HPLC法检验骨刺消痛胶囊中非法添加西药吡罗昔康的探讨

(平顶山市食品药品检验所，河南 平顶山 467000)

抗风湿类的药物中经常被不良商家添加非法的西药成分，通常非法添加的药品主要分两大类[1-2]，分别是抗炎镇痛类的西药(吡罗昔康、布洛芬、奥沙普嗪等)、激素类西药(磷酸地塞米松、强的松等)。患者如果长期服用这些非法添加的药品，会误以为该药品有长期的疗效，能很好的缓解自己的症状，但实际会造成药源性疾病[3]。为了有效控制制剂的质量，打击假药，保障百姓的生命财产安全，笔者对骨刺消痛胶囊采用HPLC法检测非法添加西药吡罗昔康的含量，取得了不错的检验结果。

1 材料和方法

1.1仪器与药品 使用的仪器为：岛津LC-2010HT高效液相色谱工作站；采用TU-1901可见-紫外分光光度计做为普析所用的仪器；高效液相色谱-质谱联用使用的是安捷伦公司的1100 Series和6320Lon Trap LC/MS。试药：吡罗昔康标准对照品由中国药品生物制品检定所供给，采用西安太极药业有限公司的吡罗昔康作为抽检产品。冰乙酸为优级纯，乙腈选用的是色谱级纯度的，其他试剂均为分析纯，水为超纯水。

1.2方法

1.2.1色谱条件 采用岛津公司的Shim-pack C18色谱柱进行检验，将检测波长设置为243 nm，使用60∶40的乙腈-0.5%的冰乙酸作为流动相。

1.2.2对照品溶液的制备 准确称量5 mg的吡罗昔康标准对照品，于50 ml的容量瓶中加入上述高效液相色谱的流动相作为溶剂，辅以超声使其完全溶解，冷却至室温后加入上述流动相溶液定容至刻度线，充分摇匀待用。

1.2.3试样溶液的配制 将上述抽检品使用研钵研细，准确称量300 mg的上述物质于50 ml的容量瓶中，加入上述高效液相色谱的流动相作为溶剂使其完全的溶解，冷却至室温后加入上述流动相溶液定容至刻度线，充分摇匀待用。

1.2.4线性关系考察 取0.1068 mg/ml的吡罗昔康对照品储备液，用流动相溶液稀释成以下各种浓度的溶液：1.068、5.34、10.68、16.02、26.70、53.40μg/ml，每种浓度吸取10μl进行高效液相的分析，每个浓度进样3次，取3次的平均值，纵坐标为峰面积，横坐标为浓度，做线性图。

1.2.5精密度试验 将试样溶液照上述方法，用高效液相色谱仪依法测定，连续进样6次，进行试验。

1.2.6重复性试验 取6份抽检品，每份约0.3 g，精密称定，参照“1.2.5”的方法，独立试验。

1.2.7稳定性试验 取试样溶液参照“1.2.5”的方法，考察0、2、5、8、12、24 h峰面积值的变化，RSD=0.40%。

1.2.8阴性回收率试验 准确称取按骨刺消痛胶囊处方的6份阴性样品细粉(每份约0.15 g)，分别加入吡罗昔康对照品，参照“1.2.5”的方法，独立试验。

1.2.9加样回收试验 准确称取已知含量的骨刺消痛胶囊处方和制法制备的6份样品细粉(每份约0.15 g)，分别加入吡罗昔康对照品，参照“1.2.5”的方法，独立试验。

2 结果

2.1线性关系考察 所得的线性回归方程为：

Y=7.1242×104X+6.0993×103，r2=1

结果表明，吡罗昔康有着较好的线性关系。

2.2精密度试验 结果表明精密度良好，RSD=0.13%。

2.3重复性试验 平均含量为21%，RSD=1.18%，表明重复性良好。

2.4稳定性试验 测定结果表明，在24 h内，供试品溶液中吡罗昔康的含量基本稳定，说明该方法稳定性良好。

2.5阴性回收率试验和加样回收试验 阴性回收率试验和加样回收试验的平均回收率为98.7%，RSD=2.1%。结果进一步证明采用本法检定该类中成药中含有吡罗昔康是可行的。西药吡罗昔康对照品的线性范围是1.068～53.40 μg/ml，r2=1，平均回收率为98.7%，RSD=2.1%。

3 讨论

取吡罗昔康对照品的流动相溶液，进行紫外扫描发现有两处吸收，参考文献选择了243 nm的波长[4-5]，采用岛津公司的Shim-pack C18色谱柱进行检验，使用60∶40的乙腈-0.5%的冰乙酸作为流动相，对骨刺消痛胶囊中非法添加西药吡罗昔康的含量进行检验。经一系列的线性关系考察、精密度试验、重复性试验、稳定性试验、阴性回收率试验和加样回收试验[6]。研究结果进一步证明，采用本法检定该类中成药中含有吡罗昔康是可行的。所得线性回归方程为：Y=7.1242×104X+6.0993×103，r2=1，结果表明，吡罗昔康有着较好的线性关系；精密度试验结果表明精密度良好，RSD=0.13%；重复性试验平均含量为21%，RSD=1.18%,表明重复性良好；稳定性试验结果表明，在24h内，供试品溶液中吡罗昔康的含量基本稳定，说明该方法稳定性良好；西药吡罗昔康对照品的线性范围是1.068～53.40 μg/ml，r2=1，平均回收率为98.7%，RSD=2.1%。

综上所述，采用HPLC法检验骨刺消痛胶囊中非法添加的西药吡罗昔康含量，简便高效，结果准确度高，且成本低廉，可以有效对制剂的质量进行控制，保障百姓的生命财产安全，值得在临床检验中推广应用。