胃息肉中TGF-β1、Smad 3的表达及其与胃息肉癌变之间的相关性

师艾丽，李菲，陈启龙，安俊平，宋苏华

（1.徐州市肿瘤医院消化科，江苏 徐州 221005；2.徐州市肿瘤医院病理科，江苏 徐州 221005）

胃息肉是从胃黏膜表面突起延伸向胃腔的隆起性病变，多数在内镜检查时偶然发现[1]。胃息肉可分为肿瘤性息肉和非肿瘤性息肉。目前认为腺瘤性息肉与胃癌发生有密切关系。有报道称，腺瘤性息肉的癌变率大约为15.69%～41.00%[2-3]。转化生长因子-β是一种对多种细胞具有刺激或抑制作用的多功能多肽类细胞因子，几乎体内的所有细胞都能产生TGF-β1。在胃癌组织中，TGF-β1及其受体的异常表达在促进肿瘤的发生和进展过程中发挥着重要作用[4]，但TGF-β1及其通路在胃息肉中的表达及其在胃息肉癌变中的作用研究甚少。现对本院2012年1月～2014年11月行胃镜下息肉EMR摘除治疗的胃息肉、胃癌及慢性胃炎患者行TGF-β1及Smad 3的表达监测，以期为胃息肉癌变预测及早期胃癌的临床诊断提供新的特异性的生物学标志物，进而为胃息肉的临床处理策略提供选择依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择本院2012年1月～2014年11月住院行胃息肉EMR切除的患者30例，其中男13例，女17例，平均年龄（53.3±11.7）岁，胃恶性肿瘤30例，其中男19例，女11例，平均年龄（64.6±9.4）岁，慢性胃炎20例，其中男12例，女8例，平均年龄（58.3±4.7）岁，对镜下所发现的病变仔细观察并记录其形态及大型，采集每位患者的相关临床资料，研究经医院伦理委员会同意，受试者均知情同意。

1.2 方法

1.2.1 免疫组化法检测TGF-β1、Smad 3：采用免疫组化SP法。TGF-β1、Smad 3免疫组织化学检测试剂盒均购自北京中杉生物公司。采用1∶100浓度稀释。SP试剂盒，DAB购自北京中杉生物公司。免疫组化操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。以PBS代替一抗作为阴性对照。

1.2.2 免疫组化结果判定：TGF-β1蛋白主要表达于细胞质中，呈棕黄色。Smad 3蛋白主要表达于细胞的胞质和胞核中，亦呈棕黄色。染色结果按二级定位法判定，结果判定有两位病理科医师双盲独立完成。阳性染色细胞百分率评分标准为：＜20%为0分，21%～40%为1分，41%～60%为2分，61%～80%为3分，＞81%为4分。染色强度评分标准为：无着色或淡黄色为0分，浅棕黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分，两项分数相加进行最终计分判定，＜2分为（-），2～3分为（+），4～5分为（++），6～7分为（+++）。

1.3 统计学方法 采用SPSS 12.0统计学软件对相关数据进行分析。计数资料采用卡方检验，计量资料采用t检验，数值以“”差表示。P＜0.05表示差异有统计学意义，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 TGF-β1、Smad 3的表达与胃息肉肿瘤进展的关系TGF-β1在胃癌中高表达，在胃息肉及慢性胃炎中低表达，差别有统计学意义，Smad 3在胃癌低表达，在慢性胃炎中高表达，在胃息肉中的表达低于胃癌组，但高于慢性胃炎组，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 不同类型胃息肉和胃癌中TGF-β1、Smad 3的表达与临床参数的关系 Smad 3在胃癌组织中低表达，在胃息肉中表达较高，与胃息肉类型无明显差异性，Smad 3表达与胃癌进展负相关，分化程度高，TNM分期早，未发生淋巴结转移，Smad 3表达程度就高。两者在胃癌中的表达与患者性别及年龄无关，与肿瘤的TNM分期、癌细胞分化程度及淋巴结转移有关，见表1，见图1～图6。

表1 TGF-β1、Smad 3的阳性表达在不同病理特征中的关系Table 1 The relationship between positive expression of TGF-beta 1 and Smad 3 in different pathological characteristics

图1～图3 转化生长因子在慢性胃炎，胃息肉及胃癌中的表达

图4～图6 Smad 3在慢性胃炎，胃息肉及胃癌中的表达Figure 4-figure 6 Smad 3,expression in chronic gastritis,gastric polyps and gastric cancer

3 讨论

胃癌是常见的恶性肿瘤之一，在我国，每年死于胃癌的患者大约16万人，病死率居各类恶性肿瘤之首，由于胃癌缺乏特异性表现，故早期发现、早期诊断对患者的治疗和预后至关重要[5]。

胃癌的发生是一个长期的过程，常会经历多年持续的癌前变化，多种癌症相关基因均在其中起着重要作用。胃癌的癌前疾病是指与胃癌相关的胃良性病变，包括慢性萎缩性胃炎、胃腺瘤、胃溃疡、残胃、恶性贫血及巨大胃黏膜皱襞症等。近年来随着胃镜技术的开展及普及，越来越多的癌前疾病被及时发现，对阻止胃癌的发生有一定的作用，其中胃息肉作为临床最常见的胃部疾病，其恶变的几率及与肿瘤之间的相关性备受关注。

胃息肉作为癌前疾病的一种，可分为增生性息肉和腺瘤性息肉[6]。据文献报告，增生性息肉癌变率为0.3%～0.6%[7-8]，腺瘤性息肉的癌变率达15.69%～41.00%[2-3]，其中呈乳头状生长者称为乳头状息肉，后两者可能发生癌变。这是因为腺瘤性息肉及乳头状息肉带有肿瘤性质，已完全失去了胃黏膜及腺体的正常结构，胃息肉的癌变率因胃息肉的种类不同而不同，腺瘤性息肉的癌变率在40%左右，而增生性的胃息肉癌变率不超过5%，后者发生癌变的原因是在增生性息肉内出现了异型增生或腺瘤，也就是说在癌前疾病内出现了癌前病变。

转化生长因子-β（TGF-β）是一组结构和功能密切相关的活性多肽，TGF-β1是这一家族的主要成员。TGF-β1可通过阻止细胞从G1-S期，对上皮起源细胞有明显的生长抑制作用[9]。TGF-β1属于负性生长因子[10]，但在胃癌的发生发展过程中，肿瘤可摆脱TGF-β1的抑制，甚至被TGF-β1刺激而过度生长，故TGF-β1为双向调节因子。随着胃癌临床分期的进展及转移淋巴结的出现，TGF-β1表达逐渐增强，但与患者的年龄及性别无关[11-13]，提示TGF-β1可能促进胃癌的发生及发展。在本试验中，转化生长因子-β1在胃癌中的表达明显升高，胃癌组织中的阳性表达率为73.3%，明显高于胃息肉及慢性胃炎组织，其阳性表达率分别为56.7%及40%，（χ2=5.19、3.98，P＜0.05），在不同类型胃息肉中，转化生长因子-β1的表达具有差异性，在伴有淋巴结转移的胃癌患者中，转化生长因子-β1的阳性率表达增高，与相关文献观点相符，提示转化生长因子-β1可能促进胃癌的发生及发展，而胃息肉作为癌前疾病的一种，转化生长因子-β1表达的改变可能在息肉癌变中发挥一定的作用。

TGF-β超家族是一种信使蛋白，Smads蛋白是转化生长因子通路中的重要信使，Smad 3的表达缺失或突变使TGF-β信号传递中断，细胞逃脱TGF-β的生长抑制作用，导致许多肿瘤的发生及发展。故在胃癌的发生发展过程中，Smad 3作为TGF-β超家族表达过程中的抑制生长信号因子，能改变细胞的生长周期，调控异常细胞的分裂周期[14]，对机体起到保护作用。在本试验中，Smad 3在正常胃黏膜组织中的表达最高，值为55%，胃癌中的Smad 3阳性表达率最低，值为36.6%，差异有统计学意义（χ2=4.27，P＜0.05），与胃息肉相比，两两比较差异有统计学意义，提示Smad 3表达的减少及缺失是引发肿瘤发生的重要环节。

综上所述，转化生长因子-β在胃癌的发生与发展过程中均发生着重要的作用，而胃息肉作为胃癌的癌前疾病，亦存在上述信号传导通路的异常，对研究胃癌的发生机制提供了一个新的思路，同时在临床上，对于胃腺瘤样息肉需尽早行内镜下治疗，避免息肉的进一步恶变，预防胃癌的发生。

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