肿瘤患者细胞免疫功能的影响因素分析*

杨伟 贺彬彬

(重庆市垫江县人民医院医学检验科，重庆 408300)

肿瘤患者细胞免疫功能的影响因素分析*

杨伟 贺彬彬

(重庆市垫江县人民医院医学检验科，重庆 408300)

目的：旨在探讨各相关因素对肿瘤患者的细胞免疫功能的影响。方法采用我院检验科的BD FACSCantoⅡ流式细胞仪分析2016年6月至2017年4月期间67例肺癌、胃癌及结直肠癌肿瘤患者体内CD4+、CD8+细胞计数及CD4+/CD8+，将CD4+细胞计数或CD4+/CD8+低于正常范围最低值的患者定义为其细胞免疫功能低下，使用SPSS19.0统计分析软件全方位分析各相关因素与CD4+、CD8+细胞计数、CD4+/CD8+及细胞免疫功能低下之间的关系，最后客观地讨论出可能会受到影响的相关因素。结果男性及年龄≤60岁的患者的CD4+、CD8+细胞计数和CD4+/CD8+比值均高于女性及>60岁的患者，且总蛋白(Total protein，TP)降低组、白蛋白(Albumin，ALB)降低组、血红蛋白(Hemoglobin，HGB)降低组及癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen，CEA)升高组的CD4+、CD8+细胞计数和CD4+/CD8+比值均低于各分组的正常组，其中性别组、TP组及CEA组的细胞计数具有显著性差异(P<0.05)；单因素分析的细胞免疫功能低下的患者中，CEA升高组的比例低于CEA正常组，其差异具有显著性(P<0.05)；但在多因素分析中并无具有显著差异性的相关因素(P>0.05)。结论随时关注患者营养状况并及时进行纠正能有效地保护患者的细胞免疫功能，这也在临床的抗肿瘤免疫过程中发挥着重要作用。

肿瘤患者；细胞免疫功能；影响因素

当前我国肿瘤的发病率和死亡率仍处于极其严峻的形势中，近几年的日益增长趋势让医学界高度重视对抗肿瘤治疗的研究。诸多研究均表明肿瘤的发生发展、预后等环节与机体的免疫状态都息息相关，所以临床上针对肿瘤患者细胞免疫状态的评估与测定对掌握病情、抗肿瘤治疗等具有重要意义[1]。既往研究报道，肿瘤患者的细胞免疫功能常常呈现低下状态[2]，临床上常通过检测患者体内的CD4+、CD8+细胞计数以及CD4+/CD8+来直接反映肿瘤患者的细胞免疫功能[3]。现通过分析肿瘤患者的部分临床因素及检测的一些常规指标与CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值间的关系，探讨各相关因素对肿瘤患者的细胞免疫功能的影响，为临床上肿瘤的治疗过程中能及时发现并纠正患者的细胞免疫状态起提示作用。

1 临床资料与方法

1.1 研究对象

选取2016年6月至2017年4月到我院中医肿瘤科进行住院治疗的肿瘤患者67例，其中男性26名，女性41名，60岁以上32名，60岁以下35名，平均年龄57岁，总蛋白正常38名，总蛋白降低29名，其他详见表1。纳入标准为患者需要具有完善的临床资料且完成了血常规、肝功及癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen，CEA)的检测，同时剔除患有能影响细胞免疫功能的基础性疾病(如糖尿病、高血压、结核等)，以及在细胞免疫功能检测前未使用过免疫调节剂、激素等药物，最后经筛选得到这67例样本。

1.2 仪器与试剂

本研究全程使用美国Becton Dickinson公司生产的BD FACSCantoⅡ流式细胞仪。检测CD4+、CD8+细胞计数所用试剂为淋巴细胞亚群检测试剂和BD Trucount绝对计数管。当全血加入到试剂中时，试剂中荧光标记的抗体会和白细胞表面抗体特异性结合，在采集时，细胞通过激光束使激光散射，被染色的细胞就会发出荧光。这些被荧光检测到的散射光和荧光信号提供了关于细胞大小、内部复杂程度和相对荧光强度等信息。一个有着精确体积的样本在BD Trucount绝对计数管中被直接染色。管中低压冻干的絮状沉淀物被溶解，释放出已知数量的荧光微球。在分析过程中，通过比较细胞事件数和微球事件数可以确定样本阳性细胞的绝对数量。

1.3 方法

患者在入院完善临床资料及各种化验检查后采集全血标本，应用BD FACSCanto Ⅱ流式细胞仪检测全血中的CD4+、CD8+细胞计数以及CD4+/CD8+，同时收集相关检查的结果，按性别、分段年龄、总蛋白(Total protein，TP)、白蛋白(Albumin ，ALB)、血红蛋白(Hemoglobin，HGB)、癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen，CEA)的水平进行分组。

1.4 统计学处理

本研究全程使用SPSS13.0软件进行数据的统计分析，采用t检验对各组间的CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的平均值进行组内分析比较；将CD4+细胞计数或CD4+/CD8+低于正常范围最低值的患者定义为其细胞免疫功能低下，再通过卡方检验对细胞免疫功能低下的组进行组内比较。为避免各种因素的相互影响，再应用Logistic回归分析对细胞免疫功能低下的分组进一步进行组间比较。将P值<0.05判定为其比较差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 肿瘤患者的性别、年龄、TP高低、白蛋白高低、血红蛋白高低与细胞免疫功能的关系

此次研究中的CD4+、CD8+细胞计数及CD4+/CD8+比值参考我院检验科的正常值范围，分别为550-1440个·L-1、320-1250个·L-1、0.71-2.87。分析统计结果显示，男性肿瘤患者CD4+、CD8+细胞计数显著高于女性(P<0.05)，这提示男性肿瘤患者的细胞免疫功能明显好于女性患者的细胞免疫功能；肿瘤患者小于60岁的CD4+、CD8+细胞计数显著性高于大于60岁的肿瘤患者(P<0.05)，这提示小于60岁的患者的细胞免疫功能明显好于大于60岁的肿瘤患者；总蛋白降低的肿瘤患者的CD4+、CD8+细胞计数明显低于总蛋白正常的肿瘤患者(P<0.05)，这提示当总蛋白水平降低的时候，影响了患者的细胞免疫功能，具体详见表1。

2.2 癌胚抗原CEA的高低与细胞免疫功能之间的关系

将CD4+细胞计数或CD4+/CD8+低于正常范围最低值的患者定义为其细胞免疫功能低下，将CEA分为正常组和升高组，再将各组分为细胞免疫功能低下组和细胞免疫功能正常组。对各分组进行卡方检验，由统计分析结果显示，CEA正常组细胞免疫功能低下与CEA升高组的细胞免疫功能比差异具有统计学意义(P<0.05)，且CEA水平升高组明显低于正常组，具体见表2。

表1 按不同标准分组后CD4+、CD8+、CD4+/CD8+计数

注：与女性组相比，男性组CD4+、CD8+的值明显偏高(P<0.05)，与大于60岁以上组相比，小于60岁组的CD4+、CD8+的值明显偏高(P<0.05)，与白蛋白降低组相比，白蛋白正常组CD4+、CD8+的值明显偏高(P<0.05)。

表2 肿瘤患者CEA升高与正常时细胞免疫功能低下的情况与比较(例)

注：与CEA正常组相比，*P<0.05。

3 讨论

在机体的抗肿瘤免疫过程中，由T细胞介导的特异性免疫起着主要作用，各T细胞亚群发挥着其不同的细胞免疫功能，其中发挥主导作用的为CD4+、CD8+这两类T细胞。CD4+T细胞，称辅助性T细胞[4]，对Tc、Ts、B等免疫细胞均具有辅助作用，可协助机体完成抗肿瘤免疫，不仅如此，CD4+T细胞在肿瘤发生的早期还可以起到免疫监视的作用；CD8+T细胞，称细胞毒性T细胞，能高效杀伤肿瘤细胞，但异常增多后会抑制机体的免疫应答。当两种细胞数量或比例失衡时，其细胞免疫功能便会出现异常。

有研究表明，不同肿瘤的细胞免疫功能变化会有所不同，但常见的是CD4+和(或)CD4+/CD8+的降低，CD8+的升高，患者表现为细胞免疫功能的低下[5-6]。其中可能影响其细胞免疫功能的因素有很多，患者性别、年龄、肿瘤分期、是否放化疗、是否使用一些激素或免疫调节剂、是否输血、手术方式及患者营养状况等[11-12]。本次研究主要探讨的是患者的一般情况及常规检验项目与细胞免疫功能间的影响关系。

研究首先对患者的性别与细胞免疫功能进行了分析，其中男性患者的CD4+细胞计数较女性患者升高，且具有显著差异，结果提示女性比男性更容易出现细胞免疫功能低下，虽然研究肿瘤的细胞免疫功能与性激素的文章较少，但研究细胞免疫功能与性激素关系的报道提示，雌二醇作为一种诱导因子通过雌激素受体α诱导胸腺细胞的凋亡，其具体的作用机制还有待进一步去研究[7]。在年龄的分析中，年龄>60岁患者的CD4+、CD8+细胞计数以及CD4+/CD8+的比值均低于年龄≤60岁的患者，但其差异无统计学意义，对细胞免疫功能低下的比例的单因素和多因素分析也无显著性差异，分析结果提示年龄较大的患者细胞免疫功能有趋向低下的可能。

有研究显示，临床上恶性肿瘤患者常呈现营养不良的状态[8]，因此本文分析了代表营养状况的部分指标TP、ALB及HGB与细胞免疫功能的关系。其中TP、ALB及HGB降低组患者的CD4+、CD8+细胞计数及CD4+/CD8+的比值均低于正常组，结果提示营养状况较差的患者细胞免疫功能更为低下，有研究也表明营养不良的肿瘤患者会导致其体液免疫和细胞免疫功能均受损[9-12]。但结果显示这些营养指标水平的差异无显著性，原因可能是营养指标选择不全面或在划分范围的选择上出现了问题。

最后对患者的CEA水平进行分析发现，CEA正常组的CD4+细胞计数高于升高组，其差异具有显著性；在单因素分析的卡方检验中也发现，其升高组内患者细胞免疫功能低下的比例要低于正常组，且差异具有显著性；但在多因素logistic回归分析中，差异却无显著性。结果提示，可能CEA这种物质对机体的细胞免疫功能具有一定的刺激作用。

综上可知，能影响肿瘤患者的细胞免疫功能的因素为患者的营养状况，在临床肿瘤治疗过程中随时关注患者营养状况并及时进行纠正能有效地保护患者的细胞免疫功能，这也在临床的抗肿瘤免疫过程中发挥着重要作用。

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Analysisofinfluencingfactorsofcellularimmunefunctionincancerpatients*

Yang-Wei, He-Bin-bin

(Medical Laboratory of the Dianjiang People′s Hospital of Chongqing, Chongqing 408300)

Objective： To explore the impact of various factors on the cellular immune function of cancer patients.MethodsThe CD4+, CD8+cells absolute value and the ratio of CD4+and CD8+cells in 67 blood specimens collected from patients with lung cancer, gastric cancer or colorectal cancer during June 2016 to April 2017 were analyzed by BD FACSCantoII flow cytometry. And then the patients were diagnosed with low cellular immune function when the absolute value and the ratio of CD4+and CD8+ cells is lower than the normal range. The relationship between CD4+, CD8+cell count, CD4+/CD8+and low cellular immune function were analyzed by SPSS19.0 statistical analysis software. Finally, the factors that might be affected were discussed objectively. Results: The CD4+, CD8+cell count and CD4+/CD8+ratio among male younger than 60 years were higher than those in female older than 60 years. And the CD4+ , CD8+ cells absolute value and the ratio of CD4 + and CD8 + cells in TP+group, ALB reduction group, HGB reduction group and CEA group were lower than the normal group. The cells count was significantly different in sex group, TP group and CEA group (P<0.05). In patients with low immunologic function of single factor analysis, the proportion of CEA was lower than the normal group of CEA, and the difference was significant (P<0.05). However, there was no significant difference by multifactor analysis (P>0.05).ConclusionConcerned about the nutritional status of patients and timely correction can effectively protect the patient′s cellular immune function, which is also in the clinical anti-tumor immune process plays an important role.

Cancer patients; Cellular immune function; Influence factors

重庆市垫江县科委基金项目(编号：djkjxm2016jsyfysfyy025)

杨伟，男，检验师，主要从事分子及遗传相关疾病和肿瘤细胞免疫功能方面的研究，Email：673571090@qq.com。

2017-6-26)