决明中网胶囊质量标准研究

马丽娜 秦丽慧 陈建武 王宏伟

(1.平顶山中医院药材科，河南 平顶山 467000； 2.平顶山中医院制剂室，河南 平顶山 467000)

决明中网胶囊质量标准研究

马丽娜1秦丽慧2陈建武2王宏伟1

(1.平顶山中医院药材科，河南 平顶山 467000； 2.平顶山中医院制剂室，河南 平顶山 467000)

目的 建立同时测定决明中网胶囊中阿魏酸、芍药苷、绿原酸含量的高效液相色谱法。方法 分析采用Ultimate XB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相梯度洗脱；1.0ml·min-1流速；230 nm检测波长；35 ℃柱温。结果 阿魏酸、芍药苷、绿原酸分别0.05～0.35 μg、0.30～2.10 μg、0.20～1.40 μg范围内线性关系良好(r≥0.9991)，平均加样回收率为97.54%～97.88%之间。结论 该方法专属性强，重复性好，可用于完善决明中网胶囊的质量标准。

决明中网胶囊； 阿魏酸；芍药苷；绿原酸； 高效液相色谱法；含量测定

决明中网胶囊是由当归、川芎、白芍、金银花等14味中药组成，由我院眼科提供的验方制剂，具有清热活血，健脾渗湿功效，用于视瞻昏渺、云雾移晴等症，临床应用十几年，疗效确切，长期使用，未见不良反应。原质量标准仅有几味中药的薄层色谱鉴别，不能满足现代中药制剂的质量控制要求，为更好的控制该制剂质量，本研究采用高效液相色谱法(HPLC)对决明中网胶囊中当归的主成分阿魏酸、白芍的主成分芍药苷和金银花的主成分绿原酸同时进行含量测定，为决明中网胶囊质量标准的完善提供科学依据。

1 仪器与试药

1.1仪器 岛津LC-2010CHT岛津高效液相色谱仪，LC-Solution色谱工作站；BSA124S型电子天平；CH-250超声波清洗机。

1.2试药 阿魏酸对照品(批号：111562-201009)、芍药苷对照品(批号：110736-201035)、绿原酸对照品(批号：110753-200413)均购于中国药品生物制品检定所；决明中网胶囊(自制，批号：20160110,20160121,20160301)；乙腈、甲醇为色谱纯；水为纯净水；其余试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1色谱条件 色谱柱为Ultimate XB-C18柱 (250 mm×4.6mm，5μm)；流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相，梯度洗脱(0→10 min,5%～10%；10→50 min,10%～20%)；流速：1.0 ml·min-1；检测波长：230 nm；柱温35 ℃；进样量20 μl。

2.2混合对照品溶液的制备 精密称取阿魏酸对照品0.5 mg、芍药苷对照品3.0、绿原酸对照品2.0 mg置10 ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，即得。

2.3供试品溶液的制备 精密称取决明中网胶囊内容物1.0g，置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10 ml，密塞，称定质量，超声(300 W、40 kHz)45 min，放冷，甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，续滤液过0.45μm微孔滤膜，即得。

2.4阴性对照溶液的制备 按处方比例及工艺，制备缺少当归、白芍和金银花的阴性样品，再按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。

2.5系统适应性试验 分别取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液20 μl，在拟定的色谱条件下进行测定，各相邻色谱峰之间的分离度均大于1.5；结果显示供试品溶液与对照品溶液主峰的保留时间一致，阴性对照溶液在相应的保留时间处没有色谱峰出现，样品中其他组分对3种成分的含量测定无干扰。

2.6线性关系考察 精密量取混合对照品溶液0.5 ml、1 ml、1.5 ml、2 ml、2.5 ml、3 ml、3.5 ml，分别置于10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，按照上述色谱条件，将上述7种对照品稀释溶液分别进样20μl，测定，以峰面积为纵座标，对照品进样量为横座标，绘制标准曲线，得线性回归方程；结果见表1，明各成分线性关系良好。

表1 3种成分线性回归关系

2.7精密度试验 取混合对照品溶液，重复进样6次，每次20μl ，测定阿魏酸、芍药苷、绿原酸峰面积RSD分别为0.9%、1.2%、1.6%，表明仪器精密度良好。

2.8重复性试验 取同一批号样品(批号20160110), 按供试品项下方法制备6份供试品溶液，在拟定色谱条件下分析，测得阿魏酸、芍药苷、绿原酸含有量RSD分别为1.2%、1.3%、0.7%，表明重复性良好。

2.9稳定性试验 精密吸取同一批号供试品溶液适量，在拟定色谱条件下分别在0 h、4 h、8 h、12 h、16 h、24 h进样20μl， 测得阿魏酸、芍药苷、绿原酸峰面积RSD为0.4%、1.1%、1.8%，表明供试品溶液在24 h内稳定。

2.10加样回收率试验 取已知含量的同一批号样品(批号：20160110)，每份约0.5g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入3种对照品溶液，按2.3项下方法制备低、中、高三种浓度的供试品溶液，每种浓度3份，在拟定色谱条件下测定，计算加样回收率，结果见表2。

2.11样品测定 取不同批号样品照“2.3”项下方法制备供试品溶液，在拟定色谱条件下进行测定，记录峰面积，计算含量，结果见表3。

表3样品含量测定结果(n=3)

3 讨 论

3.1供试品溶液制备方法的选择 根据文献[1-4]分析，对两种提取方式超声、加热回流进行考察，发现两者无显著性差异，故选择了简便的超声提取；提取溶剂考察了50%乙醇、60%甲醇、甲醇，发现甲醇的提取率最高，对溶剂体积和超声时间也进行了考察，最终选择甲醇10 ml，提取时间为45 min。

3.2检测波长的选择 通过对阿魏酸、芍药苷、绿原酸进行全波长扫描，发现最大吸收波长分别是316 nm、230 nm、327 nm，但阿魏酸和绿原酸在230 nm波长处也能得到较好的响应值，而且峰型良好，故选择230 nm作为检测波长。

3.3通过查询分析文献[1,4,5]，选择乙腈-磷酸水溶液系统作为流动相，通过试验考察了磷酸的浓度(0.03%、0.05%、0.1%)及流动相比例，发现0.1%磷酸溶液所出峰型较好，单一流动相比例分离效果都不理想，最终确定本实验中的梯度洗脱。

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马丽娜(1981—)，女，河南平顶山人，主管药师，硕士，主要从事中药鉴定与管理工作。

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1004-7115(2017)12-1419-02

10.3969/j.issn.1004-7115.2017.12.033

2017-08-22)