广西河池市鸡球虫抗药程度研究

谢 婷，廖安翠，刘杰标，唐海燕，曾永姿，韦 瑛，韦喜梅，陈进喜

（1. 河池市动物疫病预防控制中心，广西河池 547000；2. 河池市水产畜牧科教站，广西河池 547000；3. 钦州市动物卫生监督所，广西钦州 535099；4. 钦州市动物疫病预防控制中心，广西钦州 535099）

在饲料中添加抗球虫药仍是目前最常用的预防鸡球虫病的方法。但是，由于球虫抗药性的产生，鸡球虫病防治效果不佳，甚至是失败。抗球虫药使用年限的逐渐缩短，导致鸡球虫临床或亚临床感染逐渐加重，造成的经济损失越来越大。因此，球虫抗药性问题已成为所有防治鸡球虫病对策中较严重的问题之一。合理选择和正确使用抗球虫药能够有效避免或延缓抗药性的产生，减少经济损失。陈丽凤等[1]、肖寒等[2]、韦圆圆[3]、李亚林[4]分别对河北省秦皇岛市、安徽省部分地区、广西部分地区和湖北省不同地区的鸡球虫抗药性进行了研究，发现球虫抗药性普遍存在。河池市是经济欠发达地区。该地绝大部分养殖户的动物疫病防治意识滞后，经常单一、重复使用某一种抗球虫药。这常会导致球虫病的暴发，造成严重经济损失。目前尚未有对河池市鸡球虫抗药性研究的报道。本研究从河池市采集样品，分离鸡球虫混合虫株，并从市场上选购常用的抗球虫药，采用鸡体试验法，对抗球虫药的疗效进行综合测定，分析评价其疗效，从而指导生产中正确选择和使用抗球虫药。

1 材料与方法

1.1 试验药物

地克珠利溶液：含0.5%地克珠利；郑州百瑞动物药业有限公司生产；批准文号为兽药字（2015）160672045。每1 L 水混 0.5～1 mg。

磺胺喹噁啉钠可溶性粉（商品名球扫）：浙江道格凯特实业有限公司生产；批准文号为兽药字（2012）110431624。每1 kg饲料混0.5 g。

盐酸氯苯胍（商品名鸡兔血痢康）：四川通达动物保健科技有限公司生产；批准文号为兽药添字（2015）220171377。每1 kg饲料混0.3～0.6 g。

1.2 供试鸡只及饲养管理

广西本地三黄鸡：购自南宁正大畜牧有限公司。出壳后运回，无球虫环境下饲养，饲喂常规雏鸡自配料；14日龄时，粪检球虫卵囊，选取优良阴性雏鸡，供试验用。

1.3 球虫混合卵囊

采自河池市辖区内的8个鸡场。按照常规方法收集培养球虫混合孢子化卵囊（主要包含柔嫩艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫、堆形艾美耳球虫、巨形艾美耳球虫和和缓艾美耳球虫5个种）。

1.4 试验设计

试验雏鸡养至15日龄时，从中选择健康、体重相近、粪检球虫卵囊呈阴性的鸡只，随机分为5组，即空白对照组、感染对照组、盐酸氯苯胍组、地克珠利组和磺胺喹噁啉钠组，每组30羽，单笼隔离饲养。称重后，除空白对照组外，对其他试验组鸡只口服球虫混合孢子化卵囊1.2×105个/羽。同时，对3个药物组按照各自的使用说明饲喂抗球虫药，直至试验结束。感染5～8 d后，每天分两次收集粪便并称重，用麦克马斯特虫卵计数法计算各组每克粪便的卵囊数（OPG）。感染8 d后，将各试验组鸡只称重后，逐只剖杀，进行肠道病变记分和卵囊计数。

1.5 抗药性评价指标

抗药性评价指标主要有相对卵囊产量（Relative oocyst production，ROP）、病变记分减少率（Reduction of lesion scores，RLS）、 最 适 抗 球虫活性百分率（Percent of optimum anticoccidial activity，POAA）、 抗 球 虫 指 数（Anticoccidial index，ACI）[5-6]。

1.5.1 相对卵囊产量 ROP=（感染给药组平均卵囊产量/感染不给药组平均卵囊产量）×100%。ROP≥15%为抗药阳性；ROP＜15%为抗药阴性。

1.5.2 病变记分减少率 按照Johnson等[7]的方法，对盲肠进行病变记分。两侧盲肠病变不一致时，以严重的一侧为准。RLS=[（感染不给药组平均病变记分-感染给药组平均病变记分）/感染不给药组平均病变记分]×100%。RLS≤50%为抗药阳性；RLS＞50%为抗药阴性。

1.5.3 最适抗球虫活性百分率 POAA=[（感染给药组GSR-感染不给药组GSR）/（不感染不给药组GSR-感染不给药组GSR）]×100%；GSR=笼末重/笼初重。POAA≤50%为抗药阳性；POAA＞50%为抗药阴性。

1.5.4 抗球虫指数 ACI=（存活率+相对增重率）×100-（病变值+卵囊值）。其中，存活率=（组内存活只数/组内总鸡数）×100%；相对增重率=（感染给药组或感染不给药组平均增重/不感染不给药组平均增重）×100%；病变值=组内平均病变记分×10。卵囊值换算方法：ROP为0～l%，卵囊值为0；ROP为l%～25%，卵囊值为5；ROP为26%～50%，卵囊值为10；ROP为5l%～75%，卵囊值为 20；ROP为 76%～100%，卵囊值为40。ACI≥160为抗药阴性；ACI＜160为抗药阳性。

1.5.5 抗药性综合判定标准 运用ROP、RLS、POAA、ACI 4项指标综合判定抗药程度。无抗药性（Sensitive）：4项指标均为阴性；轻度抗药（Light resistant）：4项指标中有3项指标为阴性；中度抗药（Middle resistant）：4项指标中有2项指标为阴性；完全抗药（Complete resistant）：4项指标中有3项及3项以上指标为阳性。

2 结果与分析

2.1 抗药性测定

各组的相对增重率因受球虫影响都有所降低，其中盐酸氯苯胍组的相对增重率最低；3个药物试验组均有较高的卵囊值，除磺胺喹噁啉钠组为20外，其余2组均为40；受抗球虫药影响，各试验组的病变值都不太高。各试验组鸡的相对增重率、存活率、卵囊值及病变值等情况见表1。

表1 河池市鸡球虫抗药性测定结果

2.2 抗药性综合判定

运用ROP、RLS、POAA、ACI 等4项指标进行鸡球虫抗药性综合判定发现：磺胺喹噁啉钠组2项指标阳性，2项指标阴性；地克珠利组3项指标阳性，1项指标阴性；盐酸氯苯胍组4项指标均为阳性。分离的鸡球虫对磺胺喹噁啉钠中度抗药，对盐酸氯苯胍和地克珠利完全抗药（表2）。

表2 河池市鸡球虫抗药性综合判定结果

3 讨论

从20世纪40年代开始，人们就一直在寻找和使用有效药物对鸡球虫病进行预防。目前仍在应用的抗球虫药有20余种，可大致分为离子载体和化学合成两大类[8]。盐酸氯苯胍、地克珠利和磺胺喹噁啉钠均属于常用的化学合成类抗球虫药。但不管是哪一类的抗球虫药，在经过一段时间的使用后，都会不可避免地产生抗药性。国内外大量的研究事实亦证明了这一点[9-11]。

既然球虫抗药性的产生不可避免，那么定期对市场上的抗球虫药进行抗药性测定，指导养殖户合理选择抗球虫药，克服用药的盲目性，减少经济损失，便显得尤为重要。判定抗药性的指标和标准并不相同。目前运用得较多的是黄兵等[12]的方法，即用ROP、RLS、POAA、ACI 4项指标进行综合判定。这4项指标涉及的数据较为全面，可以相互补充，相互校正，从而可提高球虫抗药性判定的准确性[3]。

在生产实践中，市场导向在鸡球虫病的有效防治上亦占据着相当重要的位置。本研究在选定药物时发现，辖区内兽药店正在销售的球虫药几乎都是本试验选定的这几种，不同的仅仅是兽药的生产厂家和商品名。市场有限的药物可选性和养殖户专业知识的匮乏，导致出现球虫病防治效果不佳或失败亦是必然。但是也不难发现，一些球虫疫苗和中草药产品正逐渐进入市场。相对于球虫活疫苗不易保存、毒力易返强等缺点[13]，中草药却因其毒副作用小、药物残留低、对环境友好等特点而备受世人关注[14]。中草药虽然起效慢，治疗期长，在治疗鸡球虫病过程中受到了限制，但一些学者在研究中发现，中西药配伍不但可以减少西药的剂量，还能够增强疗效，促进机体生长发育，提高养鸡业经济效益[15]。因此，养殖户在选购抗球虫药时，可以考虑将中草药产品和西药产品进行适当配伍使用。

4 结论

本研究结果表明，河池市分离的鸡球虫对磺胺喹噁啉钠中度抗药，对盐酸氯苯胍和地克珠利完全抗药。建议选购其他类的抗球虫药进行鸡球虫病防治，并注意轮换用药；有条件的场可先进行抗药性实验，然后选择有效药物进行防治。此外，将中草药和西药进行适当配伍使用，也是一种不错的选择。这样可以减少西药用药剂量，增强抗球虫疗效。

[1] 陈丽凤，李蕴玉，李佩国，等. 秦皇岛地区鸡球虫抗药性研究[J]. 黑龙江畜牧兽医，2002，12：2-4.

[2] 肖寒，李培英，汪兴生，等. 安徽部分地区鸡球虫对六种药物的抗药性研究[J]. 安徽科技学院学报，2008，22（1）：5-8.

[3] 韦圆圆. 广西部分地区鸡球虫耐药性的研究[D]. 南宁：广西大学，2012.

[4] 李亚林. 湖北省不同地区柔嫩艾美耳球虫的抗药性调查[D]. 武汉：华中农业大学，2014.

[5] 孔繁瑶，宁长坤，殷佩云. 15株柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）对五种抗球虫药的抗药性调查研究[J]. 北京农业大学学报，1994，20（3）：302-307.

[6] 甘德培，汪明，龙光宗，等. 柔嫩艾美耳球虫对四种抗球虫药的交叉抗药性试验[J]. 中国兽医寄生虫病，1999，7（1）：12-14

[7] JOHNSON J，REID W M. Anticoccidial drugs：Lesion scoring techniques in battery and floorpen experioments with chickens[J]. Exp.parasital，1970，28：30-36.

[8] 李佩国，李蕴玉，张香斋，等. 我国鸡球虫耐药性现状及其对策（综述）[J]. 河北科技师范学院学报，2006，20（3）：70-74.

[9] LEVINE D. Veterinary protozoology[M]. Ames：Iowa University Press，1985：178-188.

[10] 李 驰，刘明春，李阳，等. 四种抗球虫药物对鸡柔嫩艾美耳球虫（沈阳株）的敏感性试验[J]. 黑龙江畜牧兽医，2008（l2）：70-71.

[11] 张艳英，张香斋，贾青辉，等. 柔嫩艾美耳球虫唐山株对7种抗球虫药的抗药性检测[J]. 中国兽医杂志，2009，45（5）：21-22.

[12] 黄兵，赵其平，吴薛忠，等. 上海地区鸡球虫对6 种抗球虫药的抗药程度研究[J]. 中国兽医寄生虫病，2001，9（2）：127.

[13] SHARMAN P A，SMITH N C，WALLACH M G，et al.Chasing the golden egg：vaccination against poultry Coccidiosis[J]. Parasite immunol，2010，32（8）：590-598.

[14] 郑寅. 中药肠血平颗粒对鸡球虫病的防治试验[D]. 杨凌：西北农林科技大学，2013.

[15] 张浩男，张秀英. 常山提取物与西药联合用药对鸡球虫病的疗效试验[J]. 东北农业大学学报，2012，43（3）：68-72.