一株雏鹅大肠杆菌的分离鉴定及其药敏试验

童秋廷

摘要：鹅大肠杆菌病（Goose E.cofi disease，GED）是一种细菌性急性传染病，严重危害养鹅业的发展。本文就以感染鹅大肠杆菌病的某鹅场为实例，简单阐述该疾病的诊断和治疗措施。

关键词：鹅大肠杆菌；鹅业；诊断；治疗

鹅大肠杆菌病（Goose E.coli disease，GED）是由鹅致病性大肠埃希氏杆菌所引起的一种局部或全身性感染的细菌性急性传染病，是当前危害养鹅业的主要疫病之一。鹅致病性大肠埃希氏杆菌可感染各个阶段的鹅，但14日龄以内的雏鹅最为易感。临床上该病可引起急性败血症、腹膜炎、纤维性心包炎、肿头综合症及肝周炎等病症，病死率较高，雏鹅死亡率可高达90%以上，同时由于抗生素类药物的滥用而导致的耐药菌株的出现进一步加大了鹅大肠杆菌病的防治难度，近些年我国鹅大肠杆菌病逐年上升，部分地区该病流行形势已十分严峻，严重阻碍了我国养鹅业的健康快速发展。2016年7月-8月间，本地区某鵝场数百只雏鹅出现精神沉郁、拉稀及大量快速死亡等临床症状。本试验对该鹅场送检的发病濒死雏鹅进行了病原菌的分离和鉴定，依据临床症状、剖检及分离鉴定，结果表明该分离株与大肠埃希氏杆菌相符，故将该分离株鉴定为鹅大肠埃希氏菌，并根据该分离菌株药敏试验结果，建议该鹅场选择高敏药物开展积极治疗，用药后鹅病死率逐渐降低，疫情得到了有效控制。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1病料 病料来自本地区某鹅场濒死发病雏鹅，剖检后无菌采集有典型病变的组织和心包积液等，低温保存备用。

1.1.2培养基及染色液 麦康凯培养基、马丁肉汤培养基和普通营养琼脂培养基等；革兰氏染色液。

1.1.3生化鉴定管及药敏片 生化微量反应管主要包括糖发酵试验、尿素酶试验、靛基质试验、VP试验、枸橼酸盐还原试验、MR试验、硫化氢试验等；16种常规药物的药敏片。

1.2方法

1.2.1细菌的分离及镜检 无菌条件下用接种环取少量病料接种于麦康凯培养基上，37℃恒温培养24h，观察菌落的生长情况。挑取红色单个菌落接种于普通营养琼脂培养基，37℃恒温培养24h，挑取单菌落进行革兰氏染色镜检。

1.2.2生化试验 将分离菌株的纯培养物进行乳糖、葡萄糖、麦芽糖和甘露醇等糖发酵试验，37℃恒温培养24h观察结果，同时将分离菌进行靛基质试验、VP试验、尿素酶试验、枸橼酸盐还原试验、硫化氢试验和MR试验等生化鉴定，分别接种到相应的微量发酵管中，37℃恒温培养48～72h观察结果。

1.2.3药敏试验 将分离菌株采用药敏纸片扩散法进行药敏试验，选取磷霉素、氟苯尼考、头孢噻肟、青霉素、庆大霉素、丁胺卡那、红霉素、先锋霉素、四环素、妥布霉素、恩诺沙星、利福平、菌必治、阿米卡星、环丙沙星和阿莫西林等16种常用抗菌药物，以期为本次鹅大肠杆菌病的防治提供科学的用药参考。无菌环境下用接种环挑取纯化好的分离菌，然后重复来回划线于营养琼脂培养基上，接着用无菌镊子将各种药敏纸片等均匀贴于涂好菌的培养基表面。16个药敏纸片分别贴于2个营养琼脂平板上，每个培养基上有8种药敏纸片。将平板倒置于37℃温箱中培养18～24h，测量抑菌圈直径并进行药物敏感程度的判定。

2结果与分析

2.1分离鉴定结果

麦康凯琼脂平板上菌落形态为圆形砖红色，隆起，边缘光滑湿润；在营养琼脂培养基上菌落形态为呈圆形灰白色，隆起，边缘光滑整齐；革兰氏染色镜检结果与大肠杆菌染色特性相符，即该分离菌株也是两端钝圆的革兰氏阴性中等大小的杆菌。

2.2生化鉴定结果

糖发酵试验结果显示该分离菌株能够发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖和甘露醇；靛基质试验和MR试验结果呈阳性；硫化氢试验、VP试验、尿素酶试验及枸橼酸盐还原试验结果呈阴性。根据第八版《伯杰氏细菌鉴定手册》，该分离菌株也符合大肠杆菌特性。

2.3药敏试验结果

药敏试验培养结果显示该分离菌对磷霉素、氟苯尼考、丁胺卡那和头孢噻肟4种抗菌药物为高度敏感；对庆大霉素、妥布霉素、菌必治和阿米卡星4种药物为中度敏感；对青霉素、红霉素、先锋霉素、四环素、恩诺沙星、利福平、环丙沙星和阿莫西林为低度敏感或耐药。

3诊断及治疗措施

根据药敏试验结果，对发病鹅群选用高敏药物氟苯尼考，然后按照一定比例添入饮水中进行治疗，并注意补充VC，连用5～7d。同时建议及时隔离发病鹅，对未发病鹅群使用大肠杆菌多价疫苗进行紧急接种。加强鹅场环境及食槽水槽等设施的消毒工作，每天进行彻底消毒1次，连续5d。加强日常饲养管理，保持鹅舍清洁卫生和通风。该鹅场积极开展治疗和预防等措施后，疫情得到了有效控制，病死率明显下降，无新发病例和死亡现象，鹅群精神状况好转，食欲逐渐恢复正常。

4小结

鹅大肠杆菌病是一种常见的细菌性传染病，鹅场饲养管理不合理是该病的主要原因之一。目前一些鹅场尤其是种鹅场大肠杆菌病较为严重，使其彻底净化存在一定难度。根据流行病学、临床症状、病料剖检和分离菌特性等综合判断，该养鹅场雏鹅为鹅大肠杆菌病，首选氟苯尼考进行有效治疗。此次鹅大肠杆菌疫情的发生原因，分析可能是该鹅场饲养密度过大，鹅舍卫生不达标，定期消毒工作不到位，使得饲养环境中带有致病菌和鹅群长期带菌，当鹅群在应激等可引起动物机体抵抗力降低的不良情况下，进而诱发大肠杆菌病。同时该鹅场在日常药物预防过程中存在超剂量用药、频繁换药等滥用抗菌药物的现象，使得该鹅场耐药性问题也比较突出。多价大肠杆菌疫苗进行免疫预防接种是预防鹅大肠杆菌病的主要措施，但在日常饲养过程中还应加强饲养管理，强化饲养环境卫生清洁，定期彻底消毒，一旦发病，切忌盲目用药，应采用合理选药、联合用药及轮换用药的用药模式；最好选用高敏药物开展及时的治疗。endprint