王红玉,本莲芳,焦林宏,马 娅,苏雪花
(兰州石化职业技术学院 石油化学工程学院,甘肃 兰州 730060 )
苦菜,又称苣荬菜、苦苣菜等,随地域的差异,所指植物不同,一般是指菊科苦苣菜属一类植物。 苦菜资源十分丰富,全草可入药,性寒、味苦,民间常做野菜食用,是一种药食同源的多年生草本植物。苦菜中黄酮类化合物含量较高,有很好的药效作用,如清除自由基、保护肝脏、保护心脑、调节血脂等作用。因此,继续研究苦菜中黄酮尤为重要,本文就苦菜中总黄酮的提取纯化工艺、含量测定技术及药效作用及机制的研究进展进行综述。
天然产物提取的最常见的方法是乙醇回流提取法。程梁华[1]等用此法提取中华苦荬菜中总黄酮3 h,得率为16.6 mg/g,用乙醇回流法提取耗费时间长。
超声波近年来在有效成分的提取上应用很广泛,原理是利用超声波加快黄酮类化合物分子的运动速度和运动频率,增强溶剂的穿透能力,加快植物中功能性成分的提取速度。张晶晶[2]等以乙醇为溶剂, 60 W的超声波辅助提取苦菜总黄酮40 min,提取率为 6.6%。周劝娥[3]等采用此种方法对陕西苦菜叶中总黄酮进行提取,含量为 64.6mg /g。
近年来,微波辅助提取技术由于对有效成分的选择性好、产物含量高、所需溶剂量少、提取时间短等特点,在天然产物提取中也应用较多。韩忠明[4]等以乙醇为溶剂,在相同的温度下,提取中华苦荬菜中总黄酮,常规回流提取2 h,微波辅助提取5 min,两种方法相比,微波辅助方法不但总黄酮含量高而且所用时间短。
超高压提取法是一种新的提取方法,是在比较低或常温下,对植物施加静压力,保压一段时间,从而提高提取速率,此法不但提取量高,而且所用时间短。安卓[5]的研究发现在压力450MPa左右、保压8min,用乙醇水溶液提取苦苣菜中总黄酮, 得率约为5.8mg/ g。
苦菜中黄酮的提纯主要是运用大孔树脂。武惠斌[6]等研究发现对于苦荬菜中总黄酮,XAD-16型大孔树脂纯化效果好,纯化后总黄酮纯度达89%。安卓[5]等研究苦苣菜黄酮的纯化,发现八种大孔树脂中 AB-8型最适合纯化苦苣菜总黄酮,纯化后黄酮的纯度提高了两倍左右。刘冬涵[7]等研究苦菜总黄酮的纯化,也发现利用AB-8型树脂后总黄酮纯度提高了两倍多。所以,XAD-16型和 AB-8型两种树脂对苦菜总黄酮都有较理想的提纯效果。
刁全平[8]等采用光谱分析法,测定辽宁苦菜中总黄酮的含量,用芦丁作标准品,采用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠为显色系统,在 510 nm处测定吸光度值,根据标准曲线法得到黄酮含量约为 88 mg/g。
覃成[9]等利用 HPLC法测定苦菜中芦丁的含量,结果表明, 在 0.025~0.075 mg/mL 范围内线性关系良好(R=0.999,n=5),平均回收率为98 %,RSD 为 2.5%。表明此法适合测定苦苣菜中芦丁含量。
刘仰斌[10]等采用紫外分光光度法,测定苦菜中总黄酮含量,用染料木素为对照品,在264 nm处检测,根据标准曲线法得到苦菜叶中总黄酮含量为0.23%,茎中总黄酮含量为0.12%。此法测得结果准确、重复性好,适合苦菜总黄酮含量的测定 。
张坤[11]等研究发现苦菜黄酮对 DPPH·的清除能力比较强。周劝娥[2]等研究发现苦菜中黄酮对DPPH·、·OH、O2-·都具有良好的清除能力。安卓[5]的研究发现苦苣菜总黄酮对于·OH的清除能力比抗氧化剂Vc和二丁基羟基甲苯(BHT)更强,对于DPPH·、O2-·、ABTS自由基等的淸除能力与Vc和BHT相当。杨汗伟[12]等研究发现苦苣菜总黄酮的抑菌能力主要针对金黄色葡萄球菌,黄酮浓度越大,抑菌能力越强。以上研究说明苦菜黄酮可以作为优良的天然抗氧化剂使用。
刘杨[13]和卢新华[14]等研究发现苦菜总黄酮对酒精和CCl4所造成的肝脏损伤有比较明显的保护作用。其作用机理可能是苦菜黄酮降低了血清中谷草转氨酶、谷丙转氨酶的活力,降低了甘油三酯、总胆固醇、肝脏丙二醛、白细胞介素-1β等的含量;提高了谷胱甘肽含量和肝脏超氧化物歧化酶活力,抑制了肝脏肿大的程度。
程梁华[1]等研究发现苦菜总黄酮对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制效果明显,对两种酶的抑制率分别为50%和40% 左右。说明苦菜总黄酮降血糖作用比较好。
刘仰斌[15-16]等研究发现苦菜总黄酮对血脂有调节作用。以高脂血症和去除卵巢的小动物为研究对象,发现苦菜总黄酮有抗动脉粥样硬化的效果;苦菜黄酮对血脂代谢异常也有调节作用,显示类雌激素-戊酸雌二醇的功效,可以通过调节血脂水平而减少因肥胖导致心血管疾病的发生。
刘仰斌[17]和卢新华[18]等研究苦菜总黄酮对心、脑的保护作用。以脑缺血缺氧的小动物为研究对象,用不同剂量的苦菜总黄酮灌注后发现心、脑组织的丙二醛和一氧化氮的含量降低了,超氧化物歧化酶活性提高了。说明苦菜总黄酮对急性缺血缺氧小鼠的心和脑保护效果明显,且黄酮剂量越大,保护效果越好。
中国苦菜资源非常丰富,分布十分广泛,药效作用明显,所以要好好开发利用。随着苦菜产地不同,部位不同,总黄酮的提取工艺、测定及纯化方法也都不同, 所以研究人员要根据实际情况选择不同的工艺,或者更进一步研究更好的提取、纯化工艺,以期得到含量更高、纯度更高的苦菜总黄酮。苦菜总黄酮作为食品添加剂的应用还比较少,药理作用研究大部分也只是在小动物实验上,为了更好的利用苦菜总黄酮的药效,以后应该多一点研究在食品保健和临床实验方面。