赵 娟,段昌学,王 曦,刘一飞,赵 敏,韩洁茹,李正莉,赵 华,余牧航
(1.山西省农业科学院畜牧兽医研究所,山西 太原 030032;2.陕西省商洛市动物疫病预防控制中心,陕西 商洛 726000)
鸡传染性腔上囊病(IBD)是由病毒引起的主要危害鸡的免疫器官的一种急性、高度接触性的传染病。虽然目前鸡群免疫能够对本病起到良好的预防效果,但鸡群也仍有偶发感染,如若感染此病,多表现为拉稀,羽毛蓬松,精神不振等症状。单纯IBD感染鸡虽然死亡率不高,但因其腔上囊、脾脏等免疫器官受到严重损害,结果造成该鸡群严重的免疫抑制,致使此后对鸡群的任何免疫接种效果甚微或根本无效,增加了鸡群对多种疫病的易感性,鸡群感染率可达95%,造成的后果是严重的,产生的经济损失是无法估量的[1]。
目前针对IBD临床上多采用卵黄特异性抗体注射治疗,治疗效果较好,存活率达89%以上,但因其治疗后鸡只的腔上囊、脾脏等免疫器官的组织结构并没有完全恢复,IBDV严重破坏腔上囊中的B淋巴细胞,导致不同程度的免疫抑制,致使鸡体对病原体的免疫力低下而引起继发感染,并对其以后其他疫苗的免疫效果仍然会有较大的影响[2]。
本项目通过自制中药复方颗粒剂,饮水治疗IBD阳性鸡群,显微镜镜检存活鸡腔上囊、脾脏病理变化及组织修复状况,研究自制中药颗粒剂治疗IBD的效果及修复免疫器官损伤的作用。并因其天然性、价格低廉、使用方便、无应激反应等特点,具有较好的经济及社会效益。
1.1 中药颗粒剂 由山西省农业科学院畜牧兽医研究所中兽医药研究室课题组研制提供,由板蓝根、黄芪、党参、大青叶、白术、甘草、神曲、川芎、刺五加、鱼腥草等10多味中药组成。
1.2 被检动物 随机抽取25日龄IBD病鸡200只,随机分成2个组,即中药颗粒剂治疗组和自然耐过空白对照组各100只,于其治疗康复后,即35日龄时,每组随机抽取10只用于剖检采集病料。
1.3 方法 扑杀被检鸡,无菌采集各试验鸡腔上囊、脾脏和肝脏病料,眼观病变以后,用10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,切片,苏木素—伊红染色,组织切片于显微镜检查其病理组织学变化,并进行显微组织拍照直观比较自然耐过鸡和自制中药颗粒治疗康复鸡的免疫器官病理组织学变化。
2.1 自然耐过鸡免疫器官眼观病理变化 被检的IBD自然耐过鸡的免疫器官仍呈不同程度的病理性变化。
2.1.1 腔上囊 腔上囊不同程度肿大、质地柔软、颜色黄白,囊腔内黏液较多,有的浆膜和黏膜仍有出血点或出血斑。
2.1.2 脾脏 脾脏不同程度肿大、质地较软、表面和切面顔色暗红仍有针尖大小的黄白色坏死点。
2.2 自然耐过鸡免疫器官病理组织学变化
2.2.1 腔上囊 5只鸡腔上囊黏膜上皮变性、坏死、脱落、黏膜下层祼露,淋巴滤泡皮质部变薄,淋巴细胞稀少甚至消失,皮质部与髓质部界线不清,髓质部淋巴滤泡严重充血、出血,淋巴细胞明显减少,上皮样细胞呈弥散性或连片状增生,黏膜上皮脱落。上皮样细胞浆淡染或溶解,胞核浓缩或消失,呈大小不一的空泡样(如封二彩版图1), 间质增厚而松散,并出现较多的巨噬细胞,异嗜性白细胞和少量淋巴细胞、浆细胞,淋巴滤泡形态结构破坏(如封二彩版图2)。有的淋巴滤泡髓质严重毁坏,出现被红细胞、巨噬细胞充斥的腔泡(如封二彩版图3)。
2.2.2 脾脏 所有鸡脾脏内的脾小体出现不同程度性坏死,淋巴细胞明显减少甚至消失,变成一团一团淡红色半透明的蛋白样物质,脾窦扩张不同程度瘀血(如封二彩版图4),中央动脉周围淋巴套中淋巴细胞减少,网状细胞增生,血管内皮细胞肿胀增生,脾窦扩张瘀血,并含有数量不等的巨噬细胞、淋巴细胞和浆细胞(如封二彩版图5)。
2.3 自制中药颗粒剂治疗组鸡的免疫器官的眼观病理变化及病理组织学变化
2.3.1 自制中药颗粒剂治疗组鸡的免疫器官的眼观病理变化25日龄传染性腔上囊病病鸡,采用自制中药颗粒剂治疗痊愈后35日龄时,随机抽样扑杀10只鸡,进行病理学检查,其中有10只鸡的病理变化基本一致,表现免疫增强象征。
2.3.1.1 腔上囊 9只鸡的腔上囊体如黄豆粒、顔色灰白或黄白、质地较坚实,切面无黏液;1只鸡腔上囊缩小、质地较硬,切面湿润。
2.3.1.2 脾脏 所有被检治愈后35日龄鸡,脾脏眼观表现:脾脏体积不同程度增大、质地坚实,顔色褐红或暗红,切面有针柄大小的灰白色半球状突起。
2.3.2 自制中药颗粒剂治疗组鸡的免疫器官的病理组织学变化
2.3.2.1 腔上囊 8只鸡腔上囊淋巴滤泡体积增大,皮质与髓质界线清晰,皮质部增厚,淋巴细胞多而密集,髓质部扩张并含多量淋巴细胞和较多巨噬细胞,浆细胞,间质轻度充血,黏膜上皮整齐无损(如封二彩版图6)。1只鸡腔上囊被严重毁坏,淋巴滤泡,大量结缔组织增生,仅残存少量淋巴细胞和淋巴细胞结节,而被轻度损坏的淋巴滤泡代偿性肥大,皮质部和髓质部扩张,淋巴细胞增生,巨噬细胞和浆细胞增多,细胞密度增加,黏膜上皮增生脱落或呈乳头样突出黏膜腔。1只鸡腔上囊除有结缔组织增生,淋巴滤泡代偿性肥大,淋巴细胞、巨噬细胞和浆细胞代偿性增多以外,部分被损坏的淋巴滤泡中出现大小不等的囊肿样结构,囊壁为上皮样细胞,囊腔含少量黏液样物质(如封二彩版图7)。
2.3.2.2 脾脏 脾小体增生,数量增多,脾小体内所含细胞稠密而深染,并堆积成大小不等的圆形或椭圆形结节状,中央动脉周围淋巴套淋巴细胞增多,脾窦轻度充血。脾窦深度扩张,含有较多红细胞和大量巨噬细胞,淋巴细胞,脾小体增生,并含有大量的T.B淋巴细胞,巨噬细胞和浆细胞,中央动脉周围淋巴细胞增多,内皮细胞肿大,增生(如封二彩版图8)。
3.1 被检自然耐过鸡的腔上囊、脾脏,仍呈不同程度的病理性变化,病理变化典型而一致,主要免疫器官受到严重的破坏仍然存在,腔上囊有结缔组织增生,表明免疫机能降低,易引起继发性感染和疾病,影响鸡的生长发育及生长性能。
3.2 采用自制中药颗粒治疗康复后鸡的主要免疫器官形态结构和组织病变已消失,免疫细胞明显增生,数量增多。虽然个别康复鸡腔上囊的一些严重毁坏的淋巴滤泡被结缔组织所取代,但损伤较轻的淋巴滤泡代偿性肥大,淋巴细胞代偿性增生。这些变化表明,通过自制中药颗粒防治腔上囊病,可以促进腔上囊病鸡主要免疫器官的尽快修复,有利于病鸡免疫机能的恢复和提高。
3.3 现代药理研究表明,驱邪扶正的中药方剂除直接抑制病毒外,还能大幅度提高机体的免疫功能,增加机体免疫器官的重量,提高T、B淋巴细胞数量,促进干扰素的产生[3]。通过电子显微镜检测,表明该驱邪扶正中药方剂可在一定程度上抑制IBDV所致的细胞凋亡[4]。配方中应用的黄芪具有免疫刺激,抗病毒,抗氧化和抗肿瘤的作用,蕨麻中药中的多糖和皂苷被认为是具有生物活性的两种物质,黄芪多糖具有免疫调节效果而且无毒副作用的产生[5-8]。与本研究的相关结论一致。
志谢: 本实验由西北农林科技大学薛登民教授协作完成。