胚胎停育患者血清TNF-α和IL-8的表达研究

柳胜贤,王 芳,刘格琳,吴成平

(郑州大学附属洛阳中心医院生殖医学中心 471009)

胚胎停育是孕早期的一种常见病理现象，它不同于先兆流产，而是孕囊内的受精卵尚未形成胚胎就停止了发育，通俗地说就是胚芽无心管搏动出现了枯萎[1]。胚胎停育不仅对孕妇身心健康造成极大的伤害，同时也给家人、亲属带来负面影响，加重了社会负担。造成胚胎停育的因素是多方面的，可能是染色体、内分泌和自身抗体方面出现了问题，也可能是血型不合、病毒感染、生长环境变化而不适合胚胎生长发育。近年来，随着胚胎停育发生率不断上升，全面了解胚胎停育的病因，并采取相应的保护措施，在生殖医学领域具有特殊意义[2]。有研究[3-4]表明，白细胞介素-8(inierleukin-8,IL-8)对早期滋养细胞生长浸润、胚泡着床及胎盘形成有较大的促进作用，而肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor，TNF-α) 水平升高则对胚胎发育产生较大抑制作用。为进一步了解胚胎停育的发病机制与影响因素，笔者对胚胎停育患者血清中TNF-α和IL-8水平进行了检测，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取本院2015年1月至2016年12月收治的61例胚胎停育患者为研究组，入选者均符合胚胎停育诊断标准[4]，即有下列4种情形之一：(1)头臂长度大于或等于7 mm且无胎心；(2)孕囊平均直径大于或等于25 mm且无胎心；(3)检查出无卵黄囊的孕囊,14 d后复查未见有胎心的胚胎；(4)检查出有卵黄囊的孕囊，11 d后仍不见有胎心的胚胎。排除标准：(1)既往有不良妊娠史、精子抗体阴性，性激素及甲状腺功能检查和夫妇染色体核型分析出现异常者；(2)停经超过12周及患有子宫畸形、子宫肌瘤及生殖器官急感染等疾病者；(3)合并有严重内科疾病及传染性疾病者。另选同期来本院就诊可见胚胎原始心管搏动、既往无不良孕产史的50名正常早孕女性为对照组，两组对象年龄、孕次、妊娠天数和孕囊直径比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性，详见表1。本研究经本院医学伦理委员会批准，受试者均知情同意并签署知情同意书。

表1 两组对象临床资料比较

1.2方法 所有研究对象于入组后次日空腹采集肘静脉血3 mL，3 000 r/min离心25 min后置于-80 ℃冰箱中待检。采用微粒子化学发光法检测血清孕酮，定量测定试剂盒购自威海威高生物科技有限公司[鲁食药监械(准)字2011第2400227号]，严格按试剂盒说明进行操作；TNF-α、IL-8采用放射免疫分析技术进行测定，试剂盒购自北京北方生物技术研究所，操作步骤严格按照试剂盒操作说明进行。

2 结 果

研究组患者血清孕酮的水平和IL-8水平明显低于对照组，而TNF-α水平则明显高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.01)，见表2。

表2 两组对象血清TNF-α和IL-8水平比较

3 讨 论

所谓胚胎停育指早期胚胎停止生长发育，导致胚胎“消失”，胚胎停育过去称过期流产或稽留流产，虽然也是典型的妊娠终止，但其病理过程与先兆流产有很大差异[5-6]。导致胚胎停育的原因复杂，除遗传、解剖、内分泌、环境等因素外，近年来发现，人巨细胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)等病毒感染也极易导致胚胎停育[7]。而TNF-α和IL-8与HCMV感染的发生与扩散有非常密切的关系。

TNF-α既是一种多功能细胞因子，也是一种强有力的诱导剂；它不仅对中性粒细胞具有趋化作用，也对细胞具有吞噬作用，还能促进IL-8的合成及释放，适量的TNF-α有利于调节滋养层细胞正常增殖、分化和凋亡，这对于怀孕女性能量代谢，提高孕激素及绒毛促性腺激素的合成，继而植入胎盘、促进胚胎发育，维持妊娠有较大的促进作用[8]。但TNF-α水平过高又会激活促凝血酶原，使胎盘滋养血管素沉积、血栓形成，尤其是激发Th1型免疫反应，排斥胚胎组织[9]。在本研究中，确诊为胚胎停育的研究组患者TNF-α平均水平几乎为对照组的5倍，差异有统计学意义(P<0.01)，这进一步证明，胚胎停育的发生与孕妇体内TNF-α的水平有密切的关联性，在女性妊娠的初期，体内TNF-α等细胞因子对妊娠的维持可起到极其重要的作用，水平过高或过低都会影响胎盘和胚胎的正常生长[10]。尤其是TNF-α水平超高有利于HCMV的感染及扩散，形成负性调节，加重孕母“免疫抑制”状态，破坏了机体正常凋亡平衡，影响胚胎的营养吸收和供给，出现胚胎停育[11]。

IL-8是一种受到机体内多种因素调节的炎性细胞因子，在妊娠及女性生殖内分泌、胚泡着床与胚胎生长发育等环节扮演了重要角色[12]。有研究表明，IL-8通过介导体液免疫参与同种异体免疫耐受过程是相当复杂的[13-14]。IL-8能刺激机体β细胞产生抗体及细胞毒性T淋巴细胞分化，增强粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)活性，抑制母体的免疫排斥反应，非常有利于胚泡植入和胚胎生长发育；另一方面，IL-8作为Th2型细胞因子具有抗炎作用，也有利于妊娠。在本研究中，研究组患者外周血中IL-8水平明显低于对照组(P<0.01)。笔者分析，其中的原因在于IL-8可使Th1/Th2保持平衡，母体对胚胎产生免疫耐受，能保证妊娠进程的延续[15]，而研究组IL-8水平过低，母体免疫系统会对胚胎产生排斥，造成胚胎停育。

孕酮是卵巢分泌的具有生物活性的主要孕激素，给胚胎生长及发育提供支持和保障。有研究[16]表明，滋养细胞中生存素的表达下降通过抑制滋养细胞增殖、分化，胎盘与子宫内膜血管受阻，导致胚胎细胞凋亡，停止发育产生稽留流产，这其中，是否与血清中的IL-8有关还有待于进一步的研究。

总之，导致胚胎停育的因素较多，相关病理也非常复杂，TNF-α水平增高，血清孕酮和IL-8水平降低是否可作为胚胎停育的预测指标还需要进一步进行大样本研究。本研究结果显示，胚胎停育患者与正常早孕女性体内孕酮、IL-8和TNF-α的水平相比较差异明显，可以证实，IL-8和TNF-α作为多效性细胞因子，在维持胚胎正常发育过程中扮演了重要角色，IL-8和TNF-α都可改变孕妇的免疫状态和细胞因子的表达，通过凋亡异常相互作用影响胚胎正常发育[17]，为今后防治胚胎停育，寻找阻断免疫因子作用的新疗法提供了重要参考。

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