蜂胶胶囊增强免疫功能的研究

于荣贤　王祖忠　刘兵　余玉芳　张勇

[摘要]目的：探讨蜂胶胶囊对小鼠免疫功能的影响。方法：分别以175、350、700mg/kgBW剂量的蜂胶给小鼠连续灌胃30d后，对增强免疫能力的功能评价指标进行检测。结果：蜂胶胶囊能够明显提高小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能以及小鼠单核一巨噬细胞功能。结论：蜂胶胶囊具有增强免疫力的功能。

[关键词]蜂胶；保健食品；免疫功能

蜂胶，工蜂采集的植物树脂与其上颚腺、蜡腺等分泌物混合形成的具有粘性的固体胶状物。近年来，对蜂胶的有效成分和生物学功能的研究取得了很大的进展，人们已从蜂胶中分离鉴定出数百种活性成分，主要功效成分为黄酮类化合物。根据中国药典2015版第一部的介绍，蜂胶主要用于体虚早衰，高脂血症，外治皮肤皲裂，烧烫伤等。蜂胶作为一种多功能物质，已被开发成多种保健食品。其中代表性的蜂胶胶囊的开发为蜂胶在功能保健食品中的应用奠定了基础，目前国内外对蜂胶胶囊的增强免疫力功能学的研究还不是很多。

本文对蜂胶胶囊进行研究，探讨其增强免疫力的功能性。依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范》（2003版），将蜂胶胶囊设低、中、高3个剂量组，分别相当于人实际用量的5、10和20倍，连续30天经口给予小鼠蜂胶胶囊，研究蜂胶胶囊对小鼠体重、免疫能力的作用，其中免疫力能力包括其对绵羊红细胞诱导的迟发型变态反应（DTH）、免疫器官功能的作用、血清溶血素水平、单核一巨噬细胞吞噬廓清、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能等的影响，并根据试验结果分析蜂胶胶囊对机体免疫功能的影响，为蜂胶制品在功能保健食品中的应用推广提供依据。

1材料與方法

1.1材料与试剂

蜂胶胶囊（由深圳市荣格保健品有限公司提供）。

SPF健康成年昆明种雄性小鼠160只，体重为18-22g，广东省医学试验动物中心提供，合格证号为0053395。

绵羊红细胞（SRBC）、生理盐水、二硝基氟苯（DNFC）、Gimsa染液、硝基氯化四氮唑（TNT）、吩嗪二甲酯硫酸盐（PMS）、氧化型辅酶Ⅰ、0.2mol/L的Tris-HCL缓冲液（PH8.2）、0.1%的Na2C03溶液、1%的NP40、印度墨汁、鸡红细胞、甲醇等。

1.2仪器与设备

动物台秤、电子分析天平、离心机、二氧化碳培养箱、恒温水浴箱、显微镜、紫外可见分光光度计（UV-2450）、酶标仪等。无菌手术器械、细胞计数器、玻璃平皿、载玻片、洁净工作台、200目筛网、微量注射器、血色素吸管等。

1.3动物试验分组与剂量设定

选用昆明种雄性小鼠，随机分为免疫Ⅲ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四组，每组40只。其中免疫Ⅰ组进行迟发型变态反应试验（DTH）；免疫Ⅱ组进行脏/体比值测定，血清溶血素测定；免疫Ⅲ组进行碳廓清试验；免疫Ⅳ组进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验。

根据蜂胶胶囊的人体摄入量（2000mg/人/天，相当于33.3mg/kg.bw），设高、中、低3个剂量组，分别为666、333、166.5mg/kg.bw，即20、10、5倍人体摄入量，一个玉米胚芽油对照组（样品难溶于水），每组10只小鼠。将蜂胶胶囊根据不同剂量用玉米胚芽油配成相应浓度，经口灌胃，灌胃体积为0.4mL/20g.bw，对照组用等体积玉米胚芽油灌胃，每天一次，连续饲养30d。

1.4动物试验指标测定

依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）中的“增强免疫力功能检验方法”，分别对试验小鼠进行二硝基氟苯诱导的迟发型变态反应（DTH）试验（耳肿胀法），脏/体比值测定、血清溶血素测定试验（血凝法），碳廓清试验以及小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验（半体内法），并收集相关试验指标数据。

1.5数据处理方法

应用SPSS统计软件对上述数据进行方差分析统计处理。

2结果与分析

2.1蜂胶对小鼠脏器/体重比的影响

在表1中可以看出，经口给予小鼠不同剂量的蜂胶胶囊30天，小鼠的胸腺/体重以及脾脏/体重比值与阴性对照组相比，均无显著性差异（P>0.05）。

2.2蜂胶对小鼠细胞免疫功能的影响

从表2可以看出，样品的各剂量组小鼠的左右耳片重量差值大于对照组，其中的高、中剂量组与对照组相比，有极显著差异，P<0.01。

2.3蜂胶对小鼠体液免疫功能的影响

从3表中可以看出样品各剂量小鼠的溶血素抗体积数均高于对照组，其中高、中剂量组与对照组相比差异极显著，P<0.01。

2.4蜂胶对小鼠单核一巨噬细胞功能的影响

从表4可以看出，样品的各个剂量组小鼠的吞噬指数均高于对照组，但相比对照组差异均无显著性（P>0.05），表明该样品对小鼠的单核一巨噬细胞碳廓清功能没有明显的促进作用。

从表5中能够看到，样品各个剂量组小鼠的腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数均高于对照组，其中高、中剂量组的吞噬率以及吞噬指数与对照组的差异具有显著性（P<0.01或P<0.05），表明该样品具有促进小鼠的腹腔巨噬细胞的吞噬功能的作用。

3结论

从上述结果可以看出，与对照组相比，蜂胶对小鼠胸腺/体重比值、脾脏/体重比值、单核一巨噬细胞碳廓清功能均无明显影响（P>0.05）。高剂量（666mg/kg.bw）与中剂量（333mg/kg.bw）的蜂胶均能明显提高小鼠细胞免疫功能（迟发型变态反应）、体液免疫功能（血清溶血素水平）以及小鼠单核一巨噬细胞功能（腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力）。根据保健食品增强免疫力功能评价标准，本试验所用的蜂胶胶囊具有增强免疫力的功能。

本试验所用剂量水平与张英姿以及韩彦彬分别进行的黄蜂胶和黑蜂胶合用对小鼠免疫功能影响的研究所用基本一致，试验结果接近，可以说明本试验的可靠性。而本试验所验证的增强免疫力功能是蜂胶保健食品众多功能热点之一，本试验所使用的的荣格牌蜂胶胶囊也仅是目前热门研究成果之一，未来，高效、高品质和高安全性的蜂胶产品将不断涌现。