使用竹沥颗粒和鲜竹沥口服液对CB模型大鼠肺组织中SOD活性、MDA水平和HP水平的影响

王 芳，熊培政，冯雪梅

（成都中医药大学基础医学院，四川 成都 611137）

使用竹沥颗粒和鲜竹沥口服液对CB模型大鼠肺组织中SOD活性、MDA水平和HP水平的影响

王 芳，熊培政，冯雪梅⋆

（成都中医药大学基础医学院，四川 成都 611137）

目的：探讨竹沥颗粒和鲜竹沥口服液对慢性支气管炎（Chronic bronchitis，CB）模型大鼠肺组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD)活性、丙二醛（malondiadehyde，MDA）水平和羟脯氨酸（hydroxyproline，HP）水平的影响。方法：将40只SD大鼠随机分为对照组（10只）、模型组（10只）、鲜竹沥组（10只）和竹沥颗粒组（10只）。将模型组大鼠、鲜竹沥组大鼠和竹沥颗粒组大鼠制成CB模型。使用浓度为0.7%的氯化钠溶液对模型组大鼠进行灌胃，使用鲜竹沥口服液对鲜竹沥组大鼠进行灌胃，使用竹沥颗粒对竹沥颗粒组大鼠进行灌胃，并对比四组大鼠肺组织中SOD的活性、MDA的水平和HP的水平。结果：与对照组大鼠相比，模型组大鼠肺组织中SOD的活性更低，其肺组织中MDA的水平和HP的水平更高，差异有统计学意义（P＜0.05）。与模型组大鼠相比，鲜竹沥组大鼠和竹沥颗粒组大鼠肺组织中SOD的活性更高，其肺组织中MDA的水平和HP的水平更低，差异有统计学意义（P＜0.05）。鲜竹沥组大鼠和竹沥颗粒组大鼠肺组织中SOD的活性、MDA的水平和HP的水平相比差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：使用竹沥颗粒和鲜竹沥口服液对CB模型大鼠进行灌胃，可有效地提高其肺组织中SOD的活性，降低其肺组织中MDA的水平和HP的水平。

慢性支气管炎；竹沥颗粒；鲜竹沥口服液；SOD活性；MDA水平；HP水平

鲜竹沥口服液和竹沥颗粒均具有清热、止咳、化痰等功效。这两种药物在临床上常被用于治疗肺热、咳嗽痰多、气喘胸闷、中风舌强、痰涎壅盛和痰热惊风诸证[1]。在本文中，笔者应用鲜竹沥口服液和竹沥颗粒对CB模型大鼠进行灌胃。然后，对比CB模型大鼠肺组织中SOD的活性、MDA的水平和HP的水平。现将研究结果报告如下。

1 研究材料

1.1 动物模型

选取健康的SPF级SD大鼠40只（由成都达硕实验动物技术有限公司提供，动物合格证号：SCXK（川）2015-030）。这些SD大鼠的平均体重为（200±20）g。

1.2 仪器和药物

进行本次研究需要用到的仪器和药物主要包括[2]：1）XZB-V5100型可见光分光光度计（由深圳市信之邦仪器设备有限公司生产）。2）BS-1101型酶标仪（由南京德铁实验设备有限公司生产）。3）鲜竹沥口服液（由四川省通圆制药有限公司生产，生产批号：150108）。4）竹沥颗粒（由四川奥邦药业有限公司生产，生产批号：150102）。5）SOD测定试剂盒（由南京建成生物工程研究所生产，生产批号：20151118）。6）MDA测定试剂盒（由南京建成生物工程研究所生产，生产批号：20151007）。7）HP测定试剂盒（由南京建成生物工程研究所生产，生产批号：20151114）。8）浓度为0.563g/L的考马斯亮蓝蛋白标准品（由南京建成生物工程研究所生产，生产批号：20150814）。

2 研究方法

2.1 造模方法和灌胃方法

将40只SD大鼠随机分为对照组（10只）、模型组（10只）、鲜竹沥组（10只）和竹沥颗粒组（10只）。采用改良的烟熏法[3]将模型组大鼠、鲜竹沥组大鼠和竹沥颗粒组大鼠制成CB模型。造模方法是：1）将10只SD大鼠置于60 cm×60 cm×60 cm的烟室中，烟室上方开4个直径为3cm的正方形小孔，烟室下方开4个直径为1cm的正方形小孔。2）将点燃的天下秀牌香烟置于烟室下方的小孔中（每次点燃10支），对SD大鼠进行烟熏30min，每天烟熏2次，连续烟熏30天。在对这三组大鼠进行烟熏后的第15天起，对其进行灌胃，直至烟熏造模结束。进行灌胃的方法是：1）使用浓度为0.7%的氯化钠溶液对模型组大鼠进行灌胃。2）使用鲜竹沥口服液对鲜竹沥组大鼠进行灌胃。3）使用浓度为0.2g/ml的竹沥颗粒溶液（由竹沥颗粒和浓度为0.7%的氯化钠溶液配制而成） 对竹沥颗粒组大鼠进行灌胃。

2.2 检测方法

2.2.1 肺组织匀浆的制备方法 1）使用生理盐水对大鼠的肺组织块进行漂洗，然后对其肺组织块进行称量。2）在大鼠的肺组织块中加入适量的生理盐水（肺组织块与生理盐水的重量比为1：9）。3）剪碎肺组织块，然后采用冰水浴法将肺组织块制成匀浆。4）对肺组织匀浆进行离心处理，并取匀浆的上清液待用（离心速度为3000转/min，离心时间为 10min）。

2.2.2 进行SOD检测、MDA检测和HP检测的方法 1）采用黄嘌呤氧化酶法对肺组织匀浆上清液中SOD的活力单位值进行检测。2）采用硫代巴比妥酸比色法对肺组织匀浆上清液中MDA的含量进行检测。3）采用样本碱水解法对肺组织匀浆上清液中HP的含量进行检测。4）采用考马斯亮蓝法对肺组织匀浆上清液中总蛋白的含量进行检测。5）严格按照试剂盒上的操作说明进行检测。为了规避检测干扰因素的影响，肺组织匀浆中SOD的活性以SOD活力单位值与总蛋白含量比值的形式表示，肺组织匀浆中MDA的水平、HP的水平以MDA含量或HP含量与总蛋白含量比值的形式表示。

2.3 观察指标

观察并对比四组大鼠肺组织中SOD的活性、MDA的水平和HP的水平。

2.4 统计学处理

采用SPSS21.0统计软件对文中数据进行处理，所有数据均用（±s）表示，采用t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

3 结果

与对照组大鼠相比，模型组大鼠肺组织中SOD的活性更低，其肺组织中MDA的水平和HP的水平更高，差异有统计学意义（P＜0.05）。与模型组大鼠相比，鲜竹沥组大鼠和竹沥颗粒组大鼠肺组织中SOD的活性更高，其肺组织中MDA的水平和HP的水平更低，差异有统计学意义（P＜0.05）。鲜竹沥组大鼠和竹沥颗粒组大鼠肺组织中SOD的活性、MDA的水平和HP的水平相比差异无统计学意义（P＞0.05）。详见表1。

表1 对比四组大鼠肺组织中SOD的活性、MDA的水平和HP的水平 （ n=10，±s）

表1 对比四组大鼠肺组织中SOD的活性、MDA的水平和HP的水平 （ n=10，±s）

注：与对照组比较：△△P＜0.01；与模型组比较：▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；与鲜竹沥组比较★P＞0.05。

组别 对照组 模型组 鲜竹沥组 竹沥颗粒组SOD （U/mgprot）163.92±16.04109.98±10.81△△144.65±9.71▲155.64±14.67▲★MDA（nmol/mgprot） 2.23±0.42 4.32±0.72△△ 2.81±0.61▲ 2.74±0.60▲★HP（μg/mgprot） 306.91±20.68 476.14±35.83△△ 367.61±22.74▲ 321.47.61±19.75▲▲★

4 讨论

4.1 CB模型大鼠的临床表现及其肺组织的病理变化特点

在本文中，笔者采用改良的烟熏法制作CB大鼠模型。在进行造模的过程中，大鼠出现了咳嗽、哮鸣音、呼吸困难、呼吸道分泌物增多、体瘦、毛枯和蜷卧少动等症状。光学显微镜

下可见模型组大鼠的支气管有不同程度的中性粒细胞浸润、黏膜上皮细胞受损、杯状细胞增多和充血等表现。这些CB模型大鼠的临床表现及其肺组织的病理变化与任勃、陶庆丰、马淑扬等学者的研究结果[4]相似。

4.2 CB的发生、发展与大鼠SOD活性、MDA水平和HP水平的关系

SOD广泛存在于需氧代谢细胞中。它不但可以清除动物体内过多的超氧阴离子自由基（O2-），同时还能保护其他抗氧化酶（如CAT、GSH-Px等）免受O2-的灭活，从而起到减轻细胞损伤的作用[5]。

MDA是反映机体氧化损伤程度的重要指标之一[6]。CB模型大鼠体内炎性细胞产生的O2-能攻击其生物膜中的多价不饱和脂肪酸，进而产生MDA等脂质过氧化物。因此，CB模型大鼠体内MDA水平的高低可间接反映其机体细胞受O2-攻击的严重程度。

HP是胶原蛋白的代谢产物，其含量的高低可反映胶原蛋白的降解情况，从而间接反映肺泡壁损伤的程度[7]。由此可见，HP可作为判断CB模型大鼠病情严重程度的指标[8]。

4.3 用竹沥颗粒和鲜竹沥口服液对CB模型大鼠进行灌胃的效果

本次研究的结果显示，与对照组大鼠相比，模型组大鼠肺组织中SOD的活性更低，其肺组织中MDA的水平和HP的水平更高。与模型组大鼠相比，鲜竹沥组大鼠和竹沥颗粒组大鼠肺组织中SOD的活性更高，其肺组织中MDA的水平和HP的水平更低。鲜竹沥组大鼠和竹沥颗粒组大鼠肺组织中SOD的活性、MDA的水平和HP的水平相比差异不大。

总之，使用竹沥颗粒和鲜竹沥口服液对CB模型大鼠进行灌胃，可有效地提高其肺组织中SOD的活性，降低其肺组织中MDA的水平和HP的水平。

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Effect of Zhuli Granule and Xianzhuli Decoction on SOD activity, MDA level and HP level in rats lung tissue model of CB

Wang Fang Xiong Peizheng Feng Xuemei
(School of Basic Medicine of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine Chengdu Sichuan 611137)

Objective:To study effect of Zhuli Granule and Xianzhuli Decoction on SOD(superoxide dismutase) activity, MDA(malondiadehyde )level and HP(hydroxyproline) level in rats lung tissue model of CB(Chronic bronchitis).Methods 40 rats were randomly divided into 4 groups:control group, chronic bronchitis (CB)group, Xianzhuli group and Zhuli group.Make model group, Zhuli group and Xianzhuli group into CB model.Model group were given normal saline(concentration is 0.7%)by gavage, Xianzhuli group were given Xianzhuli decoction by gavage, Zhuli group were given Zhuli granule by gavage ,compare SOD activity, MDA level and HP level of 4 groups rats.Results Compare with control group, SOD activity of model group was lower, MDA level and HP level were higher, discrepancy of research results were statistically significant (P＜0.05).Compare with model group,SOD activity of Xianzhuli group and Zhuli group were higher, MDA level and HP level, discrepancy of research results were statistically significant (P＜0.05).Discrepancy of SOD activity, MDA level and HP level of Xianzhuli group and Zhuli group were no statistically significant (P＞0.05).Conclusion Give Zhuli granule or Xianzhuli decoction by gavage to rats model of CB can improve SOD activity and decrease MDA level and HP level in lung tissue.

chronic bronchitis , Zhuli granule, Xianzhuli decoction, SOD activity, MDA level, HP level

R562.2+1

B

2095-7629-（2017）8-0061-03

王芳，四川凉山人，硕士研究生，研究方向为中西医结合基础，邮箱：296624143@qq.com

＊通讯作者：冯雪梅，四川成都人，教授，硕士研究生导师，邮箱：fxmcd@aliyun.com