VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统的应用及鉴定结果分析

叶桦秀 李丽丽 江莉莉 福建省老年医院检验科 （福建 福州 350003）

利用VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统进行细菌的鉴定，相比于传统的细菌鉴定方法，具有操作简单、耗时短的优势，同时也能克服人为判断的准确性较差的弊端。现阶段，VITEK 2 Compact微生物全自动分析系质控菌株统已被广泛应用于医学领域和食品安全领域。基于此，为探究VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统对微生物鉴定结果的准确性，本次研究对3株ATCC标准菌株，28株质控菌株和64株本实验室内临床分离纯化菌株进行检测，并于常规鉴定方法的结果相比较，实现验证VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统总体符合率的目的[1]。

1.材料与方法

1.1 鉴定样本来源

ATCC标准菌株是本次试验主要的鉴定样本来源，主要包括ATCC25922大肠埃希菌、ATCC25923金黄色葡萄球菌和ATCC27853铜绿假单胞菌。2014年～2017上半年福建省临床检验中心提供的28株质控菌株是本次研究的主要菌株样本，以回报结果为准。盲样考核菌株为本实验室内临床分离菌株，来自肺部、尿路、肠道感染及血液、胆汁、脓汁分离的致病菌及条件致病菌。包括不动杆菌、假单胞菌、克雷伯氏菌、沙雷菌、枸橼酸菌、黄杆菌、埃希菌、沙门菌、志贺菌、变形杆菌、普罗威登斯菌、产碱杆菌、李斯特菌、葡糖球菌、肠球菌、产碱杆菌、弧菌属、气单胞菌、邻单胞菌、假丝酵母菌20个属共95株菌株，经血平板分离纯化。

1.2 鉴定仪器和鉴定卡

本次鉴定仪器所选用的是VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统法国梅里埃公司生产的鉴定卡以及鉴定卡的配套试剂。其中，鉴定卡的种类包括革兰氏阴性细菌鉴定卡GN、革兰氏阳性细菌鉴定卡GP和酵母菌鉴定卡YST。

本次鉴定器材选用手工鉴定生化反应培养基和念珠显色培养基，鉴定血清选用的是沙门菌诊断血清和志贺菌诊断血清，在试验过程中，注重对鉴定血清的有效期进行控制。

1.3 鉴定方法

依据VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统及配套GN、GP、YST鉴定卡的标准操作规程，对95株菌株，运用VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统和常规手工鉴定的方法分别验证。VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统鉴定分辨率＞85%的为可信鉴定结果，鉴定分辨率在50%至84%之间的菌株，再送至外院运用梅里埃VITEK MS质谱仪加以佐证，确定总体符合率，并依据第四版《全国临床检验操作规程》进行常规的手工鉴定，此外，应用念珠显色培养基鉴定酵母菌。

表1 VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统鉴定结果符合率

2.结果

2.1 鉴定时间

所有参与鉴定的菌株忽略在培养阶段的时间。应用VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统，革兰阴性菌鉴定卡在10h内获得鉴定结果，革兰阳性菌鉴定卡在8h内获得鉴定结果，酵母菌鉴定卡在18h内获得鉴定结果。常规鉴定方法于24h后观察鉴定结果。

2.2 符合程度

将通过VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统鉴定的结果与常规鉴定结果进行对比发现，VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统对95株菌株的鉴定符合率为96.9%，标准菌株鉴定结果的符合率为100%，盲样考核菌株鉴定结果的符合率达到了95.3%，质控菌株鉴定结果的符合率达到了97.5%，依据菌株的性质来看，革兰阳性菌鉴定结果的符合率为97.9%，革兰阴性菌的符合率为95.2%，酵母菌的符合率100%。

2.3 鉴定结果分析

本次研究利用VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统对所选取的95株菌株共测试了128次，鉴定结果总体符合率为96.9%，其中，标准菌株的生化特性显著且稳定，符合率为100%，体现了VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统的重复性和稳定性较高。革兰阴性菌中的3例菌株不符合鉴定结果，经梅里埃VITEK MS质谱仪加以鉴定确认，为质控菌株中的多杀巴斯德菌和盲样考核菌株中的副溶血性弧菌及无丙二酸柠檬酸杆菌，系统鉴定的分辨率均低于85%，本次研究所鉴定的95株菌株除了沙门菌和志贺菌需要另外进行血清学的试验辅助从而实现对细菌种类的判别外，其余93株菌株均可利用VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统直接鉴定。革兰阳性菌中的停乳链球菌似马亚种系统鉴定分辨率是50%，为低分辨率。酵母菌符合率为100%，鉴定菌株为白色假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌，此四种菌为临床酵母菌感染中的常见菌，也是念珠菌显色培养基可鉴定的范畴。

3.讨论

现阶段，VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统拥有6种不同微生物的鉴定卡，细菌鉴定结果采用GB推荐生化鉴定显色法，大于500种可鉴定细菌[2]，在临床试验过程中，经常运用革兰氏阴性细菌鉴定卡GN和革兰氏阳性细菌鉴定卡GP进行细菌鉴定工作，同时，酵母菌鉴定卡YST在细菌鉴定中应用的次数也较多。应用VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统可对临床感染中的多数病原菌进行检测，从而提升疾病的预防和诊治能力。直接获取鉴定结果，所需要的时间平均为6～8个小时，相比于常规的鉴定方法来说，耗时缩短了许多，有效提升了鉴定的效率[3]。因此，采用VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统进行微生物的鉴定具有十分重要的现实意义，被临床实验室广泛应用。本实验室的鉴定结果显示，念珠菌显色培养基和VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统对上述四种酵母菌均有较高分辨率和符合率。3例列为不符合的革兰氏阴性菌，多杀巴斯德菌、副溶血性弧菌及无丙二酸柠檬酸杆菌的系统分辨率均低于85%，需以辅助试验加以确认。表明VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统对微生物鉴定的结果还是较为准确。但对少数疑难细菌，在鉴定时可能会出现偏差。在鉴定的过程中，菌株种类复杂，试剂浓度不合格以及菌株的培养时间不一致都会对鉴定结果的符合率造成影响。因此，在出现问题的时候应对上述可能引发鉴定结果符合率下降的因素进行逐一排查，并定期检查鉴定仪器、鉴定卡片及配套试剂，确保其在有效期内使用，同时应开展鉴定技术培训，提升鉴定人员对VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统的操作熟练程度和技术水平，实现人工鉴定方法和利用VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统进行鉴定的方法相结合，从而形成参照关系，有利于提升微生物鉴定结果的准确性[3]。

鉴定结果表明，VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统在选择所需鉴定菌株的过程中，应注重选择培养时间较短的菌株，同时要将菌株进行分离，分离时间约为24h，从而提升鉴定结果的准确性。同时，在贮存菌株的过程中，应保持适宜的温度，避免反复冷冻和融化的现象，并牢记菌株的保存期限。研究结果表明，李斯特菌、耶尔森菌鉴定结果的符合率随时间变化下降不甚明显，副溶血性弧菌和金黄色葡糖球菌鉴定结果的符合率与时间的变化呈现负相关的发展趋势，即时间越长，副溶血性弧菌和金黄色葡糖球菌鉴定结果的符合率越低。由此可见，保存时间过长和反复融化和冷冻都会对微生物的特性造成影响，进一步对鉴定结果造成影响[4]。综上所述，利用VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统进行菌株的鉴定，能够确定致病菌的种类，为合理选择治疗法方法奠定理论基础。具有较高的鉴定符合率，值得被广泛推广和应用。同时，在鉴定的过程中，应注意结合手工鉴定的方法对鉴定结果进行复查，从而提升鉴定的准确性[5]。

4.结论

研究结果表明，利用VITEK 2 Compact微生物全自动分析系统对微生物进行检测符合率较高，提升了临床病原菌的诊断与治疗的及时性和准确性。

[1]丁秀荣,刘志忠,陈铭,等.VITEK2Compact全自动微生物鉴定系统对无名念珠菌的错误鉴定及文献回顾[J].中国卫生检验杂志,2016,26(13):1855-1857.

[2]杨晶,王伟欢.VITEK2Compact系统的应用及鉴定结果分析[J].中国卫生检验杂志,2016,26(18):2643-2645.

[3]陈蓉,居颺,刘战民.3种鉴定系统在微生物室间质量评价中的应用和比较[J].检验医学,2017,32(5):415-420.

[4]Gray TJ,Kong F,Jelfs P,et al.Improved identification of rapidly growing mycobacteria by a 16S-23S internal transcribed spacer region PCR and capillary gelelectrophoresis[J].PLo S One,2014,9(7):102290.

[5]叶乃芳,凌华志.16S r RNA 序列分析技术对临床标本中疑难细菌的鉴定[J].安徽医科大学学报,2015,50(7):1000-1003.