新生儿支气管肺泡灌洗液中VEGF、IL-8和TGF-β1与支气管肺发育的关系

程林 张应金 黄冠芬 张金风

BPD又称慢性肺疾病(CLD), 是早产儿最常见的长期并发症之一。BPD成为早产儿疾病和死亡的重要原因之一, 同时BPD还成为新生儿住院时间延长、再住院、神经发育障碍的重要病因, BPD越来越受到关注［1］。但BPD的发生机制尚不完全清楚, 影响该病的诊治［2］。最新的研究显示, 肺纤维化是BPD发生发展的重要病理表现, 理论上寻找肺组织纤维化的早期预测因子, 指导疾病的治疗, 可以改善患儿的预后［3］。本次研究尝试检测新生儿支气管肺泡灌洗液中VEGF、IL-8、TGF-β1水平, 探讨其与支气管肺发育之间的关系, 寻找支气管肺发育不良的临床预测因子, 为支气管肺发育不良的早期干预及治疗提供可靠的理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年1月～2018年1月收治的30例早产BPD新生儿作为BPD组, 另选同期30例早产非BPD新生儿作为对照组。支气管发育不良诊断标准：于纠正胎龄36周或出院时有呼吸急促, 三凹征、啰音, 仍需氧疗, 且有典型的胸部X线表现如网状、囊泡状及纤维化等情况。纳入标准：①胎龄27～32周, 早产；②临床资料完整；③家属知情同意。排除标准：①患有先天性缺陷或遗传代谢病；②家属拒绝参与研究；③出生后72 h内死亡；④接受过促胎肺成熟治疗；⑤除BPD外无全身感染等严重并发症(仅BPD组有BPD, 对照组亦无BPD)。BPD组中男16例、女14例,胎龄27～32周, 平均胎龄(30.1±1.6)周。对照组中男17例、女13例, 胎龄27～32周, 平均胎龄(30.4±1.6)周。两组新生儿性别、胎龄等一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 方法 留取标本：两组新生儿出生后7、14、21、30 d采用非纤维支气管镜支气管肺泡灌洗法(bronchoalveolar lavage,BAL)吸取肺泡灌洗液, 离心处理(4℃, 500 r/min, 10 min)取上清, 置-80℃冰箱备用。肺泡灌洗液中VEGF、IL-8和TGF-β1测定： 取两组肺泡灌洗液标本, 以ELISA进行肺泡灌洗液中VEGF、IL-8和TGF-β1含量测定。

1.3 观察指标 比较两组出生后7、14、21、30 d肺泡灌洗液中VEGF、IL-8和TGF-β1水平, 观察BPD组不同时间的各指标水平变化情况。

1.4 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件进行数据分析。计量资料以均数±标准差()表示, 采用t检验；计数资料采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 VEGF水平 BPD组出生后7、14、21、30 d肺泡灌洗液中 VEGF水平分别为 (0.39±0.16)、(1.84±0.22)、(2.98±0.21)、(1.86±0.34)μg/L, 对照组则为 (0.32±0.15)、(0.63±0.21)、(0.50±0.17)、(0.46±0.15)μg/L。两组出生后 7 d的 VEGF 水平比较差异无统计学意义(P＞0.05)；BPD组出生后14、21、30 d的VEGF水平高于对照组(P＜0.05)；BPD组出生后VEGF水平呈先上升后下降趋势, 相邻时间指标水平比较差异具有统计学意义(P＜0.05)。

2.2 IL-8水平 BPD组出生后7、14、21、30 d肺泡灌洗液中 IL-8水平分别为 (27.5±4.5)、(36.3±4.2)、(61.4±8.2)、(56.7±9.1)μg/ml, 对照组则为 (19.3±5.1)、(18.4±4.5)、(8.5±6.1)、(19.6±5.4)μg/ml。BPD 组 出 生 后 7、14、21、30 d 的IL-8水平高于对照组(P＜0.05)；BPD组出生后IL-8水平呈先上升后下降趋势, 相邻时间指标水平比较差异具有统计学意义 (P＜0.05)。

2.3 TGF-β1水平 BPD组出生后7、14、21、30 d肺泡灌洗液中 TGF-β1分别为 (36.1±4.2)、(44.2±9.1)、(54.4±10.2)、(43.1±9.5)μg/ml, 对照组则为 (30.6±4.0)、(32.3±3.6)、(32.3±3.5)、(31.6±5.1)μg/ml。BPD 组 出 生 后 7、14、21、30 d 的TGF-β1水平高于对照组(P＜0.05)；BPD组出生后TGF-β1水平呈先上升后下降趋势, 相邻时间指标水平比较差异具有统计学意义(P＜0.05)。

3 讨论

VEGF是调节肺组织发育的关键因子, 具有调节肺血管发育、肺组织损伤修复。IL-8是一个重要的炎性介质和免疫调节因子, 其与肺损伤疾病、持续存在的炎症反应关系密切。TGF-β1在细胞的生长、分化、免疫调节及细胞外基质合成调节中具有重要作用, 致纤维化作用最突出, 在肺纤维化的发生和持续过程中均发挥重要作用［4］。

本次研究显示, 相较于未发生BPD的对照组, BPD组出生后 14、21、30 d的 VEGF、IL-8、TGF-β1均明显偏高 , 三者的峰值分别达到 (2.98±0.21)μg/L、(61.4±8.2)μg/ml、(54.4±10.2)μg/ml, 提示BPD患儿存在明显的纤维化、血管病变、炎症反应。其他学者也得出类似的研究, BPD对象的相关指标与正常早产儿差异显著, 指标恶化［5,6］。但需要注意的是, 指标与本次研究存在一定的差异, 这可能与纳入标准、治疗方式、疾病严重程度差异有关。如一项研究显示, 急性期的BPD患儿肺泡灌洗液中的高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平为 (7.35±0.56)μg/ml［7］。一项因素分析显示 , BPD 影响因素众多, 与羊水污染、肺表面活性物质、机械通气、胎龄关系密切, 治疗方式对BPD发生、严重程度关系密切［8］。从本次组内对比来看, BPD组患者的指标呈快速上升趋势,提示BPD一旦发生, 会出现持续进展情况, 通过监测指标的变化, 一定程度上可以判断疾病发生进展的风险［9,10］。

需要注意的是, BPD组与对照组出生后7 d的VEGF水平差异无统计学意义(P＞0.05), 这可能与样本例数较少有关,也可能与血管病变在BPD早期不显著有关。BPD早期主要表现为肺泡数目减少、体积增大、结构简单化。监测VEGF可能更有助于判断疾病严重程度与进程。

总之, 新生儿支气管肺泡灌洗液中VEGF、IL-8和TGF-β1水平与支气管肺发育关系密切, 监测这些指标可用于疾病风险预测、诊断、严重程度判断、疾病阶段分析。今后需要进一步扩大样本量, 明确指标变化范围。