谷物中黄曲霉毒素检测方法的研究进展

◎ 韩 伟，向红莉

（遵义市粮油质量监测中心，贵州 遵义 563000）

近年来，关于人和动物遭受黄曲霉毒素毒害的研究报道越来越多，大部分报道称谷物遭受黄曲霉毒素的污染，被人与动物体食用后，会引起人体肝脏代谢紊乱；且黄曲霉毒素在生物体内极难被代谢掉。因此，谷物中黄曲霉毒素含量的检测十分重要。目前，应用于谷物中黄曲霉毒素含量检测的方法很多，随着现代科技的发展，人们开始注重方法的灵动性，开始联合化学、仪器分析法和生物鉴定法三大类主要检测方法，建立了多种方法交叉联用检测技术，本文介绍几种研究比较频繁的谷物中黄曲霉毒素含量联合检测方法。

1 HPLC-柱后衍生法

张惠贤等[1]提出一种新型黄曲霉毒素检测方法，该法用乙腈提取样品，采用专用固相萃取柱净化提取物，然后利用光化学增加样品荧光强度，并用HPLC检测黄曲霉毒素含量。该方法在前处理方面进行了优化，选用乙腈作为提取溶剂而不是甲醇，成功除去水溶性杂质；采用配比合理的双有机溶剂进行固相萃取，提高净化富集效果；采用合适的色谱柱，优化了分离效果；增装光衍生反应器，引入羟基，解决了黄曲霉毒素遇水荧光猝灭的问题。经改进后，该方法综合了化学分析法与仪器分析法优缺点，充分利用黄曲霉毒素的理化性质，提高了检测灵敏度，操作简便，检测结果准确度高。

王志强等[2]也用此方法同时测定食品中几种黄曲霉毒素，不同的是柱后衍生采用的是溶液衍生，而不是光化学衍生。该法运用0.05%碘溶液柱后衍生，检测成本相比要低得多，检测条件要求也较低，灵敏度却很高。

李珺沬等[3]在也用该方法对粮食作物中黄曲霉毒素的含量进行了检测，而他们采用了新型吸附萃取技术，制备了石墨烯搅拌棒，并优化了相关萃取条件，之后用0.5 g·L-1碘溶液作为柱后衍生溶液，能精准地检测出谷物样品中极痕量的黄曲霉毒素。

尚欣春等[4]发现了一种新型固相萃取涂层材料，他们拟采用亲水亲脂材料作为固相载体，用离子液体作为涂层，该方法能快速萃取提取物，节省检测时间，萃取彻底，重现性高。

HPLC-柱后衍生法在日前运用广泛，相关报道层出不穷，在前处理改进方面，梁宝爱等[5]提到集成净化平台，该前处理手段自动化程度高，在节省人力成本的同时能快速准确的净化样品提取物。袁芹等[6]自助改装固相萃取装备，采用改性碳纳米管来分散吸附剂，效果良好。

2 QuEChERS-液质联用法

刘韬等[7]把谷物作为样品，建立了液质联用法来同时测定多种真菌毒素的含量，优化了前处理，加入配比合理的氯化钠和硫酸镁，同时加入特殊化学品PSA和C18吸附杂质，提高回收率。优化了色谱条件与质谱条件，提升了样品的分离效果，能快速准确地检测出谷物中黄曲霉含量。

江恩源等[8]报道了液质联用检测玉米中黄曲霉毒素含量，该法采用4∶6甲醇水溶液提取黄曲霉毒素，优化净化条件，用混合柱模式除去提取液中杂质，在流动相中加入少量甲酸，提高洗脱效率，优化仪器设备条件，并对该法进行回收率、稳定性、精确度方面的验证，以此来确保方法的可行性。

3 化学分析-生物鉴定联合法

王文珺等[9]用谷物来验证荧光定量检测法的准确性，他们采用荧光检测卡与检测仪器相结合的方法来测量谷物中黄曲霉毒素的含量，并对该方法检出限、回收率、稳定性等方面作了测试，结果良好，所有数据都在可控范围内。

程慧等[10]提出了一种快速免疫比色检测法，该法以特异探针催化显色为基础结合紫外分光光度计检测，优化了反应条件，可快速低检测成本。

洪霞等[11]也报道了一种快速检测方法，该法采用的是上转换免疫层析法，利用黄曲霉毒素生物检定特异性抗体与纳米材料结合，在短时间内快速检测出黄曲霉毒素含量。该方法也能作为一种快速检测黄曲霉毒素含量，用于现场监控黄曲霉毒素的含量。

4 结语

高效液相色谱-柱后衍生法、化学-生物鉴定联合法应用较为广泛，可以通过改进前处理与柱后衍生方法来提高高效液相色谱-柱后衍生法的检测效率。化学-生物检定联合法应用普遍，特别适用于快速监控谷物中黄曲霉毒素含量的检测。相比之下，液质联用法由于仪器昂贵，对操作者素质要求比较高，相关应用报道比较少。