血清及房水中VEGF、IL-6与新生血管性青光眼的相关性

凌佼佼，杨芳，洪斌，邵杰

(湖北医药学院附属人民医院眼科，湖北 十堰 442000)

血清及房水中VEGF、IL-6与新生血管性青光眼的相关性

凌佼佼，杨芳，洪斌，邵杰

(湖北医药学院附属人民医院眼科，湖北 十堰 442000)

目的探讨血清及房水中血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素-6(IL-6)与新生血管性青光眼(NVG)的关系。方法选择2013年2月至2016年10月期间在湖北医药学院附属人民医院眼科接受治疗的NVG患者22眼为观察组，同期住院原发性慢性闭角型青光眼患者25眼为对照组，同期住院白内障患者25眼为正常组，比较三组患者血清及房水中VEGF、IL-6水平。结果观察组患者血清与房水中VEGF、IL-6水平分别为(545.41±156.49)ng/mL、(292.23±23.65)pg/mL，明显高于对照组的(323.21±52.32)ng/mL、(105.23±15.21)pg/mL与正常组的(175.31±19.56)ng/mL、(88.23±12.78)pg/mL，而对照组患者血清与房水中VEGF、IL-6水平明显高于正常组，差异均有统计学意义(P＜0.05)；观察组患者仅房水中VEGF与IL-6呈显著正相关(r=0.629，P=0.007)。结论NVG患者血清及房水中VEGF、IL-6均显著升高，但仅房水中VEGF与IL-6呈显著正相关，高水平的VEGF、IL-6相互作用，能够促进新生血管的产生，进而导致NVG的发生。

新生血管性青光眼；血管内皮生长因子；白细胞介素-6

新生血管性青光眼(neovascular glaucoma，NVG)是一种以难以控制的高眼压伴剧烈眼痛为主要临床特征的眼科疾病，该病发病原因较为复杂，具有难治性及顽固性的特点，致盲性较高，给患者身心带来严重危害[1]。NVG的病理生理学改变主要包括虹膜的新生血管以及房角的纤维血管膜形成导致房角粘连、房水外流受阻、眼内压增高。该病多继发于视网膜静脉阻塞、糖尿病视网膜病变、眼缺血综合征等眼后段广泛缺血[2]。近年来随着免疫学、分子生物学的发展，对该病的认识更加深入，目前认为NVG的发生发展与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、白细胞介素-6(interleukin，IL-6)等细胞因子及受体之间存在着较为密切的关系[3-4]。本研究通过检测NVG患者血清及房水中VEGF、IL-6的含量，探讨其在NVG发生与发展中的作用，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2013年2月至2016年10月期间湖北医药学院附属人民医院眼科接受治疗的NVG患者22例22眼为观察组，其中男性10例10眼，女性12例12眼；年龄28～69岁，平均(42.3±3.9)岁。上述患者经裂隙灯、眼压计、前房角镜等检查确诊NVG，且眼压均在21 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)以上，给予常规降压治疗无效。原发疾病为糖尿病视网膜病变8例，视网膜中央静脉阻塞7例，视网膜静脉周围炎3例，眼缺血综合征2例，其他2例。选择同期住院治疗的原发性慢性闭角型青光眼患者25例25眼为对照组，其中男性12例12眼，女性13例13眼；年龄27～71岁，平均(45.3±3.7)岁。给予裂隙灯显微镜、前房角镜、眼压计等检查确诊。同期住院治疗的白内障患者25例25眼为正常组，其中男性9例9眼，女性16例16眼；年龄33～73岁，平均(48.3±3.9)岁，给予裂隙灯显微镜、前房角镜、眼压计等检查确诊。上述所有患者均排除合并心肺等重大脏器疾病、严重肝肾功能不全、肿瘤、血液系统疾病、年龄相关黄斑变性、既往眼部手术史等。本研究经我院医院伦理委员会批准，患者及家属对研究均知情同意，签署知情同意书。三组患者在年龄、性别、基础疾病等方面比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 标本采集

1.2.1.1 血清标本采集 患者入院后抽取清晨空腹肘静脉血3 mL入促凝管，在4℃低温条件下于离心机内以2 000 r/min的转速离心10 min，取血清0.3 mL，置无菌Eppendof管内并标记，-20℃低温冰箱冻存备测。

1.2.1.2 房水标本采集 所有患者给予眼科手术治疗，并于术中采集房水标本，利用25#注射器针头在距离角膜缘内1 mm处穿刺前房，抽取房水0.2 mL，置无菌Eppendof管内标记，-70℃超低温冰箱冻存备测。操作中注意避免触及虹膜、晶状体、角膜内皮，同时避免反射性渗血。

1.2.2 试剂、仪器及检测方法人VEGF检测所用ELISA试剂盒采用美生物工程有限公司生产，人IL-6检测所用ELISA试剂盒采用美国Genzyme公司生产，检测仪器为奥地利ClinBio128型酶标仪，检测方法为酶联免疫吸附法。根据反应后标本在450 nm吸光度并结合标准曲线得出浓度值，VEGF单位为ng/mL，IL-6单位为pg/mL。所有设备操作均严格按照试剂盒说明书进行。

1.3 统计学方法应用SPSS19.0统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差(x-±s)表示，两组均数比较采用t检验，多组均数比较采用方差分析，两变量相关性采用直线相关分析，均以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 三组患者血清中VEGF、IL-6水平比较 观察组患者血清中VEGF、IL-6水平均明显高于对照组与正常组，对照组患者血清中VEGF、IL-6水平明显高于正常组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 三组患者血清中VEGF、IL-6水平比较(±s)

表1 三组患者血清中VEGF、IL-6水平比较(±s)

注：与对照组比较，at=6.695 5，dt=32.627 4，P＜0.05；与正常组比较，bt=11.738 7，ct=13.239 2，et=37.402，ft=4.278 6，P＜0.05。

组别 例数VEGF(ng/mL)IL-6(pg/mL)观察组对照组正常组F值P值22 25 25 545.41±156.49ab 323.21±52.32c 175.31±19.56 94.476 79 0.000 0 292.23±23.65de 105.23±15.21f 88.23±12.78 955.319 6 0.000 0

2.2 三组患者房水中VEGF、IL-6水平比较 观察组患者房水中VEGF、IL-6水平均明显著高于对照组与正常组，对照组房水VEGF、IL-6水平高于正常组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表2。

表2 三组患者房水中VEGF、IL-6水平比较(s)

注：与对照组比较，at=66.444 8，dt=45.580 9，P＜0.05；与正常组比较，bt=81.382 8，ct=21.577 5，et=45.580 9，ft=13.171 5，P＜0.05。

组别 例数VEGF(ng/mL)IL-6(pg/mL)观察组对照组正常组F值P值22 25 25 1 336.85±70.12ab 312.26±30.25c 165.28±15.65 4 919.134 0.000 0 691.56±52.32de 169.58±21.96f 92.11±19.56 2 151.094 0.000 0

2.3 血清及房水中VEGF与IL-6水平的相关性 观察组患者血清及房水中VEGF与IL-6水平呈正相关(r=0.629、0.392，P＜0.05)；对照组与正常组患者血清及房水中的VEGF与IL-6水平无明显相关性(r=0.089、0.068，P＞0.05；r=0.076、0.053，P＞0.05)。

3 讨 论

NVG属于继发性青光眼的一种，该病主要特征即为虹膜表面、房角新生血管形成，同时伴有纤维血管膜形成，从而导致虹膜变红。随着病情进展，小梁网可被新生的血管膜遮盖并堵塞，进而导致眼压增高，继发性开角型青光眼便由此发生。至疾病的晚期，由于新生纤维血管膜的收缩，可造成虹膜前粘连、房角闭锁，进而导致继发性闭角型青光眼的发生[5]。NVG的主要病因，目前认为与患者的长期眼内的慢性炎症以及高眼压密切相关，上述因素所产生的刺激可导致视网膜循环障碍甚至缺血缺氧，而缺血缺氧则可导致大量细胞因子的释放，从而使细胞因子之间的平衡被打破，进一步促进新生血管的生长[6]，周而复始，恶性循环，病情加重。一般来讲，NVG病情多较重，且治疗起来较为顽固。

VEGF又被称为血管调理素，在目前所发现的内皮生长因子中，VEGF是唯一能够特异的对血管产生作用的一种[7]。研究发现，较高浓度的VEGF能够诱导受体的基因转录，而其受体则在新生血管上的分布更为密集，这也就是说，VEGF能够特异性的作用于增殖状态下的血管内皮细胞，同时也是目前发现的最强、最专一的能够刺激内皮细胞增生的细胞因子[8]。血管异常增殖、缺血缺氧可诱导VEGF高表达。研究显示，NVG的发生与视网膜内VEGF的mRNA表达增加密切相关，同时与眼内VEGF浓度增高也存在一定关联[9]。本研究显示，观察组房水VEGF明显增高，这一结果表明，房水中异常增多的VEGF在NVG的发生过程中可能发挥了重要作用。另有研究报道，VEGF的mRNA与蛋白水平于新生血管形成之前表现为增高，而在新生血管退变以后则表现为下降，且新生血管的形成部位多在VEGF的高表达区域[10]。本研究显示，对照组房水VEGF浓度虽然高于正常组，但低于观察组，说明增高的眼压可能是诱导眼内VEGF浓度增高的一个重要因素。

IL-6可作为炎症介质参与炎症反应，也能够对造血细胞的生长、分化等产生刺激作用。研究提示，IL-6可因低氧诱导产生，这一特点与VEGF相类似，同时也可作为新生血管因子在体内发挥作用[11]。IL-6在NVG的发病机制中参与新生血管免疫球蛋白的形成。本研究显示，观察组IL-6明显增高，说明IL-6在新生血管、继发性青光眼的发生发展过程中发挥了一定的作用，同时也提示NVG的发病过程中有炎症及免疫机制的参与。本研究通过对VEGF、IL-6两项指标的直线相关分析发现，观察组房水VEGF水平与IL-6水平呈显著正相关。由此可推测，在NVG发生发展过程中，房水VEGF与IL-6可能存在着相互促进的作用。IL-6诱导新生血管的生成可通过上调本VEGF的表达间接发挥作用。本研究中观察组血清VEGF、IL-6水平均高于对照组与正常组，这一结果的出现可能与入选患者中糖尿病患者居多有关。2型糖尿病患者血清中VEGF、IL-6含量显著高于正常人[12]。

综上所述，NVG患者血清及房水中VEGF、IL-6均显著升高，高水平的VEGF、IL-6可促进新生血管的产生，其病因学、免疫学、分子生物学的研究对临床诊断具有重要的价值。

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Relationship between serum and aqueous humor VEGF,IL-6 and neovascular glaucoma.

LING Jiao-jiao,YANG Fang,HONG Bin,SHAO Jie.Department of Ophthalmology,People's Hospital Affiliated to Hubei University of Medicine,Shiyan 442000,Hubei,CHINA

ObjectiveTo discuss the relationship of serum and aqueous humor vascular endothelial growth factor(VEGF)and IL-6 to neovascular glaucoma(NVG).MethodsA total of 22 patients with NVG,who admitted to Department of Ophthalmology of People's Hospital Affiliated to Hubei University of Medicine from February 2013 to October 2016,were selected as the observation group.Meantime,25 patients with chronic primary angle-closure glaucoma and 25 patients with cataract were respectively enrolled as the control group and the normal group.The levels of VEGFand IL-6 in serum and aqueous humor of the three groups were contrasted and analyzed.ResultsThe levels of VEGF and IL-6 in serum and aqueous humor in the observation group were(545.41±156.49)ng/mL and(292.23±23.65)pg/mL,respectively,which were significantly higher than(323.21±52.32)ng/mL and(105.23±15.21)pg/mL in the control group and(175.31±19.56)ng/mL and(88.23±12.78)pg/mL in the normal group(P＜0.05);the levels of VEGF and IL-6 in serum and aqueous humor in the control group were significantly higher than the normal group(P＜0.05).There was a significantly positive correlation between VEGF and IL-6 in aqueous humor in the observation group(r=0.629,P=0.007).ConclusionVEGF and IL-6 in serum and aqueous humor in patients with NVG are significantly increased,and there is a significantly positive correlation between VEGF and IL-6 in aqueous humor.The interaction of high levels of VEGF and IL-6 can promote angiogenesis,and lead to the occurrence of NVG.

杨芳。E-mail：18372650399@139.com

Neovascular glaucoma(NVG);Vascular endothelial growth factor(VEGF);Interleukin-6(IL-6)

R775

A

1003—6350（2017）23—3869—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.23.027

2017-05-23)