同工酶和SSR分子标记技术在亲缘关系鉴定中的应用

石祥鹏

摘要：作物种质资源亲缘关系的确定可以为种质资源的有效利用和优良品种的选育提供理论依据，本文综述了同工酶和SSR分子标记技术在亲缘关系鉴定中的应用，并对上述两种技术在育种中的应用进行了展望。

关键词：亲缘关系;同工酶;SSR标记

0 前言

微卫星（microsatellite）又称简单序列重复（simplesequence repeats，SSR），是指在真核生物整个基因组中存在序列较短且重复出现的核苷酸序列。SSR的多态性主要由于两端序列的重复序列数目或重复程度不同导致的，且是相对保守的单拷贝序列，因此可根据侧翼序列设计引物。

遗传应用上，同工酶原理在于其功能相同但结构不同，由于结构中氨基酸序列或组成有差异致使同工酶在电泳时迁移率存在差异。分离方法主要有电泳法、层析法、酶学法和免疫学法等，其中以电泳法应用最为广泛。同工酶在不同的生理状态、发育时期、不同品种中的活性、数目都变化较大，其电泳图谱在一定条件下较为稳定，具有种属专一性。

文中笔者就SSR分子标记和同工酶在种质资源的遗传多样性正确评价和合理利用进行概述。

1 SSR分子标记

SSR分子标记具有较高的多态性、共显性，在基因组上分布均匀、随机，对DNA样本质量要求不高，遗传信息量大等特征，因而在遗传多样性分析方面得到广泛应用。

艾先涛等利用SSR标记对新疆自育陆地棉品种进行遗传多样性分析，得出品种间具有相对较高的遗传相似性，总体上遗传多样性不丰富，表明新疆自育陆地棉品种间亲缘关系较近。陆敏佳等利用SSR引物对41个藜麦种质的多态性及其亲缘关系进行了分析，结果表明，共检测出139个等位基因条带，平均为8.7;16对引物的多态信息含量（PIC）变幅为0.208～0.432，平均为0.366，表明来源于不同地区的遗传距离较远，遗传基础较广泛。

2 同工酶

同工酶分析技术是通过电泳和组织化学方法进行特异性染色而把酶蛋白分子分離，并将其位置和活性直接在染色区带以酶谱的形式标记出来。DNA上结构基因的遗传信息决定了同工酶多肽链结构中的氨基酸排列顺序，借助于酶谱分析的方法识别控制谱带表达的基因，从而从本质上揭示材料间的遗传差异性。

刘承源等利用同工酶对月季种质资源的亲缘关系及杂种真实性进行分析，在相对迁移率为0.264-0.858的位点处共获得7条酶带，其中共有酶带3条，特征酶带4条，表明月季种质间遗传多样性丰富的同时，又存在一致性。李永祥等对3种性别野牛草幼叶和幼穗的3种同工酶（过氧化物酶、超氧化物歧化酶、多酚氧化酶）进行酶谱分析，结果表明叶片的过氧化酶、多酚氧化酶可以用来对野牛草进行早期性别鉴定。

3 展望

同工酶和SSR分子标记技术在育种中主要用于种质资源间遗传多样性分析、聚类划分群体等方面，经过长时间的摸索、探究，已经形成较为成熟的技术体系;单核苷酸多态性（SNP）技术的出现表明未来检测手段应朝着更加精确、细致的方向发展。

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