不同义齿清洁剂对义齿表面上白色念珠菌生物膜清洁效果的比较

刘渊君，刘 伟，张海兵，孙 洁，李学宽

（1．内蒙古医科大学第四附属医院口腔科，内蒙古 包头 014032；2．包头市第四医院口腔科，内蒙古 包头 014032）

本次研究的主要目的是比较不同义齿清洁剂对白色念珠菌生物膜的清洁效果，选取了2015年6月～2017年4月来我院口腔科就诊的62例义齿戴用者，采用五种不同的义齿清洁剂来清洁白色念珠菌生物膜，具体情况如下。

1 材料与方法

1.1 材料

微生物：白色念珠菌SC5314；5种义齿清洁剂和其他资料与设备。

1.2 方法

（1）培养白色念珠菌生物膜：解冻冻存得白色念珠菌并在沙氏葡萄糖琼脂培养基中接种，在37摄氏度二氧化碳培养箱中进行为期24小时的复苏培养；将单菌挑取出来并在10ml的酵母浸出粉胨葡糖糖培养基中转种，在30摄氏度温控培养摇床中放置并进行过夜培养；将菌体收集起来 ，利用磷酸盐缓冲液进行两次离心洗涤，最后在改良型RPMI1640培养基的帮助下进行重悬，利用倒置显微镜和血球计数板进行计数并将菌液浓度调整到1×106/mL个菌体；取上述溶液200 μL在96孔微量培养板和27摄氏度二氧化碳培养箱中，从而有助于白色念珠生物膜的形成。培养24小时候 ，随机选取3个已经接种的并将培养基弃去，利用200 μL磷酸盐缓冲液进行3次清洗，在空气中充分干燥以后将加入结晶紫溶液100 μL0.5%（w/v），作用5分钟后将该溶液弃并洗涤3次；然后利用倒置显微镜对染色后的微孔进行仔细的观察和拍照[1]。

（2）义齿清洁剂的清洁处理：生物膜形成后便可以将培养基弃去，利用200 μL磷酸盐缓冲液分别清洗每个孔三次，从而可以将未粘附菌除去。将保丽净、澳多-C、protefix和雅克菱剂型分别在40摄氏度、150毫升的无菌蒸馏水中溶解，待完全溶解后取200 μL在生物膜中放置，将浓度为20%的葡萄糖酸氯已定稀释到0.2%，同样取200 μL在生物膜中放置。每种义齿清洁剂需要重复浸泡6个附着生物膜的孔，在此基础上对阳性、阴性对照组进行设置。待达到规定浸泡时间以后，将义齿清洁剂弃去，通过洗涤将残余清洁剂除去。

（3）利用甲基四氮盐减低法则和结晶紫含量分别对生物膜代谢活性的改变和定量生物量的生物量进行科学测定。

1.3 观察指标

比较两种时间浸泡后生物膜活性减少率和生物量减少率。

1.4 统计学方法

应用SPSS 22.0来完成本次研究的数据分析。两组患者的护理结果的等级资料采用t检验，其他相关计数资料以相对数构成比（%）或率（%）表示，当P＜0.05时，两组差异显著，有统计学意义。

2 结 果

5中义齿清洁剂在两组浸泡时间中的活性和生物量减率，差异显著有统计学意义（P＜0 .05）。见表1。

表1 不同义齿清洁剂两种浸泡时间生物膜活性和生物量减少率的比较（±s）

表1 不同义齿清洁剂两种浸泡时间生物膜活性和生物量减少率的比较（±s）

保丽净 80.2±3.6 88.8±4.4 38.2±10.2 56.8±4.8澳多-C 23.4±3.3 83.2±1.6 8.7±6.2 34.7±3.2 prote fi x0.2%葡萄糖 81.3±1.0 82.9±1.2 22.0±2.6 29.2±5.7酸氯已定 65.5±1.8 58.8±3.3 34.2±3.0 36.3±1.8雅克菱 66.6±3.5 81.2±2.0 24.7±8.0 25.1±6.2

3 讨 论

本次研究中，在两种浸泡时间中，5中义齿清洁剂的活性减少率和生物量减少率之间差异显著，其中保丽净的分数最高，减少率分别达到了80%以上，上升幅度最大的是澳多-C，差异有统计学意义（P＜0.05）。

综上所述，利用保丽净义齿清洁剂来清洁白色念珠菌可以取得较好的清洁效果。

[1] 陆美言,胡书海,陆春伟.不同处理方法对3种义齿材料表面白色念珠菌生物膜清除效果的比较研究[J].口腔医学研究,2013,29(08):732-734.