甘草对照药材（中国生物制品检定所，批号：121001-201003）；诃子对照药材（中国生物制品检定所，批号：110731-200911）；丁香酚对照品（中国生物制品检定所，批号：110831-200803），六味丁香散（七家医院的十批样品）。

2.方法与结果

2.1 薄层色谱[1]

木香、甘草、白花龙胆和诃子分别照薄层色谱法《中国药典》2015年版通则试验，《中国药典》2010年版一部附录Ⅵ B试验，《中国药典》2010年版一部附录Ⅵ B试验，《中国药典》2015年版通则试验。见图1～4。

图1 木香的薄层色谱图（T21℃，RH50%）

图3 白花龙胆的薄层色谱图（T25℃，RH38%）

图4 诃子的薄层色谱图（T25℃，RH38%）

2.2 显微鉴别

取本品少许，置显微镜下观察：草酸钙簇晶众多，大多存在于较小的薄壁细胞中，也有数个簇晶连接成行（丁香）。碳酸钙结晶短棒状或柱状，直径2～4µm（石灰华）。纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维（甘草）。花粉粒类球形，直径27～35µm，外壁分层明显，具3孔沟（白花龙胆）。石细胞成群，呈类圆形、长卵形、长方形或长条形，孔沟细密而明显（诃子）。见图5～9。

图5 草酸钙簇晶（丁香）(10×40)

图6 碳酸钙结晶（石灰华）(10×40)

图7 晶纤维（甘草）(10×40)

图8 花粉粒（白花龙胆）(10×40)

图9 石细胞 （诃子）(10×40)

2.3 含量测定

2.3.1 色谱条件 色谱柱：Agilent-C18柱（250mm×4.6mm）；柱温：25℃；流动相：以甲醇-水（55∶45）为流动相；检测波长为280nm。

2.3.2 线性关系测定 分别精密吸取丁香酚对照品溶液（233.24µg/ml）2、4、8、16、20µl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ D）测定峰面积。标准曲线y=1.0891x+17.876相关系数=1。丁香酚进样量在466.48～4664.8µg范围内与色谱峰面积呈良好线性关系。

2.3.3 回收率试验 采用加样回收法，取已知含量的六味丁香散（批号：20120913，丁香酚含量为11.3966mg/g）约0.25g，平行6份，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密加入丁香酚对照品溶液（C=0.05643mg/ml）50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率200W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。按上述色谱条件测定丁香酚的含量，平均回收率为98.71%，RSD为3.6%。

3.讨论

丁香为方中君药，主要含丁香酚，故以丁香酚为指标成分进行定量测定。本实验考察甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（10∶1∶0.1）、环己烷-乙酸乙酯-甲酸（12∶3∶0.5）、甲苯-乙酸乙酯（19∶10）、石油醚（60～90℃）-醋酸乙酯-苯（7∶1.5∶1.5）、环己烷-丙酮（10∶3）等展开系统，发现环己烷-乙酸乙酯-甲酸（12∶3∶0.5）的效果好，故选用该展开系统。我们采用不同的流动相乙腈：水（13∶87），乙腈：0.1%磷酸溶液(14∶86)，甲醇-水-磷酸（10∶90∶0.01），结果表明采用流动相甲醇-水（55∶45）的色谱图基线较稳。我们采用不同的提取溶剂水，甲醇，稀乙醇，结果表明采用甲醇的色谱图杂质峰比较少，分离度较好。

【参考文献】

[1]中华人民共和国药典.2010年版一部，国家药典委员会编[M].中国医药科技出版社，4，15，57，80，173.