不同病理类型结肠息肉与幽门螺杆菌之间的关系

李 东，赵卫东

1.滨州医学院临床学院(烟台校区)，山东 烟台 264000； 2.胜利油田中心医院消化内科

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)在世界各地普遍流行，其感染率在欧洲约20%，南美洲约60%，亚洲约50%[1]。研究[2]统计显示，2008年我国H.pylori感染率在城市为45.2%，农村为39%。H.pylori感染可能与结肠癌、结肠息肉的发病相关，但尚无定论。近年来，随着生活水平的提高，我国结肠息肉的发病率呈上升趋势，但其病因和发病机制尚不明确。ZUMKELLER等[3]就此对1991年至2002年的文献进行了首次Meta分析发现，H.pylori感染与结肠癌及结肠腺瘤性息肉的发病可能相关，OR值为1.4。SOYLU等[4]用免疫组化方法在结肠肿瘤中检测到了H.pylori的存在，这进一步印证了H.pylori与结肠息肉及结肠癌的发生可能有相关性。研究[5]显示，H.pylori感染与结肠息肉有相关性，但目前对于不同病理类型的结肠息肉与H.pylori感染之间是否有一定的关系，研究较少。本研究主要应用嗜银染色(Warthin-Starry，WS)法检测H.pylori感染情况，相对有非侵入性的呼气试验和快速尿素酶检测，WS染色法具有敏感性、准确性高，染出的H.pylori清晰度高的特点。应用χ2检验检测各组之间是否存在一定关系，从而进一步指导临床。

1 资料与方法

1.1一般资料收集2016年1月至2017年1月于胜利油田中心医院行结肠镜检查的患者180例，切除结肠息肉，标本经病理学诊断后分为3组，其中腺瘤性息肉60例，炎性息肉60例，增生性息肉60例，同时收集结肠镜检查阴性患者60例，经患者同意后取微量标本检测H.pylori感染情况作为对照组。所有患者均无家族性腺瘤性息肉病史，近4周未服用过抗生素、质子泵抑制剂或糖皮质激素、无H.pylori根除治疗史、长期(>1个月)口服NSAID和炎症性肠病及结肠癌病史，所有患者均没有放化疗及其他针对肿瘤的特殊治疗。

1.2方法

1.2.1 标本收集：采用Olympus CF-290电子结肠镜检查，对发现结肠息肉患者予以描述镜下息肉的部位、大小和数目，所有标本均经甲醛液体浸泡后送往病理科。

1.2.2 病理学组织检测：组织固定后测定直肠息肉的大小，由经验丰富的病理科医师行病理组织学检查确诊息肉病理类型，进一步分为腺瘤性息肉、炎性息肉、增生性息肉。

1.2.3H.pylori毒力菌株抗体检测：WS染色法试剂(硝酸银、明胶、对苯二酚)，TB-718生物组织包埋机，Leica ST5020全自动组织脱水机，Olympus bx51显微镜，Anymicro DSS图像采集系统。

1.2.4 WS染色法原理：利用生物组织成分对银离子的还原性质不同，借助含银离子显影液中对苯二酚的还原显影辅助作用，使不同组织部位银离子密度不同，从而显示从浅黄色到黑色不同的色彩，也显示出不同组织部位中微生物和异物的形态。由于H.pylori具有嗜银性，在一定条件下，H.pylori可以从银液中吸附银离子，后经孵育液中的显色剂处理，H.pylori内已吸咐的银离子被还原为黑色的金属银而显色。

1.2.5 WS染色法步骤：(1)取15 ml蒸馏水加入浸银液缸中，将脱蜡到水的石蜡切片用蒸馏水涮洗1次后放入染缸中，再分别取5 ml、10 ml的蒸馏水加入显影液粉1、2瓶中。将以上浸银液及显影液共置于60 ℃温箱中助溶(最少30 min)，完全溶解后取出备用；(2)将浸银液缸内的液体全部倒掉，蒸馏水涮洗2次；(3)将显影液1中液体倒入显影液2中，快速摇匀后加入到浸银液缸中显影1～5 min(以组织呈咖啡色为宜)；(4)倒掉显影液缸中的液体，蒸馏水涮洗2次；(5)脱水透明封片。

1.2.6 结果分析：光学显微镜下观察，组织细胞的细胞浆为浅黄色或浅灰色，细胞核呈黑褐色，组织纤维为黑色至棕黄色，H.pylori呈现细腻而清晰的黑色S形、杆状、海鸥状、螺旋状、球状、短棒状，聚居或散在出现。

1.2.7 细菌感染程度分级：H.pylori阴性：染色后样本组织内无待检细菌出现。H.pylori阳性：染色后样本组织黏膜上皮表层及腺腔内见待检细菌半定量如下：(+)轻度：黏膜上皮表层及腺腔内偶见阳性待检细菌；(++)中度：黏膜上皮表层及腺腔内可见散在的阳性待检细菌，未聚集成簇；(+++)重度：黏膜上皮表层及腺腔可见大量阳性待检细菌，聚集成簇或片[6]。

1.3统计学方法采用SPSS 20.0软件进行统计学分析，用Pearson和Fisher确切概率计算法行χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1各组基本特征及H.pylori感染情况统计发现，息肉组和对照组的性别、年龄相比，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。息肉组H.pylori感染率显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。

如表1所示，腺瘤性息肉组、对照组的H.pylori检出率分别为81.67%、26.67%，两组相比，差异有统计学意义(χ2=16.754，P<0.05)。

表1 腺瘤性息肉组与对照组一般资料及H.pylori感染情况比较Tab 1 Comparison of general data and H.pylori infection between the adenomatous polyp group and the control group

如表2所示，增生性息肉组、对照组的H.pylori检出率分别为51.67%、26.67%，两组相比，差异有统计学意义(χ2=4.787，P<0.05)。

如表3所示，炎性息肉组、对照组的H.pylori检出率分别为50.00%、26.67%，两组相比，差异有统计学意义(χ2=4.261，P<0.05)。

表2 增生性息肉组与对照组一般资料及H.pylori感染情况比较Tab 2 Comparison of general data and H.pylori infection between the hyperplastic polyp group and the control group

表3 炎性息肉组与对照组一般资料及H.pylori感染情况比较Tab 3 Comparison of general data and H.pylori infection between the inflammatory polyp group and the control group

2.2息肉亚组之间H.pylori感染率比较应用多样本计数资料方差分析比较各组之间的差异情况显示，腺瘤性息肉组H.pylori感染率(81.67%)明显高于增生性息肉组(51.67%)和炎性息肉组(50.00%)，差异有统计学意义(P<0.05)；而后两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。

3 讨论

1994年,H.pylori被世界卫生组织(WHO)列为胃癌一级致病因子，人群感染率约50%[7]。H.pylori感染现已成为一个全球性的问题，世界各国尤其是发展中国家感染率较大，平均感染率在50%以上。目前已证实，H.pylori感染与胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关组织淋巴瘤、胃癌等疾病的发生、发展相关。而对于H.pylori感染与结肠息肉及结直肠癌的发病是否相关一直存在争议。

近年来，随着生活水平的提高，我国结肠息肉、结肠癌的发病率也呈上升趋势，越来越趋向于年轻化，因此，在临床中对于结肠息肉、结肠癌的研究迫在眉睫。H.pylori感染可能导致结肠息肉甚至结肠癌，主要是与胃泌素及环氧合酶2(Cyclooxygenase，COX-2)有关[8-10]。COX-2作为肿瘤相关基因，40%～90%的结肠腺瘤性息肉和90%结肠癌患者均存在COX-2的高表达。SOYLU等[4]用免疫组化方法在结肠肿瘤中检测到了H.pylori的存在，这印证了H.pylori与结肠息肉及结肠癌的发生可能有关联性。目前已有研究[11-12]表明，H.pylori感染可能与结肠腺瘤及结肠癌的发病有关，结肠癌的演化过程一般表现为“正常肠上皮→微小腺瘤→早期腺瘤→中期腺瘤→后期腺瘤→腺癌”，整个过程一般需5～15年，有研究[13]显示，腺瘤性息肉转变为结肠癌的癌变率为1.4%～9.4%。近年来，H.pylori与结肠息肉的研究有了新的进展，显示了结肠腺瘤性息肉患者的H.pylori感染率高，认为H.pylori的感染增加了结直肠腺瘤和腺癌的风险，增加了结肠癌发生的危险性，促进了肠黏膜增生。结肠腺瘤性息肉-结肠腺癌关系轴显示它们之间的密切关系，研究结肠息肉发生的原因及危险因素，有助于结肠癌的预防和筛查，从而为临床建议一个个体化的预防策略。

结肠息肉按病理学类型主要分为腺瘤性、炎性、增生性。对于这三种病理学类型息肉之间是否与H.pylori感染存在相关性，目前研究很少。以前的临床研究多数是采用非侵入性的检测方法(如尿素酶呼气试验、血清H.pylori抗体)或侵入性方法(活检胃黏膜组织作快速尿素酶试验或特殊染色)，主要是针对胃H.pylori感染情况的研究，没有直接证据证明H.pylori定植于肠黏膜。国内的CHENG等[14]比较结直肠腺瘤性息肉组儿童与正常对照组儿童的H.pylori感染率，对肠活检标本进行免疫组化染色分析，结果显示，两组H.pylori检出率差异有统计学意义，提示H.pylori感染可能是结直肠腺瘤的一个危险因素。国外的SOYLU等[4]也运用免疫组化的方法，在结直肠腺瘤性息肉标本中检测出H.pylori，并发现腺瘤组的H.pylori感染率比正常对照组要高，但统计学分析显示两者差异无统计学意义。上述研究证明了H.pylori确实可以在肠黏膜上定植，这为H.pylori可能是与肠黏膜通过局部作用诱发结直肠癌发生的理论提供了依据。本研究采用WS染色法直接检测肠黏膜H.pylori感染率，进一步证实H.pylori感染与腺瘤性息肉存在相关性。从而证实简便的H.pylori根除治疗就可降低腺瘤性息肉的发生率进而降低大肠癌的发病风险，从而减少结肠癌的发生，降低诊治成本，为腺瘤性息肉及结肠癌的防治带来一种全新的方法。

综上所述，H.pylori感染与腺瘤性息肉、增生性息肉及炎性息肉之间存在相关性，而腺瘤性息肉相对于炎性息肉、增生性息肉与H.pylori感染情况关系更为密切。腺瘤性息肉是结肠癌前病变的最常见形式，因此可推断，在临床中根除H.pylori感染对于预防腺瘤性息肉、结肠癌有一定作用。因标本数量有限，对于病理诊断为增生性息肉及炎性息肉的患者，虽然数据显示与H.pylori感染存在相关性，但远低于腺瘤性息肉，临床中仍需进一步大量的临床数据进行验证。

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