液相色谱/质谱联用技术在盐酸克伦特罗残留中的应用

李翠萍

【摘 要】盐酸克伦特罗被作为饲料添加剂非法添加到动物饲料中，造成中毒事件，引起人们广泛关注，其残留对人民健康造成严重威胁。因此，需要一种高灵敏度的有效检测方法。液相色谱/质谱联用技术灵敏度高、操作简便、耗时少且准确度高，被用于盐酸克伦特罗残留的检测。本文对盐酸克伦特罗和液相色谱/质谱联用技术做了简单概述，浅析了液相色谱/质谱联用技术在盐酸克伦特罗残留中的应用，以期为市场监测中快速检测盐酸克伦特罗提供参考。

【关键词】液相色谱/质谱联用技术；盐酸克伦特罗；残留；应用

【中图分类号】R155.5 【文献标识码】A 【文章编号】1005-0019（2018）23--01

1 盐酸克伦特罗概述

盐酸克伦特罗又名“瘦肉精”，属于肾上腺类神经兴奋剂，主要药理作用为：舒张及松弛子宫平滑肌、舒张支气管等，是一种临床上常见的平喘药。盐酸克伦特罗不是兽药，不能作为饲料添加剂非法使用。但是由于盐酸克伦特罗在人体和家畜内吸收比较好，一些不法商贩为了经济利益，在动物饲料中非法添加盐酸克伦特罗等瘦肉精，来提高动物蛋白质合成率，减少动物的脂肪生成，增加动物瘦肉量，缩短饲养时间，从而降低生产成本，增加利润。我国已明令禁止在动物饲料中添加瘦肉精，但是非法添加的情况仍然存在，造成“瘦肉精”中毒事件的发生，对人类生命健康造成威胁。因此，找到一种检测盐酸克伦特罗残留量的有效方法具有重大意义。目前用于检测盐酸克伦特罗残留量的方法主要有高效液相色谱法、生物传感技术、气相色谱/质谱联用技术、液相色谱/质谱联用技术等。其中高效液相色谱法耗时较长，灵敏度较低，假阳性率较高；生物传感技术检测范围有限，灵敏度不高，仅用于尿液、水溶液和血清中盐酸克伦特罗残留量的检测；气相色谱/质谱联用技术操作步骤繁多，待测物通常需要进行衍生化处理，操作耗时；而液相色谱/质谱联用技术耗时少、操作简单、抗干扰能力强、灵敏度高、确证能力强，被广泛用于盐酸克伦特罗残留量的检测。

2 液相色谱/质谱联用技术概述

液相色谱/质谱联用技术简称液质联用，是液相色谱与质谱串联的技术。主要由五部分组成：液相色谱仪、接口离子源与质谱的连接装置、质量分析器、真空系统以及计算机数据处理系统。样品进入液相色谱仪，经色谱柱实现分离，被分离组分依次从接口进入质谱仪，经离子源被离子化，离子于质量分析器中被聚焦，依据质荷比实现分离，离子信号转变成电信号，被传送到计算机数据处理系统，依据质谱峰强度及位置对样品中成分及其结构进行分析。目前，常用的液相色谱/质谱联用技术有两类：一类是从质量分析器的角度来划分，主要包括离子阱质谱仪、四级杆质谱仪、傅立叶变换质谱仪、飞行时间质谱仪；另一种是从离子源的角度来划分，主要包括大气压化学电离、电喷雾离子、基质辅助激光解吸离子化等。液质联用技术集液相色谱的高分离效能和质谱的强鉴别能力于一身，可以对样品准确定性定量。因此，被广泛应用于许多领域。

3 液相色谱/质谱联用技术在盐酸克伦特罗残留检测中的应用

王春民等[1]采用超高效液相色谱/串联质谱法对动物源食品中的克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺以及特布他林四种瘦肉精进行检测分析。采用葡萄糖醛甙酶/芳基硫酸酯酶对样品进行酶解，用溶剂乙酸乙酯进行提取，经过固相萃取小柱的净化处理后，超高效液相色谱/串联质谱法测定。经过优化实验条件，实验结果表明：在1.0μg/L-25.0μg/L的浓度范围内，四种瘦肉精呈现良好的线性关系，线性相关系数为0.999，检出限均达到0.5μg/kg。加标水平下，回收率达到84%-105%。说明超高效液相色谱/串联质谱法可用于盐酸克伦特罗残留量检测。王娇等[2]利用高效液相色谱/串联质谱法测定猪肉中盐酸克伦特罗。结果发现：在1-20 ng/mL的浓度范围内，盐酸克伦特罗的色谱峰面积与浓度线性关系良好，相关系数达到0.9995，线性回归方程为：y=1.114x-0.012，检出限达到0.33 ng/mL。由此表明：高效液相色谱/串联质谱法可用于检测分析猪肉中的盐酸克伦特罗。

金慧然等[3]利用超高效液相色谱/串联质谱法对牛尿中克伦特罗等3 种β-兴奋剂残留量进行检测。经过提取和净化，有效地去除了样品中的杂质，经超高效液相色谱/串联质谱仪测定，结果发现：在0.5-5.0 ng/mL的浓度范围内，克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇呈现良好的线性关系、回收率以及重现性，充分体现了该方法的高灵敏度、高精密度。表明超高效液相色谱/串联质谱法可用于检测牛尿中克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇的残留量。陈蕾等[4]利用液相色谱/串联质谱法对猪肉中盐酸克伦特罗进行了快速检测，并建立了快速提取猪肉中盐酸克伦特罗的方法，对液相色谱/质谱/质谱联用仪分析条件进行了优化。用溶剂乙腈提取猪肉中的盐酸克伦特罗，研究对比了影响提取净化效果的三个因素：无水硫酸镁的加入量、填充料的加入量以及填充料类型。结果表明：在0.15μg/L-1.5μg/L的浓度范围内，盐酸克伦特罗线性关系良好，平均回收率可达到80%-120%，相对标准偏差为0.47%，检出限为0.5μg/L。说明液相色谱/串联质谱法简单、快速、可靠，可用于快速测定猪肉中的盐酸克伦特罗残留量。孟文瑛等[5]采用固相萃取/超高效液相色谱/串联质谱法对猪肉中的盐酸克伦特罗残留量进行测定，用5%的高氯酸对猪肉样品进行超声提取，高速离心15 min，用固相萃取柱富集和净化上清液，去除复杂的干扰基质，选择性地富集净化目标样品。試验结果表明：在0.25-50μg/kg 的浓度范围内，盐酸克伦特罗呈现良好线性关系，线性相关系数为0.9982，1.25、12.5、50μg/kg的添加水平下，平均回收率达到62.2%-72.0%，相对标准偏差为4.2%-6.1%，检出限达到0.05μg/kg。表明固相萃取/超高效液相色谱/串联质谱法高效、简便、准确、快速，可用于盐酸克伦特罗的选择性富集及分离检测。

朱晓艾等[6]采用高效液相色谱法对猪肉中的盐酸克伦特罗进行了检测，对高效液相色谱仪的检测条件和样品的前处理方法进行优化，建立了相关快速简便的检测方法。结果表明：优化后，样品前处理只需两个过程：提取和蛋白质沉淀。色谱峰良好，样品的加标回收率介于88.55%-94.03%之间，精密度小于2%，检测限达到0.025mg/kg。表明该方法成本低、准确、快速且简便，适用于快速检测猪肉中盐酸克伦特罗残留。蒋万枫等[7]采用超高效液相色谱/四极杆/飞行时间质谱法对动物组织中的克伦特罗等7 种β-受体激动剂残留进行了快速筛查。结果表明：4种加标水平下，7 种β-受体激动剂的加标回收率达到75%-114%，相对标准偏差为4.5%-20.6%。克伦特罗的线性范围介于0.4-40.0 μg/kg之间，定量下限达到0.4 μg/kg，其余6种β-受体激动剂的线性范围均介于0.2-40.0μg/kg之间，定量下限达到0.2 μg/kg，相关系数均位于0.9914-0.9999之间。说明超高效液相色谱/四极杆/飞行时间质谱法适合于快速筛查动物组织中7种β-受体激动剂残留。

4 展望

严控盐酸克伦特罗残留量，必须要严格执法，同时也需要有效的检测技术作为保障。液相色谱/质谱联用技术在瘦肉精残留检测领域虽然有其优势，但是也有其弊端，比如价格昂贵，成本高，难以普及。随着各种新兴检测技术的不断发展进步，检测盐酸克伦特罗的未来发展趋势是研究开发成本低、高效、快速、能定性且定量的现场检测方法，最终在市场检测中使其普及化、常规化。

参考文献

王春民，张秋萍，吴春霞，马晓艳，李建. 动物性食品中4 种β-兴奋剂的超高效液相色谱-串联质谱法测定[J]. 中国卫生检验杂志， 2016，26（21）：3064-3066

王娇，高永慧，姚华，史靖宏. 高效液相色谱- 串联质谱法测定猪肉中的盐酸克伦特罗[J]. 现代食品，2018，47（13）：133-136

金慧然，韩宏超，郭文欣，李蕊，陶娅，江淼，李春辉. 超高效液相色谱-串联质谱法测定牛尿中3 种β-兴奋剂残留[J]. 《黑龙江畜牧兽医》科技版，2014，（5） ： 214-216

陈蕾，石盼盼，魏法山，朱凯，吴丽. 液相色谱-串联质谱法法快速检测猪肉中盐酸克伦特罗[J]. 食品研究与开发，2017，38（22）：163-166

孟文瑛，郭志谋，沈伟健，沈崇钰，吴斌，刘艳明，等. 一种新型固相萃取柱结合超高效液相色谱串联质谱法选择性富集测定猪肉中的盐酸克伦特罗[J]. 色谱，2012，30（2） ：141-145

朱晓艾，陈雅君，陈雪香，等. 高效液相色谱法检测猪肉中盐酸克伦特罗的前处理方法[J].食品与机械，2015，31（2）：106-109

蔣万枫，赵珊. 超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法快速筛查动物组织中7 种β受体激动剂残留[J].分析测试学报，2013，32（6）：675-680