猪圆环病毒2型疫苗临床免疫效果的评价

肖焕星，郭彦辉，王 波，赖庆光

（上海海利生物技术股份有限公司，上海 201403）

猪圆环病毒2型(PCV-2)是引起猪圆环病毒病的首要病原，它主要侵袭猪的免疫系统，干扰和破坏机体对抗疾病时免疫抗体的产生和维持，致使抵抗力下降，从而容易继发或并发其他疾病，可引起断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）、猪皮炎肾病综合征（PDNS）、断奶猪和肥育猪的呼吸道疾病（PRDC）、母猪繁殖障碍（RF）等疾病[1]。猪圆环病毒2型遍布全球，给世界各国的养猪业造成巨大的经济损失[2]。目前，猪场普遍采用免疫猪圆环病毒2型疫苗来防控猪圆环病毒病，并取得了令人满意的效果[3]。尽管圆环病毒疫苗供应商及研发单位都提供了疫苗免疫评价方法（免疫阴性猪后：检测血清抗体水平，相对日增重，圆环病毒载量，攻毒试验等），但在猪场复杂的背景条件下，如何来简便、科学评价圆环疫苗的免疫效果，成为各养殖业主最为关心的问题。本试验通过比较猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫组及非免疫组仔猪在10周龄时的平均增重、14周龄成活率及血清抗体的变化规律，综合评估疫苗的免疫效果，希望能对猪场在临床评价圆环疫苗的免疫效果及在选择适合本场的疫苗时提供参考。

1　试验方法

1.1 试验动物及分组

试验猪由河北某2000头种猪场提供，该场未免疫圆环病毒疫苗但种猪及肥猪血清抗体均为阳性。试验随机选择15窝×4头/窝（14±2 ）日龄的健康仔猪60头，同窝仔猪随机平均分配到试验组及对照组，每组30头并做好标识。

1.2 疫苗及检测试剂盒

猪圆环病毒灭活疫苗（商品名：圆毕净，规格100 mL/瓶，批号：20170105）由上海海利生物技术股份有限公司提供。猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒由韩国金诺提供。

表1　试验动物处理方案

表2　前腔静脉采血设计

表3　各组试验猪2～14周龄成活率

表4　各组试验猪2～10周龄个体平均增重

图1　各组不同周龄血清ELISA抗体水平S/P

1.3 试验动物处理及血清样品采集

试验动物按该猪场常规的管理方式进行饲养，按表1进行免疫处理、称重及统计死亡数。

试验动物血清样品采集按表2方案执行，前腔静脉采血3～5 mL/头，将析出的血清转移到1.5 mL离心管备用。

1.4 血清抗体检测

将采集的血清样品按试剂盒公司提供的操作规程做ELISA 抗体检测，抗体水平用S/P值表示。判定标准：样品S/P值≥0.4判定为阳性，样品S/P值＜0.3判定为阴性。

1.5 数据统计与分析

增重数据、抗体水平用平均值±标准差表示，用SAS软件进行显著性分析。

2　结果与分析

2.1 各组死亡率对比分析

试验结束时试验组的成活率为90.0%高于对照组的成活率83.3%，尽管差异不显著（P=0.83，P＞0.05），但在一定程度上仍能表明圆环病毒2型灭活疫苗的免疫改善了猪场的临床症状，这一点与临床上猪群的整齐度及健康度提高相吻合。

2.2 各组平均增重对比分析

从表4可以看出，10周龄试验猪转栏时的平均增重试验组（22.91 kg）显著高于对照组（19.04 kg），表明圆环病毒2型灭活疫苗免疫猪群能有效抵抗田间野毒的进攻，使免疫组的仔猪生长潜能得以充分发挥；而对照组仔猪因受圆环病毒感染的影响造成生长缓慢。

2.3 各组血清ELISA抗体变化规律与分析

通过图1我们可以看出，对照组仔猪母源抗体从2周开始下降，6到8周降到最低，10周龄时因野毒感染ELISA抗体水平再次上升，并达到异常高的水平S/P值达到2.7；试验组仔猪分别于2周、5周龄免疫猪圆环病毒2型灭活苗后，抗体水平的走势较对照组发生变化，即：2周龄到6周龄时母源抗体迅速下降，而自身抗体未完全建立，所以抗体水平呈稍下降的趋势，6周龄后伴随主动免疫抗体水平的升高抗体水平逐步上升并维持在2.0左右，呈长尾的L型。从这种抗体水平的变化趋势可以看出疫苗免疫有效阻止了野毒感染过程。

3　总结与讨论

1）圆环病毒2型感染猪群后，在不同猪场不同的背景条件下，表现不同的临床症状，对于临床症状明显的群体，通过临床症状的改善（如：成活率、发病率等），来评价疫苗免疫后的效果是可行的。

2）除了临床症状的改善外，圆环疫苗的免疫效果会最终体现在生产成绩的提高方面，所以通过评价生产成绩的表现来间接评估疫苗的免疫效果，成为多数猪场认可的方法。

3）因为猪场背景复杂，许多因素及病原都会造成类似圆环病毒病的临床表现，如：高致病性猪蓝耳病、新报导的圆环病毒3型[4]，这些因素所导致临床损失不会因为猪圆环病毒2型疫苗接种得到改善。因此，特异性的血清学检测是必不可少的，在临床上使用最多的血清学检测方法是ELISA方法。在使用ELISA方法评估圆环疫苗免疫效果时采样时间点至关重要，建议采集7～8周龄的样品，因为此时母源抗体已降至最低点，而野毒抗体还没有起来，此时的ELISA抗体水平和疫苗免疫的相关性最强。

综上所述，关于圆环病毒2型疫苗在临床上免疫效果的评估，要结合临床症状、生产成绩及血清抗体水平进行综合分析。

[1] 吕惠序.猪圆环病毒2 型的诊断与综合防制[J].养猪，2014（3）：113-115.

[2] GILLESPIE J， OPRIESSNIG T，MENG XJ， et al. Porcine circovirus type2and porcine circovirusassociated disease[J]. Vet Intern Med，2009，23：1151-1163.

[3] 邢刚，马涛，邱小伙，等. 商品化猪圆环病毒2型灭活疫苗临床免疫效果比较[C].中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会论文集，2013：406-410.

[4] SHAO-LUN ZHAI， XIA ZHOU，HE ZHANG，et al. Comparative epidemiology of porcine circovirus type3in pigs with different clinical presentations[J]. Virology Journal，(2017)14：222.