荧光法测定蘑菇中维生素B2的含量

刘艳红，努娜，马晓光

（赤峰学院化学化工学院，内蒙古赤峰024000）

荧光法测定蘑菇中维生素B2的含量

刘艳红，努娜，马晓光

（赤峰学院化学化工学院，内蒙古赤峰024000）

本文采用荧光法对三种不同品种的蘑菇里的维生素B2含量进行测定.在最大激发波长为423nm，最大发射波长为526nm条件下，采用分子荧光法分别测定了平菇、香菇、杏鲍菇3种蘑菇中的维生素B2含量.结果表明，杏鲍菇中的维生素B2含量最高，其次是香菇，平菇B2含量最低.同时研究了经阳光照射和阴干处理的蘑菇样品，通过实验测定表明，两种环境下处理的蘑菇中的维生素B2含量变化不大.研究可以为人们在食用蘑菇方面提供营养数据.

荧光法；蘑菇；维生素B2

维生素B2又称核黄素，在水中溶解性不大，在中性或酸性溶液中加热是稳定的.维生素B2是体内黄酶类辅基的组成部分，黄酶在生物氧化还原中发挥递氢作用.所以当机体内维生素B2不足时就会使机体代谢受阻.临床症状多表现为口、眼和外生殖器部位的炎症，如口角炎、舌炎、唇炎、眼结膜炎和阴囊炎等症状[1-2].人体不能直接合成维生素B2，加之其属水溶性维生素，故在人体内储存是很有限的，因此需要每天从外界摄取.

蘑菇是含维生素B2较丰富蔬菜之一.它口感滑嫩，符合当代绿色营养健康的饮食需求.长期食用蘑菇不但可以起到降糖、降脂、降胆固醇的作用，而且蘑菇在慢性肝炎、增加白细胞以及维生素B2缺乏症等方面具有较好的食疗作用.所以研究蘑菇的营养价值具有重要的意义.

鉴于分子荧光具有测量简便、选择性好、受杂散光干扰小等优点.所以作者采用分子荧光法来测定蘑菇中维生素B2的含量，以期为人们合理食用蘑菇和进一步研究蘑菇提供数据参考.

1 实验部分

1.1 试剂和材料

原料：香菇，平菇，杏鲍菇皆是本地市场购买.主要试剂：核黄素，购自西亚试剂.盐酸，乙酸钠皆为市售分析纯.

1.2 仪器

荧光分析仪（上海棱光技术有限公司制造F97Pro荧光分光光度计），荧光分析仪（上海棱光技术有限公司制造F96荧光分光光度计），电热套，分析天平.

1.3 样品处理

购买新鲜蘑菇，除掉其中的杂质，将选择的样品洗净，分为两份，一份为阳光照射直接晒干，一份为避光阴干操作.

样品处理：将晒干的样品在研钵中研磨成粉末，再分别精确称取香菇、平菇、杏鲍菇3种样品2g左右，分别置于250mL的烧杯中，然后加入50mL的0.1mol/L盐酸溶液，加热煮沸30min，冷却至室温后，缓慢滴加3mL 2.5mol/L乙酸钠溶液摇匀后，用漏斗过滤，弃去含杂质较多的最初的5mL滤液.将上述得到的滤液转移到100mL的容量瓶中，加水定容至刻度[3-5].

1.4 维生素B2标准溶液的制备

配制维生素B2标准溶液10.0μg/mL，量取维生素B2标准溶液1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL分别置于50mL的容量瓶中，加入蒸馏水稀释至刻度，摇匀，配成五个标准样，待测.

2 结果与分析

2.1 激发波长和发射波长的确定

将装有3号标准溶液（3.00mL定容至50mL）的石英比色皿放入荧光分光光度计中，设置λem＝525nm为发射波长，在250—450nm范围内扫描，从得到的激发光谱中找出最大激发波长，在此激发波长下，在460—660nm范围内扫描，记录发射强度与发射波长间的函数关系，便得到荧光发射光谱.从荧光发射光谱上找出其最大荧光发射波长λem见图1.从图1可知维生素B2标准溶液的最大激发波长为423nm，最大发射波长为526nm.

最大激发波长和最大发射波长确定后，将仪器参数固定为λex=423nm，λem=526nm.对上述标准液进行定量测定，得出一系列荧光强度.以标准溶液浓度为横坐标，溶液的荧光发射强度为纵坐标，在excel里拟合标准曲线，从而得出标准方程.在相同条件下测定未知溶液的荧光强度，并由标准方程确定未知试样中维生素B2的浓度，从而计算出待测样品溶液中的维生素B2的含量.

图1 维生素B2的最大激发波长（423nm）和最大发射波长(526nm)

2.2 荧光光度法测定各样品

从表1和图2中可看出：在此浓度范围内维生素B2标准溶液浓度与荧光强度线性关系良好，拟合常数R2=0.991，可用此法测定维生素B2的含量.由测得的蘑菇待测样品溶液的荧光强度，带入维生素B2标准方程y=54.3x+0.23中求得蘑菇待测样品溶液的浓度见表3.

表1 标准系列溶液的荧光强度及浓度（ug/mL）

图2 维生素B2标准溶液浓度与荧光强度的标准曲线

表3 样品中维生素B2的含量

通过实验测定可知（表3），香菇的维生素B2含量为1.383mg/100g，平菇中的维生素B2的含量为0.774mg/100g，杏鲍菇中的维生素B2含量为1.507mg/100g，其中杏鲍菇中维生素B2含量最高.从表3的数据还可以看出，经阳光照射与阴干处理后的蘑菇中维生素B2含量变化不大.

3 结论

通过实验测定，蘑菇中香菇的维生素B2含量为1.383mg/100g，平菇中的维生素B2的含量为0.774mg/100g，杏鲍菇中的维生素B2含量为1.507 mg/100g.从实验数据还可以看出，杏鲍菇中的维生素B2含量最高，而且经阳光照射与阴干处理后的蘑菇中维生素B2含量变化不大.

〔1〕罗信昌.蘑菇的营养价值[J].食用菌,1980（1）：47.〔2〕陈炳卿.营养与食品卫生学[M].北京:人民卫生出版社，1997.47-48.

〔3〕曹忠.荧光光谱分析法用于维生素药片中核黄素的检测[J],食品与机械.2009,7,20(4).

〔4〕程春英.荧光法测定药品中维生素B2含量的综合型实验设计[J].实验室研究与探索，2014,12,33(12).

〔5〕刘程程.荧光法测定荠菜中维生素B2的含量[J].安徽农业科学,2014,42(7).

O656.3

A

1673-260X（2017）11-0007-02

2017-08-16