重庆市部分地区H5和H7重组禽流感病毒二价灭活苗免疫效果监测

杨泽林，巫廷建，凌洪权，孙 燕，董春霞，赵 曼，李永强，熊仲良

（1.重庆市动物疫病预防控制中心，重庆 401120；2.璧山区养殖业技术服务中心，重庆 401120）

禽流感是由A型流感病毒引起的一种禽类（家禽和野禽）感染和/或疾病综合征[1]。H5、H7亚型高致病性流感具有潜伏期短、传播快、发病急、发病率和死亡率高等特点，不仅对家禽造成严重危害，也对国际贸易有严重影响，还对人类健康构成严重威胁[2-3]。继H5亚型禽流感强制免疫之后，农业部下发通知[4]，要求自2017年秋季开始，对家禽实施H7亚型流感强制免疫。为进一步掌握重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活苗的免疫效果，了解其抗体变化和影响因素，开展了本次免疫效果监测，从而为做好禽流感预防免疫工作提供依据。

1 材料与方法

1.1 控制性试验

1.1.1 实验动物 乌皮红冠土鸡100只。

1.1.2 疫苗 重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活苗（H5N1 Re-8株+H7 Re-8株）：青岛易邦生物工程有限公司生产，生产日期20170624，生产批号170204501。

1.1.3 抗体检测试剂 禽流感病毒H5亚型血凝抑制试验抗原（Re-8株）：青岛易邦生物工程有限公司生产，批号160053301，有效日期20180511；禽流感病毒H7亚型血凝抑制试验抗原（H7N9株）：哈尔滨维科生物技术开发有限公司生产，批号2017007，生产日期20170519，有效期2年。

1.1.4 免疫剂量和采样时间 免疫剂量按照厂家说明书，每羽0.3 mL。免疫后2 d内，逐只观察和记录免疫副反应。分别在首免后15 d和22 d翅下静脉采血1次；每次随机采集30羽份，按常规方法分离血清。

1.1.5 检测方法 按《高致病性禽流感诊断技术》（GB/T18936—2003），采用血凝-血凝抑制试验进行抗体检测。抗体滴度≥4 log2，判为免疫合格。

1.1.6 数据处理与分析 对各组的抗体检测结果按病种进行分类统计。

1.2 大面积临床监测

1.2.1 监测对象 2017年10月9日至10月20日，在云阳、璧山、忠县、万盛和长寿5个区县的14个规模场和19个散养户，共采集免疫鸡血清414份。

1.2.2 疫苗 政府招标采购疫苗。

1.2.3 检测试剂和检测方法 同1.1.3和1.1.5。

2 结果

2.1 控制试验

2.1.1 免疫副反应 试验鸡未见免疫副反应发生。

2.1.2 H5亚型禽流感抗体效价 30份血清中，首免疫15 d后合格的3份，合格率为10.00%；首免22 d后合格的18份，合格率为60.00%（表1）。

2.1.3 H7亚型禽流感抗体效价 30份血清中，首免15 d后合格的21份，合格率为70.00%；首免22 d后合格的28份，合格率为93.33%（表2）。

2.2 大面积临床监测

2.2.1 H5亚型禽流感抗体监测 共对414份鸡血清进行了H5亚型禽流感抗体监测，发现免疫抗体合格382份，平均合格率为92.27%（表3）。其中：5个区县的H5亚型禽流感抗体免疫合格率在66.67%～98.89%之间；蛋鸡合格率为99.11%（223/225），肉鸡合格率为84.13%（159/189）；规模场合格率为91.67%（275/300），散养户合格率为93.86%（107/114）。

表2 H7亚型禽流感抗体监测情况汇总

表3 5个区县鸡血清H5亚型禽流感抗体监测情况汇总

2.2.2 H7亚型禽流感抗体监测 414份免疫鸡血清中，合格315份，合格率为76.09%（表4）。其中：5个区县的H7亚型禽流感抗体免疫合格率在33.33%～94.44%之间；蛋鸡合格率为92.00%（207/225），肉鸡合格率为57.14%（108/189），规模场合格率为75.67%（227/300），散养户合格率为77.19%（88/114）。

表4 5个区县鸡血清H7亚型禽流感抗体监测情况汇总

3 结论

控制性试验和秋防免疫监测结果表明，H7亚型禽流感抗体合格率均在70%以上，达到了农业部规定标准。在控制性试验中，H7亚型流感抗体产生的时间比H5亚型要早；虽然免疫22 d后的H5亚型禽流感抗体合格率仅为60%（这与试验动物为雏鸡，疫苗免疫剂量0.3 mL/只有关，或者可能与临床H5亚型免疫过多次有关），但秋防免疫监测的抗体合格率达到了93.49%。因此，无论是控制性试验，还是秋防抗体监测结果，均表明现行使用的“H5+H7”二价灭活疫苗免疫效果确实。

蛋鸡的H5和H7亚型流感免疫抗体水平均比肉鸡高。因此，在生产实际中，应高度重视肉鸡的高致病性禽流感防疫工作。

5个区县大面积高致病性禽流感抗体监测结果表明，部分区县仍存在免疫抗体水平不高的养殖场。因此，在新旧疫苗交替使用期间，各地要及时开展“H5+H7”二价灭活疫苗免疫效果监测与评价，对免疫副反应、免疫抗体不达标，免疫失败情况及时进行调查处理。

[1]甘孟侯.中国禽病学[M]. 北京：中国农业出版社，1999.

[2]张秀美，黄艳艳，胡北侠. 关注禽流感病毒的变异及其公共卫生学意义[J]. 山东畜牧兽医，2008，29（7）：1-4.

[3]王琦梅，刘社兰，陈恩富. 人感染H7N9 禽流感流行病学研究进展[J]. 中华预防医学杂志，2017，51（2）：183-187.

[4]农业部兽医局. 关于切实做好全国高致病性禽流感秋季免疫工作的通知[A]：农医发（2017）24号. 北京：农业部，2017.