中西医结合医学

三种补肾中药有效成分对皮质酮致骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞基因表达谱的作用

卞琴，黄建华，杨铸，等

摘要：目的：观察3种补肾中药淫羊藿、补骨脂和女贞子各自的有效成分淫羊藿苷、补骨脂素和齐墩果酸对皮质酮大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow stromal cell，BMSC）的调控作用。方法：50只Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组、皮质酮造模组（模型组）、皮质酮加淫羊藿苷治疗组（淫羊藿苷组）、皮质酮加补骨脂素治疗组（补骨脂素组）、皮质酮加齐墩果酸治疗组（齐墩果酸组）（后3组合称治疗组）。模型组和治疗组予皮质酮皮下注射，每日1次，连续14 d。正常对照组予等剂量橄榄油皮下注射。治疗组皮质酮注射前5 d开始按20 mg/kg给予对应药物每日1次灌胃，连续19 d。分别于造模第1、4、7、11和14 d称量体质量，大鼠处死后取第4腰椎进行Micro-CT扫描，评价骨量改变情况，所选结构参数包括：（1）骨小梁的体积（bone volume，BV）与样本的体积（total volume，TV）的比值，为兴趣区域（region of interest，ROI）内代表骨性结构体素的总体积与区域内所有体素的总体积之比；（2）骨小梁间隙（trabecular spacing，Tb.Sp）；（3）骨小梁厚度（trabecular thickness，Tb.Th）；（4）骨小梁数目（trabecular number，Tb.N）。BV/TV、Tb.Sp、Tb.Th、Tb.N等数据从软件直接获得。采用全骨髓贴壁培养法培养原代BMSC，于取材后第7天干细胞基因芯片技术检测mRNA表达。基因表达谱检测操作过程由上海康成生物工程有限公司完成；基因表达谱数据分析各组基因差异表达用Genespring 4.0软件分析。基因差异表达（上调或下调）两倍以上为有意义。结果：造模和治疗后各组大鼠体质量没有发生明显变化。Micro-CT显示，皮质酮注射14 d后，模型组与正常对照组之间，治疗组与模型组之间腰椎骨形态计量学参数未出现显著变化。干细胞基因表达谱显示在皮质酮改变的基因中，淫羊藿苷、补骨脂素和齐墩果酸分别可逆转11、12和15种基因。3个有效成分共同作用的基因有5种，主要包括成骨分化相关分子Alpl和Bmpr1a，细胞周期调节相关因子Cdkn2a和细胞因子Fgf21，以及Notch信号通路上Adam17分子。结论：补肾中药可能从BMSC周期调节和细胞代谢等方面发挥促进BMSC成骨分化的作用，最终实现治疗骨质疏松的疗效，但其确切的机制还有待深入研究。

来源出版物：中西医结合学报, 2011, 9(2): 179-185

入选年份：2016