不同方法提取香叶树叶挥发性成分的GC-MS分析

罗维巍，吕琳琳，孙丽阳，刁全平

（鞍山师范学院化学与生命科学学院，辽宁 鞍山 114005）

香叶树（LinderacommunisHemsl）为樟科常绿灌木或小乔木植物，俗名香果、红果、臭油果等。香叶树在广西省各地均有分布，尤其在西南部地区分布极为普遍[1]。香叶树的树皮、树叶均可入药，味涩微苦，性温，具有祛风、散热、杀虫、生肌、消炎等功效，可治疗疮疥、外伤出血、骨折、跌打损伤及支气管炎等[2，3]。香叶树的叶片和果实还可提取芳香油。香叶树叶挥发性成分提取的国内文献报道不多，目前，只有水蒸气蒸馏法、固相微萃取法以及超临界萃取方法对香叶树叶挥发性成分提取的相关报道[1，2，4，5]。本实验采用水蒸气蒸馏-萃取和同时蒸馏-萃取的方法对香叶树叶挥发油进行提取，并对这2种方法提取的挥发性成分进行对比[6，7]，同时，应用GC-MS法测定各成分的相对百分含量，为全面了解香叶树叶的挥发性成分，更好地开发利用这一重要植物资源提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料、仪器与试剂

香叶树叶购于鞍山中药房，产自广西壮族自治区，经鞍山师范学院张福维副教授鉴定为香叶树叶。

气相色谱-质谱联用仪（HP6890GC/5973MS，美国惠普公司）；RE-52C型旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；无水硫酸钠、无水乙醚（上海国药试剂集团，分析纯）。

1.2 提取方法

1.2.1 水蒸气蒸馏-萃取法[7]准确称量剪碎的香叶树叶样品20.00g，将其放到烧瓶中，加400mL的蒸馏水将样品浸泡12h，水蒸气提取6h，再用重蒸过的乙醚萃取蒸馏液，萃取液用无水硫酸钠干燥脱水，旋转蒸发除去乙醚，得到淡黄色透明液体2.33g，即为香叶树叶的挥发油，计算收率为11.65%。

1.2.2 同时蒸馏-萃取法[7]准确称量剪碎的香叶树叶样品20.00g，将其放到1L的圆底烧瓶中，加400mL的蒸馏水，同时蒸馏-萃取4h，一端100℃蒸馏，另一端40℃萃取。蒸馏液用无水硫酸钠干燥脱水，旋转蒸发除去乙醚，得到淡黄色透明液体2.30g，即为香叶树叶的挥发油，计算收率为11.50%。

1.3 气相色谱-质谱测定条件

1.3.1 气相色谱条件 色谱柱：HP-5弹性石英毛细管柱（25 0.25mm 0.25m）；程序升温：初始温度50℃，以5℃/min升到230℃；进样口温度：250℃；进样量：0.2L；溶剂延迟：3min；载气：He气；载气流量：1mL/min；分流比：20∶1。

1.3.2 质谱条件 离子源：电子轰击（E1）；离子源温度：200℃；电子能量：70eV；发射电流：34.6A；电子被增器电压：1 200V；接口温度：230℃；质量扫描范围：m/z20～500。

1.4 分析方法

分别取水蒸气蒸馏-萃取法和同时蒸馏-萃取法提取的香叶树叶挥发油各0.2L，用气相色谱-质谱联用仪进行分析鉴定。通过G1701BA化学工作站处理得到总离子流图，检索NIST98标准谱图库并结合查阅文献和人工解析，确定样品中各个化学成分。通过G1071BA化学工作站处理数据系统按峰面积归一化方法积分，得到各化学成分在各自挥发油中的相对百分含量。

2 结果分析与讨论

2.1 挥发油的总离子流图

按“1.3”项下测定方法进行测定，2种方法提取香叶树叶挥发油的总离子流图见图1、图2。

图1 水蒸气蒸馏-萃取法提取香叶树叶挥发油的GC-MS总离子流图Fig.1 TIC of essential oil in leaves of Lindera communis Hemsl by DSE method

图2 同时蒸馏-萃取法提取香叶树叶挥发油的GC-MS总离子流图Fig.2 TIC of essential oil in leaves of Lindera communis Hemsl by SDE method

2.2 化学成分鉴定结果

2种方法提取香叶树叶挥发油中化学成分及各种化学成分在挥发油中的相对百分含量结果见表1。

表1 香叶树叶挥发油中成分的GC-MS分析结果Table 1 Analysis chemical constiuent of essential oil in leaves of Lindera communis Hemsl by GC-MS

续表1

续表1

2.3 结果讨论

由“2.1.1”、“2.1.2”项下可知，水蒸气蒸馏-萃取法收率为11.65%、蒸馏-萃取法收率为11.50%。

由表1可知，水蒸气蒸馏-萃取法提取香叶树叶挥发油，鉴定出 34种化合物，占挥发油总量的92.34%，其主要成分桉树脑和1-甲基-4（-1-甲基亚乙基）-环己烯占挥发油总量的51.30%。同时蒸馏-萃取法提取香叶树叶挥发油，鉴定出39种化合物，占挥发油总量的93.39%，其主要成分桉树脑和1-甲基-4（-1-甲基亚乙基）-环己烯占挥发油总量的44.91%。水蒸气蒸馏-萃取法比同时蒸馏-萃取法得到挥发油的产率高，但是鉴定出的化合物种类没有同时蒸馏-萃取法多。

从表1可以看出，2种方法提取香叶树叶挥发油共同含有28种成分，其中主要成分为 -水芹烯、桉树脑、3，7-二甲基-1，6-辛二烯-3-醇、4-甲基-1（-1-甲基乙基）3-环己烯-1-醇、（+）--松油醇（P-甲基-1-烯-8-醇）、6，6-二甲基-双环[3.1.1]庚-2-烯-2-甲醇、1-亚甲基-4-（1-甲基乙基）-环己烷、1-甲基-4（-1-甲基亚乙基）-环己烯、丁子香酚、氧化石竹烯等，其中，含量最多的是桉树脑、4-甲基-1（-1-甲基乙基）-3-环己烯-1-醇和1-甲基-4（-1-甲基亚乙基）-环己烯，特别是桉树脑，它的含量分别占到39.82%和33.00%。桉树脑是植物精油的主要成分，也是宝贵的可再生资源，其衍生物被广泛应用于农药、医药等行业。很多研究都表明，桉树脑具有除草、杀菌、消炎、杀虫等功能[8]；1-甲基-4（-1-甲基亚乙基）-环己烯别名-异松油烯，可用于工业塑料、精细化学品和专用化学品的中间体[9]；-蒎烯具有较强的抗菌、抗病毒、抗炎作用-蒎烯还对昆虫具有引诱和毒杀作用；-石竹烯具有抗炎、平喘、镇咳、祛痰、抗肿瘤作用[2]。

[1]杨得坡，王发松，任三香，等.香叶树叶精油的GC-MS分析与抑菌活性[J].中药材，1999，22(3):128-131.

[2]陈佳龄，郭微，彭维，等.SPME-GC-MS分析香叶树叶的挥发性成分[J].光谱实验室，2013，30(1):105-107.

[3]王发松，杨得坡，任三香，等.香叶树果挥发油的化学成分和抗菌活性研究[J].天然产物研究与开发，1999，11(6):1-5.

[4]罗凡，费学谦，车运舒，等.香叶树挥发油、油脂等主要成分分析[J].林业科学研究，2015，28(2):284-288.

[5]佟健.香叶中挥发性组分的超临界萃取及气相色谱-质谱分析[J].质谱学报，2006，27(2):94-98.

[6]刁全平，侯东岩，回瑞华，等.马莲叶挥发油成分气相色谱-质谱分析[J].特产研究，2013，35(1):62-65.

[7]罗维巍，吕琳琳，孙丽阳，等.不同方法提取郁金挥发油成分的 GC-MS 分析[J].特产研究，2016，38(3):58-62.

[8]叶增发，赵俊杰，吴盼盼，等.羟基桉树脑及其衍生物的合成和生物活性的研究进展[J].轻工科技，2017，218(1):38-40.

[9]李健，陆占国，吉村吉博，等.松油烯与马来酸酐的环加成反应的条件研究[J].林产化学与工业，2006，26(9):93-96.