食蟹猴阿米巴原虫感染调査

谢永平,李 军,庞彬辉,陈彦臣,尤宗耀,陈月妃,潘 艳,韦志锋

(1.广西兽医研究所，广西南宁 530001;2.广西兽医生物技术重点实验室，广西南宁 530001;3.广西省融水县畜牧站，广西融水 545300;4.广西省南宁市动物园，广西南宁 530004)

食蟹猴阿米巴原虫感染调査

谢永平1,2,李 军1,2,庞彬辉1,2,陈彦臣3,尤宗耀4,陈月妃4,潘 艳1,2,韦志锋1,2

(1.广西兽医研究所，广西南宁 530001;2.广西兽医生物技术重点实验室，广西南宁 530001;3.广西省融水县畜牧站，广西融水 545300;4.广西省南宁市动物园，广西南宁 530004)

为了解广西规模化食蟹猴饲养场人兽共患肠道原虫阿米巴的感染情况，采集广西4个食蟹猴饲养场各年龄段猴的新鲜粪便样品共计965份，采用直接涂片法和水洗沉淀法检测，取样涂于载玻片上，进行卢氏碘液染色，制片后于显微镜下测量观察。结果表明，4个食蟹猴饲养场阿米巴原虫平均感染率分别为6.9%、54.5%、32.9%、36.5%；其中种猴群分别为8.0%、59.3%、26.7%、48.3%，幼猴群为5.1%、53.3%、31.7%、37.7%，常规猴群为7.8%、51.7%、34.3%、23.3%。此次调查的4个猴场均不同程度的存在阿米巴原虫感染，各年龄段猴群(种猴群、幼猴群、常规猴群)其阿米巴原虫感染率无显著差异(P<0.05)。

食蟹猴；阿米巴原虫；检测；感染率

阿米巴原虫病主要是由溶组织内阿米巴(Entamoebahistolytica)引起的一种高发病率、高度致病性的人兽共患寄生虫病[1]。该原虫多寄生于人和动物的肠道和肝脏，引发阿米巴痢疾或肝脓肿。临床上表现发热、腹痛腹胀、呕吐、恶臭痢疾血便等症状，病理剖解多见肠炎、肠道出血水肿、溃疡、增生等，个别病例肝脏上出现脓肿。溶组织内阿米巴有滋养体和包囊两种存在形式。滋养体大小为7 μm～60 μm，形态多变，其胞质分内外两层，内质较浓密呈颗粒状，外质透明，运动时外质伸出，形成伪足，能做定向运动，细胞核呈泡状，核膜薄，核仁细小，居中或偏离中心。包囊多呈球形,直径为10 μm～16 μm，未染色时为一折光性圆形小体，碘染色后呈黄色，外周包围一层透明的囊壁，内含1～4个核,每个核具有1个位于中央的核仁。未成熟包囊，有1～2个核，常见含有染成棕色的糖原泡和透明的杆状拟染色体；成熟包囊具有4个核，糖原泡和拟染色体不易见到[1-3]。临床上主要根据流行病学、临床症状和病理变化对该病做出初步的推断。确诊常用实验室诊断方法如病原诊断、免疫学诊断等。

阿米巴原虫病分布范围广泛，易感动物较多[1,4-5]，呈世界性流行传播。自1875年Feder Losch首次在人体发现该原虫以来，该病已给人和动物的健康带来了严重的影响，同时也造成了巨大的经济损失[2]。近年来，国内外的研究者们对其做了大量研究工作[1-10]，但多局限于对人体阿米巴的研究，关于动物阿米巴的研究报道相对较少。本文对广西境内4家人工养殖食蟹猴场阿米巴原虫病感染情况进行了调査并报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品 采集广西4个食蟹猴饲养场猴粪样品，分别命名为GXH1、GXH2、GXH3、GXH4，样品数量分别为160份、189份、435份、181份，共计965份，分别装于干净的自封塑料袋中，做好标签记录，速送实验室检査。

1.1.2 仪器与试剂 带测微尺的显微镜、烧杯、载玻片、盖玻片、60～100目铜筛；卢氏碘液本实验配制。

1.2 方法

1.2.1 卢氏碘液工作液配制 首先配制储存液：碘5 g，碘化钾10 g，蒸馏水100 mL。需染色使用时，配制卢氏碘液工作液，方法是取储存液5 mL加入生理盐水20 mL，混合均匀储存于棕色玻璃瓶中，随用随取。工作液有效期为15 d，储存液有效期较长。

1.2.2 直接涂片法 在载玻片上滴加一滴卢氏碘液工作液，用竹签挑取少许被检猴新鲜粪便在碘液中涂抹均匀，加盖玻片后置光学显微镜下观察。

1.2.3 水洗沉淀法 取被检粪便10 g～15 g，加水20 mL～30 mL搅拌成混悬液，用60目铜筛过滤到100 mL三角烧杯中，再加入适量蒸馏水充分搅拌混匀，静置30 min，倒去上清液，沉渣再加入蒸馏水，调匀、静置30 min。重复3～4次，直至上层液变清。最后倒去上清液，取沉渣涂片镜检。

1.2.4 卢氏碘液染色法 用吸管吸取1.2.3中烧杯底部沉淀物1滴，加卢氏碘液工作液1滴，搅匀，加盖玻片后，在10×和40×光学显微镜下测量观察。

2 结果

2.1 阿米巴原虫包囊的形态观察

样品经碘染制片，在显微镜下观察，阿米巴原虫包囊呈黄色，球形，见1～4个核，大小为10.68 μm～18.69 μm(图1)。

2.2 感染检查结果

检查4个食蟹猴饲养场(分别命名为GXH1、GXH2、GXH3、GXH4)猴粪样品共965份，各场阿米巴原虫平均感染率分别为6.9%、54.5%、32.9%、36.5%；其中种猴群分别为8.0%、59.3%、26.7%、48.3%，幼猴群为5.1%、53.3%、31.7%、37.7%，常规猴群为7.8%、51.7%、34.3%、23.3%。4个猴场总感染率为33.47%，各年龄段种猴群、幼猴群和常规猴群的平均感染率依次为36.16%、33.46%、32.23%，各年龄段猴群其阿米巴原虫感染率无显著差异(P>0.05)(表1)。

→所示为阿米巴原虫包囊；→Shown as amoeba cysts 图1 食蟹猴阿米巴原虫包囊形态(400×)

猴场名称Farm阳性数/检测数Positive/Total种猴群Breeding幼猴群Young常规猴群Adult合计Total阳性率/%Positiverate种猴群Breeding幼猴群Young常规猴群Adult平均数TotalGXH14/503/594/5111/1608．005．087．846．88GXH232/5441/7730/58103/18959．2653．2551．7254．50GXH316/6019/60108/315143/43526．6731．6734．2932．87GXH429/6023/6114/6066/18148．3337．7123．3336．46合计Total81/22486/257156/484323/96536．1633．4632．2333．47

3 讨论

此次调查的4个猴场均不同程度的存在阿米巴原虫感染，各年龄段猴群(种猴群、幼猴群、常规猴群)其阿米巴原虫感染率无显著差异。

食蟹猴由于其性情温顺，个体娇小，并且进化史与人亲缘关系最近，是研究人类健康和疾病的理想动物模型，成为医学研究领域中广泛使用的实验动物[11]。食蟹猴作为实验动物其经济价值较高，应加强饲养管理，避免疾病暴发导致死亡。卢静等[12]报道蛛猴和绒毛猴阿米巴病非常严重，甚至是致死性的，感染猴如不进行及时治疗，几天内发生死亡。食蟹猴被阿米巴原虫感染，易出现腹泻腹痛等临床症状，严重影响试验结果的准确性。同时食蟹猴感染阿米巴原虫，反复腹泻，易导致动物营养不良，生长缓慢、消瘦、脱毛现象，严重影响动物质量，给养殖业带来严重的经济损失。特别是阿米巴原虫属人兽共患寄生虫病，更加应该引起重视，结合养殖场猴群感染调查结果制订一套科学、合理的防控措施，达到科学有效的净化猴群，提高饲料报酬和经济效益，提高猴群健康质量。

预防动物(食蟹猴)阿米巴病发生的关键是消灭传染源和切断传播途径[13]。对群养猴群进行定期检查，隔离阳性猴只，及时治疗，阳性猴经过“隔离-治疗-检查-阴性-再检查-健康”治疗程序，至少经两次检查确诊健康后才能合群饲养。同时加强猴舍粪污管理，定期清除栏舍猴粪及污水，并进行无害化处理，防止污染周边环境与饮水及食物。饲养人员及其他与猴群密切接触人员也应注意，防止人与动物间互相传播。

[1] 黄道超,杨光友,王 强,等.人和动物阿米巴原虫病研究进展[J].动物医学进展,2006,27(5):51-55.

[2] Levin e N D.Verterinary protozoolgy [M].Lowa:Ames Lowa State Unicersity Press,1985:109-130.

[3] Samuel W M.Parasi tic diseas es of wild mammals [M].Manson :Manson Publishing The Verterinary Press,2001:397-401.

[4] 齐 萌,董海聚,胡 霖,等.野生动物园动物肠道寄生虫感染情况调查[J].中国畜牧兽医,2011,38(10):188-190.

[5] 彭 屹,林江蔚,刘汉儒.犬急性阿米巴原虫病的诊疗[J].黑龙江畜牧兽医,2010(14):122.

[6] 吴泽钰,薛 瑞,史永华,等.516名大学生齿龈内阿米巴感染情况与口腔疾病关系分析[J].中国微生态学杂志,2016(9):1049-1051.

[7] 陈玉玲,樊 翔,王龙飞,等.阿米巴性结肠炎3例临床病理分析并文献复习[J].临床与实验病理学杂志,2017(1):90-92.

[8] 张小萍,何艳燕,王真瑜,等.上海市综合性医院腹泻患者中溶组织内阿米巴感染现状调查[J].中国血吸虫病防治杂志,2015(6):600-603.

[9] 陈百挺,罗红梅,覃雪冬.广东省连山少数民族地区阿米巴痢疾调查[J].中国卫生工程学,2017(2):132-134.

[10] 杨 亮.季节指数模型在菌痢和阿米巴痢疾发病率预测中的应用[J].中国热带医学,2015(8):951-954.

[11] 施新猷.现代医学实验动物学[M].北京:人民军医出版社,2000:141.

[12] 卢 静,李胜利,杜小燕.实验动物寄生虫学[M].中国农业大学出版社,2010:124.

[13] 朱兴全.小动物寄生虫病学[M].中国农业科学技术出版社,2006:231.

InvestigationonAmebicProtozoaInfectioninMachins

XIE Yong-ping1,2,LI Jun1,2,PANG Bin-hui1,2,CHEN Yan-chen3,YOU Zong-yao4, CHEN Yue-fei4,PAN-Yan1,2,WEI-ZHi-feng1,2

(1.GuangxiVeterinaryResearchInstitute,Nanning,Guangxi,530001,China; 2.GuangxikeylaboratoryofVeterinarybiologicaltechnology,Nanning,Guangxi,530001,China; 3.StockStationofRongshuiCounty,Rongshui,Guangxi,545300,China；4.NanningZoo,Nanning,Guangxi,530004,China)

To understand the infection ofAmebicProtozoain Machins of large-scale farms in Guangxi,965 feces samples of all age groups of Machines were collected from 4 Machin farms in Guangxi.Direct smear examination and washed precipitated methods were used.Samples were observed by optical microscope after smeared on glass slide and stained by Lugol’s iodine.The results showed that infection rates ofAmebicProtozoain 4 farms were 6.9%,54.5%,32.9% and 36.5%,respectively.The infection rates of breeding Machine group were 8.0%,59.3%,26.7% and 48.3%,respectively.The infection rates of young Machine group were 5.1%,53.3%,31.7% and 37.7%,respectively.The infection rates of adult Machine group were 7.8%,51.7%,34.3% and 23.3%,respectively.The data suggested thatAmebicProtozoaexisted in large-scale Machine farms in Guangxi.The infection rate of all age Machine groups was no significant difference.

Machin;AmebicProtozoa; detection; infection rate

2017-04-20

广西科学研究与技术开发项目(桂科能1598025-27);广西兽医生物技术重点实验室项目(15-140-36-A-2)

谢永平(1967-),女,广西桂林人,研究员,主要从事动物疫病防治及动物病理学研究。

S852.721

B

1007-5038(2017)12-0128-03