侯雅萍,俞 菁,樊 程
(上海市长宁区妇幼保健院检验科 200051)
B族链球菌(GBS)又称无乳链球菌,属于条件致病菌,可定植于女性生殖道、肠道和尿道,新生儿可在分娩时由母体生殖道寄殖菌上行感染。GBS是引起产褥期发热的常见病原体,也是引起孕妇菌血症和伤口感染的主要致病菌[1]。GBS感染可引起新生儿肺炎、脑膜炎、败血症等疾病,甚至引起新生儿死亡[2]。本研究通过对上海长宁地区35~37周围产期孕妇GBS感染及耐药情况进行分析,旨在积极采取预防及治疗措施减少围产期GBS感染提供较为可靠的依据。
1.1一般资料 选取2016年1-12月在本院就诊的10 158例孕周为35~37周的围产期孕妇为研究对象,并对所有研究对象的阴道分泌物拭子进行GBS的检测。
1.2仪器与试剂 含5%绵羊血的哥伦比亚血平皿购自安图生物公司;含5%绵羊血的MH琼脂平皿(9 era)购自科玛嘉公司;药敏纸片、T-H肉汤为英国OXOID公司产品;质控菌株为金黄色葡萄球菌(ATCC25923)。
1.3方法
1.3.1取材 参照文献[3]推荐的取材方法,对研究对象进行取材:先擦去外阴分泌物,将无菌阴道棉拭子放入阴道下1/3内,旋转l周采取阴道分泌物。
1.3.2GBS的分离与鉴定 将阴道拭子置于T-H肉汤管中进行增菌培养18~24 h;再分别接种到哥伦比亚血平皿上,并在5%~10%CO、35 ℃的孵箱孵育18~24 h。观察血平皿上菌落特点,挑取灰白色、表面光滑、有乳光、半透明、β溶血、中等大小的菌落进行触酶试验和CAMP实验。当触酶试验阴性、CAMP实验阳性,即为GBS。
1.3.3GBS药敏试验 采用纸片扩散法(K-B法)进行药敏试验,按美国临床和实验室标准化协会(CLSI)2016版标准判断药敏试验结果。
1.4统计学处理 采用WHONET5.6软件分析药敏数据。采用SPSS20.0统计软件对数据进行统计学分析,计数资料采用百分数表示,组间比较采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。
2.1GBS感染情况 对10 158例围产期孕妇阴道分泌物培养,培养鉴定结果显示640例GBS阳性,阳性率为6.3%。
2.2各季节GBS感染分析 2016年1-12月上海长宁地区35~37周孕妇生殖道GBS检测中,春季(3~5月)阳性检出率最高,为7.49%(185/2 467),夏季(6~8月)为5.79%(143/2 469),秋季(9~11月)为5.73%(141/2 459),冬季(12~2月)为6.18%(171/2 763)。春季与其他季节阳性检出率比较,差异有统计学意义(P<0.05),而其他各季节阳性检出率之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
2.3各年龄段GBS感染分析 <26岁GBS阳性检出率为4.15%(20/482),26~<31岁检出率为5.54%(305/5 510),31~≤35岁检出率为7.62%(269/3 528),>35岁检出率为7.21%(46/638)。组间比较结果显示,<26岁与31~≤35岁相比较,差异有统计学意义(P<0.05);<26岁与>35岁年龄组相比较,差异有统计学意义(P<0.05);26~<31岁与31~≤35岁年龄组相比较,差异有统计学意义(P<0.001)。
2.4GBS对抗菌药物的敏感性及分析 640例培养阳性菌株均进行药物敏感试验,7种药物结果分析显示:GBS阳性菌株对青霉素、万古霉素、利奈唑烷、头孢噻肟均敏感,对红霉素、克林霉素、左氧氟沙星耐药率分别为59.22%(379/640)、57.03%(365/640)和33.75%(216/640)。
GBS是孕妇产褥期脓毒血症和新生儿脑膜炎的重要致病因素。它寄生在产妇生殖道,可引起产后感染、菌血症、心内膜炎、皮肤和软组织感染及骨髓炎[4]。国内外报道显示,GBS产生的β溶血素/细胞溶素可破坏母胎屏障,通过羊膜,感染羊水,从而引起胎膜早破、早产,新生儿肺炎、脑膜炎、败血症等新生儿感染性疾病,甚至导致胎儿宫内死亡[5-6]。
本研究结果显示,上海长宁地区35~37周孕妇GBS感染率为6.3%,高于国内报道的江苏扬州地区的4.12%[7]和绍兴地区的4.6%[8],低于广东东莞的9.1%[9],北京地区9.2%[10]及佛山地区的13.7%[11]。导致各地区GBS感染率存在差异的原因可能为:(1)人群差异,与各地区人群的生活环境、生活方式等相关;(2)检测方法不同,本研究采用经典细菌培养与鉴定方法,相比实时聚合酶链式反应(PCR)方法灵敏度会相对降低[10];(3)标本来源不同,本研究只采集阴道分泌物标本,而部分研究取材是同时取阴道分泌物和直肠分泌物进行检测。
本研究结果显示,各季节GBS感染率存在差异,春季的感染率明显高于其他季节,主要因为春季天气多变,雨水增多,加上早晚温差大,导致人体调节功能紊乱,更容易使得GBS定植。同时,不同的年龄阶段孕妇生殖道GBS感染存在显著差异,>35岁和31~≤35岁孕妇的GBS感染率明显高于其他两组,说明上海长宁地区围产期孕妇GBS感染情况可能与年龄结构存在一定的关系。随着“二孩”政策的全面放开,30岁以后生育的女性所占比例将大大提高。从本研究结果可以看出,30岁以后的生育的女性GBS感染阳性率较高,因此对于孕期GBS的检测提出了更高的要求。
640株GBS药敏分析结果显示,GBS菌株对青霉素、万古霉素、利奈唑烷、头孢噻肟耐药率为0.00%,说明在本院尚未出现青霉素和万古霉素耐药菌株。万古霉素不良反应较大,包括肾损害及耳毒性,孕妇不宜使用,严重感染时推荐使用利奈唑烷。青霉素不良反应较小,是孕妇及新生儿治疗GBS感染的首选用药。对青霉素轻度过敏者建议使用头孢菌素;对青霉素和头孢菌素同时过敏者建议使用红霉素和克林霉素,但结果显示GBS对红霉素和克林霉素耐药率均超过50%以上,应加强对GBS耐药性的监测以防耐药菌株的出现和扩散。
综上所述,上海长宁地区孕晚期GBS感染率相对较高,与年龄、季节相关性大;青霉素仍可作为孕妇治疗GBS感染的首选治疗药物,GBS阳性的孕妇应立即进行抗菌药物干预治疗,以保证母婴安全。