重庆市渝北区肺结核检测方法与感染现状分析

方娟

(重庆市渝北区人民医院检验科，重庆401120)

我国是一个结核分枝杆菌感染率较高的国家，随着抗结核分枝杆菌药物的广泛使用，结核分枝杆菌对传统的抗结核药物将在一定程度上出现了耐药[1-3]。世界卫生组织2015年全球结核病报告指出：2014年我国新发结核人数居全球第三(93万)，仅次于印度(220万)和印度尼西亚(100万)。2015年全国共报告肺结核患者864 015例，其中，涂阳患者244 343例，肺结核报告发病率为63.4/10万，涂阳报告发病率为17.9/10万，比2014年同期相比下降了2.4%。虽然我国结核的发病率整体有所下降，但对于结核的防治，仍应引起重视。肺结核为结核分枝杆菌感染中最为重要的一种病理类型，对临床肺结核患者实施规范有效地治疗有利于降低其死亡率，同时能有效防止耐药性结核分枝杆菌的发生[4-6]。

重庆市渝北区人民医院作为重庆市卫计委结核检测与治疗的定点医院，肩负全区结核病防治的重要任务，了解渝北区肺结核感染情况和治疗现状对肺结核有效防治具有重要意义，同时，也可为我国其他结核检测和治疗的基层定点医院在肺结核的防治上提供一定的参考。随着我院结核分支杆菌检测项目的开展，发现渝北区结核分枝杆菌感染，尤其是肺结核患者在发病率上有诸多特点，因此很有必要全面了解目前渝北区现行肺结核的发病情况、流行病学特点、治疗和预后情况，指导临床合理治疗，尽可能防止耐药性肺结核的发生。

1 资料与方法

1.1 一般资料收集2014年6月至2016年6月来渝北区人民医院感染科门诊就诊的疑似肺结核的初诊患者1 137例，最后经临床确诊为肺结核患者356例，肺结核诊断依据参照2013版的中华医学会《肺结核诊断和治疗指南》[7]。

1.2 痰标本采集初次就诊需将即时痰、夜间痰、清晨痰送检。取痰前，先用清水漱口多次，以清除口腔内的食物残渣及部分杂菌，用力咳嗽后自气管内咳出的痰盛于痰盒内送检，不得将唾液吐入痰盒，以免影响查痰结果。

1.3 仪器与试剂抗酸染液(珠海贝索生物技术有限公司)，结核分枝杆菌荧光定量PCR检测试剂盒(中山大学达安基因股份有限公司)，检测仪器为美国ABI7500荧光定量PCR仪。

1.4 方法结核分枝杆菌荧光定量PCR法通过提取痰液病原体的DNA，然后进行荧光定量PCR扩增，最后通过扩增曲线的CT值来判断痰液是否存在结核分枝杆菌。抗酸染色法通过制备痰涂片，然后酒精灯加热法进行抗酸染色，最后在显微镜下找到是否有染成红色的结核分枝杆菌来判断患者痰里是否查见结核分枝杆菌。所有检测方法的操作过程和结果判读都严格按照试剂盒说明书执行。

1.5 肺结核治疗满意度评价采用描述性流行病学分析方法分析患者性别、年龄、职业、治疗和预后情况。课题采用首次治疗总体满意度来对肺结核患者接受抗结核分枝杆菌治疗后的效果评价，具体指肺结核患者首次接受抗结核分枝杆菌治疗后咳嗽或咯血症状明显缓解，或者初治临床症状未明显缓解但调整治疗方案后咳嗽咯血症状明显缓解，以上两种情况均认为该患者首次治疗总体满意[8]。

1.6 统计学方法应用SPSS20.0统计软件对数据进行分析，各组间样本构成比和样本率的比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 荧光定量PCR法和痰涂片法的结核分枝杆菌检出率比较1 137例疑似肺结核患者中356例患者最终确诊为肺结核。其中抗酸涂片染色法检出阳性率为35.4%(126/356)。荧光定量PCR法阳性检出率为67.1%(239/356)，荧光定量PCR法显著高于常规涂片法，差异有显著统计学意义(χ2=71.78，P=0.001 3)。

2.2 肺结核患者性别和年龄分布情况356例肺结核患者中，男性247例(69.4%)，女性109例(30.6%)，男女比为2.27：1，男女结核发病率比较差异有显著统计学意义(χ2=106.99，P=0.001)。年龄段21～40岁结核患者最多，占总人数的44.1%，年龄段8～20岁结核发病率最低，占11.0%。不同年龄段肺结核的发病率比较差异有统计学意义(χ2=48.71，P=0.012)，见表1。

表1 渝北区肺结核患者年龄和性别分布情况(岁)

2.3 肺结核患者的职业分布情况本组肺结核患者所在职业的前五位分别为工人、农民、民工、学生和离退休人员，占所有肺结核患者的59.25%，其中以工人和农民所占比例最高，分别为18.3%和16.0%。五种不同职业的肺结核患者的发病率比较，差异具有统计学意义(χ2=35.72，P=0.023)，见表2。

2.4 肺结核患者的治疗和预后情况356例肺结核患者在我院感染科经过首次抗结核分枝杆菌的系统治疗后，咳嗽或咯血症状明显缓解者占93.8%(334/356)，初治症状未缓解的6.2%肺结核患者在调整治疗方案后临床症状有明显缓解，首次治疗的总体满意度为100%。所有患者经过两个疗程以上的系统治疗最终临床治愈339例，平均治愈率为95.2%，死亡7例，死亡率为2.0%，失败6例，失败率为1.7%，转入耐多药治疗4例，占1.1%。

3 讨论

重庆市渝北区人民医院作为重庆市卫计委渝北片区指定的结核病定点检测和治疗医院，肩负着本地区肺结核的诊断、治疗和预防。本研究通过系统调查和分析渝北区肺结核的感染情况和治疗现状以及实验室检查的准确性，发现目前医院采用的荧光定量PCR法和痰涂片法的阳性检测出率与文献报道基本一致，基本能满足我院临床需要[9-11]。我院痰涂片法阳性率为35.4%，略高于一般医院报道涂片阳性检出水平，可能与我院采用齐尼氏石碳酸碱性复红加热染色，严格的标本接收制度有关。我院疑似肺结核患者标本的采集严格要求患者取清晨痰、即时痰、夜间痰3份送检，并由临床护士辅助或监督采集，采集后痰标本应为血样、干酪样或黏液样，且痰量不少于3 mL，对于唾液样痰，痰液量不足3 mL者，严格执行退回标本，由临床重取送检。对于3份痰标本，任一份抗酸染色阳性，即可认为结核分枝杆菌阳性。我院严格的标本采集送检制度在一定程度上提高了结核分枝杆菌痰涂片的检出率，但从提高临床诊疗水平和充分让患者受益来看，以后应开展多种结核分支杆菌的检测新技术，如快速检测肺结核的DNA恒温扩增技术和能够区分结核分枝杆菌属于死菌还是活菌的结核分枝杆菌RNA恒温荧光扩增技术[12]，以提高肺结核患者结核分枝杆菌的检出率，尽可能实现100%的实验室检出率，指导临床对肺结核患者实现快速诊断，规范治疗，提高预后。

2014年6 月至2016年6月来重庆市渝北区人民医院确诊的356肺结核患者中以男性为主；年龄段以21～40岁最多，占总人数的44.1%；职业分布以工人和农民为主，分别占18.3%和16.0%。分析其原因可能为渝北地区工业发达，有大量工厂，人员较多，容易产生相互感染，而部分农村由于经济条件稍差，感染肺结核后未及时就诊或未进行规范治疗，导致其占有较大比例。从调查数据来看，渝北区肺结核患者以青壮年为主，青壮年正是人生发展黄金阶段，承担来自家庭和社会的责任，一旦发生肺结核，将直接影响患者劳动能力，病情严重者可能导致死亡。因此，应引起高度重视，尽可能早期、快速、准确诊断出肺结核，并让肺结核患者接受规范治疗，提高治疗效果[13]。就目前来说，渝北区肺结核患者的临床治疗效果总体较好，首次抗结核治疗的总体满意度为100%，平均治愈率为95.2%。我院在治疗过程中也发现一些耐药的结核分枝杆菌(占1.1%)，应引起临床高度重视。同时，我院检验科今后应开展结核的耐药性检测，及时有效检出耐药株，以指导临床合理治疗耐药肺结核，提高患者生活质量。

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表2 渝北区356例肺结核患者前五位的职业分布情况

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