DNA倍体检查和液基细胞学筛查宫颈上皮内瘤变比较

杨颖谕，李生强，张建坤，罗贤勇

(云南省曲靖市第一人民医院病理科 655000)

宫颈癌是女性发病率和病死率最高的恶性肿瘤之一，仅次于乳腺癌[1]。我国是宫颈癌发病率和病死率较高的国家之一，为降低宫颈癌对我国女性健康造成的严重危害，我国卫生部于2009年起将筛查乳腺癌、宫颈癌疾病纳入全民公共卫生服务项目，并在农村部分县区开展“两癌筛查”项目；同时不同级别医院也逐渐开展了宫颈癌筛查，至今已经取得了显著成效[2]。目前，临床常采用的宫颈癌筛查方法包括：巴氏涂片、液基细胞学检测(TCT)、高危型人乳头瘤病毒(HPV) DNA检测等，不同方法各有优缺点，适于不同级别和经济条件地区开展[3]。DNA倍体技术是近年来发展起来的一种新型宫颈上皮的瘤变(CIN)筛查技术[4-5]，本研究将其与TCT在CIN筛查中的价值进行比较，现将报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2016年1-10月来本院进行宫颈癌筛查者5 291例，年龄24～58岁，纳入标准：(1)无子宫切除史和妇科恶性肿瘤，无骨盆放射治疗史；(2)无怀孕征象；(3)无全身系统性疾病；(4)患者知情同意且签署知情同意书。该研究经本院伦理委员审核批准进行。

1.2方法

1.2.1标本采集 每位受试者均由受过专业培训的医师进行宫颈脱落细胞取样，将宫颈采样刷插入宫颈口1.0～1.5 cm，直到刷子最外圈接触到外宫颈逆时针方向，旋转3圈，停留10 s，将刷子底部放到转移管中，在划线处折断杆子，将整个刷子留在转移管中。

1.2.2TCT检查 采用液基细胞制片检测系统对采集的宫颈脱落细胞标本进行检查，共制片6张，均进行95%乙醇固定，2张进行巴氏染色，由本院病理科医师进行细胞学阅片。TCT阳性判断标准大于或等于非典型鳞状上皮细胞(ASCUS)。

1.2.3DNA倍体检查 取2张95%乙醇固定的TCT片进行Feulgen染色，采用Motic-savant细胞DNA定量分析系统(麦克奥迪实业集团有限公司)进行自动DNA倍体检查，通过Accell全自动细胞图像分析系统对细胞进行图像分析，自动记录所有视野每个细胞核DNA含量及其全细胞形态，阳性细胞自动标记，通过软件分析扫描数据中各类别细胞核DNA含量的变化。DNA倍体检查结果判断标准：以5c作为判断异倍体的标准，将DNA含量超过5c的细胞数目称为5cER，出现任一5cER即认为阳性。

1.2.4阴道镜检查及活检 电话召回所有TCT阳性和(或)DNA倍体阳性的妇女进行阴道镜检查。若阴道镜结果正常，进行四象限活检取样；若阴道镜结果异常，于病变最为严重部位取样；阴道镜检查不满意时行宫颈管刮除术。活检组织由本院病理科负责制片和诊断。

1.2.5评价标准 以病理学结果为诊断标准，评价DNA倍体检查和TCT检查在宫颈癌筛查中的准确性。

1.3统计学处理 采用SPSS19.0软件进行数据统计分析，计数资料以率表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1TCT与DNA倍体检查结果比较 5 291例受检妇女中TCT阳性489例(9.24%)；DNA倍体检查发现异常细胞579例(10.94%)，其中1～2个异常细胞376例，>2个异常细胞203例。DNA倍体检查阳性率明显高于TCT(χ2=8.436，P=0.004)。TCT和(或)DNA倍体检查阳性受检者共651例，均行活检。

2.2TCT与组织病理学检查结果情况 651例行组织活检病理检查患者中，炎性改变184例(28.26%)、CINⅠ368例(56.53%)、CIN Ⅱ～Ⅲ84例(12.90%)、宫颈癌15例(2.31%)。489例TCT阳性受检者中，共有356例(72.80%)为CIN患者；162例TCT阴性受检者中有111例(68.52%)为CIN患者，其中1例TCT阴性受检者经病理学检查确诊为宫颈癌，见表1。

表1 TCT与组织病理学检查结果[n(%)]

2.3DNA倍体检查与组织病理学检查结果情况 579例DNA倍体检查阳性受检者中，共有403例(69.61%)为CIN患者，72例DNA倍体阴性受检者中有64例(88.89%)为CIN患者，见表2。

表2 DNA倍体检查与组织病理学检查结果比较[n(%)]

2.4TCT、DNA倍体检查与组织病理学检查符合率比较 TCT与组织病理学诊断结果符合率为54.69%(356/651)，DNA倍体检查结果与组织病理学诊断结果符合率为61.91%(403/651)，二者比较差异有统计学意义(P<0.05)，且DNA倍体检查无宫颈癌漏诊病例。

3 讨 论

随着宫颈癌发病率和病死率不断升高，以及女性自身和社会对女性健康水平关注程度的不断提高，使得近年来宫颈癌早期筛查成为妇科肿瘤中最为关注的研究。宫颈癌筛查技术目前主要包括巴氏涂片、TCT和高危型HPV DNA检测，其中以TCT应用最为广泛也最为成功[6]。相较于传统巴氏涂片，TCT细胞数量更多，制片效果更好，阳性检出率更高。但与巴氏涂片相同的是，TCT仍旧受到阅片医师主观因素的影响，包括经验、疲劳程度等，因此造成较高的假阳性和假阴性结果[7]。本研究中，489例TCT阳性者中有356例(72.80%)为CIN患者；162例TCT阴性者中有111例(68.52%)为CIN患，其中1例TCT检查阴性受检者经病理学检查确诊为宫颈癌。

细胞癌变的本质是细胞无限制增殖，细胞一旦转变为癌细胞或者处于向癌细胞过渡时期，其染色体DNA的结构和数量均发生异常改变，发生DNA数量增加，倍体异常[8-9]。宫颈脱落细胞DNA倍体检查就是通过对宫颈脱落细胞细胞核中的DNA进行定量分析，在细胞发生形态学变化前检测出发生癌变或者有癌变倾向的细胞[10]。目前，DNA倍体技术已经在国外宫颈癌早期筛查中获得广泛应用[11-12]。本研究中，579例DNA倍体检查阳性者中有403例(69.61%)为CIN患者，72例DNA倍体阴性者中有64例(88.89%)为CIN患者。DNA倍体检查结果与组织病理学诊断结果符合率为61.91%(403/651)。本研究结果显示DNA倍体检查阳性率明显高于TCT(10.94%vs.9.24%，P<0.05)，DNA倍体检查与活检组织病理学诊断符合率明显高于高于TCT(61.91%vs. 54.69%，P<0.05)，且无宫颈癌漏诊病例。

由于DNA倍体技术能够在细胞形态学改变前发现异常改变，且通过计算机软件进行自动分析，不受医生主观因素影响，也无需考虑工作量，相较于TCT具有更明显优势，可在病理医师缺乏地区鼓励应用[13]。但也应该注意到，DNA倍体对CIN患者检出率及其与病理学诊断结果符合率仍相对较低，还需要进一步改进。

综上所述，DNA倍体技术能够及早检测宫颈脱落细胞异常变化，检出率和与病理学诊断结果符合率较高，具有较好的应用价值。

[1]乔友林,赵宇倩.宫颈癌的流行病学现状和预防[J/CD].中华妇幼临床医学杂志(电子版),2015,11(2):1-6．

[2]陈春林.宫颈癌筛查在中国[J].中国实用妇科与产科杂志,2016,32(5):393-394.

[3]乔友林，李静．子宫颈癌筛查方法新进展[J]．医学研究杂志，2009，38(11)：3-4,110．

[4]郝云涛,郑小影,赵利兵,等.机会性宫颈癌筛查中DNA倍体分析的价值[J].广东医学,2016,37(19):2934-2936.

[5]余秀荣，刘勇，王旭，等．细胞DNA倍体定量分析技术在宫颈癌普查中的应用价值[J]．诊断病理学杂志，2011，18(4)：289-292．

[6]邢慧云，周冰．液基薄层细胞学检测法与传统巴氏涂片法对宫颈癌筛查的准确性比较[J]．中国妇幼保健，2014，29(7)：1113-1115．

[7]李玉霞，宋晓婕，陈莉，等．宫颈癌筛查中高危型HPV及液基细胞学联合应用的临床价值[J]．中国妇幼保健，2015，30(3)：479-481．

[8]林丹，罗新，蒋学风，等．DNA倍体分析联合高危型人乳头瘤病毒检测筛查宫颈病变[J]．实用妇产科杂志，2014，30(7)：531-534．

[9]唐燕,余龙.尿路上皮癌诊断中DNA倍体分析和尿脱落细胞学检查的临床价值[J].临床与实验病理学杂志,2015,31(6):636-639.

[10]张雪梅，覃福宁，孙奇．宫颈DNA倍体分析及TCT在宫颈病变早期筛查中的临床意义[J]．重庆医学，2016，45(14)：1974-1976．

[11]GARNER D.Clinical application of DNA ploidy to cervical cancer screening:a review[J].World J Clin Oncol,2014,5(5):931-965.

[12]NGHIEM V T,DAVIES K R,BECK J R,et al.Economic evaluation of DNA ploidy analysis vs liquid-based cytology for cervical screening[J].Br J Cancer,2015,112(12):1951-1957.

[13]闫振宇,张子杰,高鹏,等.DNA倍体分析在脱落细胞学及宫颈癌早期诊断中的应用价值[J].中国妇幼保健,2015,30(21):3732-3734.