丹芪祛瘀止痛颗粒抗实验性胃溃疡的作用

姜 山 杨亚彬 宋亚娟

（黑龙江省中医研究院·哈尔滨 150036）

丹芪祛瘀止痛颗粒抗实验性胃溃疡的作用

姜 山 杨亚彬*宋亚娟

（黑龙江省中医研究院·哈尔滨 150036）

目的：观察丹芪祛瘀止痛颗粒对于胃溃疡（GU）的防治作用。方法：雄性SD大鼠分为5组：CDB高、中、低剂量组（1，0.5，0.25g·kg-1），阳性对照组（雷尼替丁，0.027g·kg-1）和空白组（纯水，10mL·kg-1）。复制应激性胃溃疡和醋酸灼伤胃溃疡模型，分别观察药物对于溃疡发生的防治作用，同时测定动物血清中表皮生长因子（EGF）和转化生长因子（TGF-α）水平。结果：丹芪祛瘀止痛颗粒能够降低溃疡指数，减少溃疡面积，并明显降低胃液总酸度（P＜0.01或P＜0.05）。丹芪祛瘀止痛颗粒高、中剂量可以显著提高胃两种溃疡模型动物血清中EGF和TGF-α水平（P＜0.01或P＜0.05），但是对胃蛋白酶活性无明显影响（P＞0.05）。结论：丹芪祛瘀止痛颗粒可以通过抑制胃酸分泌和增强保护因子来起到抗实验性胃溃疡的作用。

胃溃疡 丹芪祛瘀止痛颗粒 表皮生长因子 转化生长因子

丹芪祛瘀止痛颗粒全方由黄芪，丹参，白芍，乌药，北沙参，地榆，莪术，苦参，枸杞子，厚朴，三七，柴胡，黄连，桂枝，丁香，大黄组成，具有活血生肌，祛瘀止痛。用于脾胃虚弱，气虚血瘀型萎缩性胃炎、浅表型胃炎，胃及十二指肠溃疡。

本课题组通过实验考查丹芪祛瘀止痛颗粒对于大鼠胃溃疡的预防和治疗作用，从而为临床的合理应用提供参考。

1 材料

1.1 动物

SD大鼠，SPF级，雄性，体重220～240g，购自军事医学科学院动物中心，许可证号：SCXK-（军）2007-004。

1.2 药物和试剂

丹芪祛瘀止痛颗粒由黑龙江省中医药药房提供，批号：110101；乙酸：北京市化工厂，批号20110812；水合氯醛：天津市福晨化学试剂厂，批号20111212；

大鼠TGF-α、EGF试剂盒，美国R&D公司。

1.3 仪器

TN-LCD游标卡尺（南通华泰实验仪器有限公司）；HERAEUSLabofuge400 R型离心机（德国）Tecan M1000酶标仪（瑞士）。

2 方法

2.1 动物分组及给药剂量

大鼠使用北京维通利华公司提供的标准饲料喂养；坏境：室内温度20～24℃，湿度40%～70%，12h光照明暗交替。

大鼠随机分为丹芪祛瘀止痛颗粒高、中、低剂量组（1，0.5，0.25g·kg-1），阳性对照组（雷尼替丁0.027g·kg-1）和空白组（纯水10mL·kg-1）。

2.2 预防应激性胃溃疡

连续给药10天禁食24h，给药后1h，将各组大鼠装入特制的水浸铁丝笼固定，垂直浸入24℃水中，液面保持在大鼠胸骨剑突水平，8h后取出，脱臼处死，剖腹，腹主动脉取血，结扎胃贲门和幽门并经胃壁向胃腔内注入4%甲醛溶液8mL，将胃取出浸入4%甲醛溶液中10min后沿胃大弯剪开；对胃壁采用双盲法测量胃黏膜损伤长度(如为针尖大小的溃疡点，10个相当于溃疡长度1mm)，每只动物损伤长度的总和代表该鼠的溃疡指数，同时计算溃疡抑制百分率：溃疡抑制率/%=(对照组溃疡指数-给药组溃疡指数)/对照组溃疡指数×100%，比较各组间差异。

2.3 治疗醋酸灼伤胃溃疡

大鼠禁食24h后，麻醉状态下，腹部开口暴露胃壁，0.02mL30%(v/v)醋酸注射于胃体与胃窦交界处中点胃壁粘膜下层[1]，使用盐水冲洗胃部表面，避免胃与周围组织粘连，然后缝合伤口。空白组大鼠胃暴露后，不用醋酸进行处理。

连续给药7天，禁食24h，禁水2h，麻醉大鼠，取血，结扎胃贲门和幽门后沿胃大弯剪开收集胃内容物后1500r·min-1离心10min测定上清液体积后用滴定法和改良Mett法[2]测定胃液总酸度和胃蛋白酶活性，观察胃内壁溃疡形成情况，测量溃疡纵横径，以溃疡最长径和最短径的均值表示溃疡指数。

2.4 血清处理

血液室温静置1h后，3000r·min-1离心10min，取上清液-80℃冻存，用于ELISA法测定。

2.4 数据处理

采用SPSS软件对数据进行统计，所有数据均以均数加减标准差表示，计量资料使用单因素方差分析中SNK-q检验进行多组间比较，以P＜0.05为差异有统计学意义。

3 结果

3.1 丹芪祛瘀止痛颗粒预防应激性胃溃疡结果

表1 丹芪祛瘀止痛颗粒对水浸法胃溃疡大鼠溃疡指数、血清TGF-α、EGF含量影响

丹芪祛瘀止痛颗粒高剂量组和中剂量组溃疡指数均明显降低，血清中TGF-α和EGF含量升高，与模型组比较，差异具有显著性意义（P＜0.01或P＜0.05）。

3.2 丹芪祛瘀止痛颗粒治疗醋酸灼伤胃溃疡疗效

表2 丹芪祛瘀止痛颗粒对醋酸灼伤胃溃疡溃疡指数，胃液蛋白酶活性、酸度影响

丹芪祛瘀止痛颗粒高剂量组、中剂量药物可以明显降低溃疡指数，降低胃液总酸度，与模型组比较，差异具有显著性意义（P＜0.01或P＜0.05）；但是对于胃蛋白酶活性没有明显影响。

表3 丹芪祛瘀止痛颗粒对醋酸灼伤胃溃疡大鼠血清TGF-α和EGF含量的影响

丹芪祛瘀止痛颗粒高剂量和中剂量组大鼠血清中TGF-α和EGF含量明显升高，与模型组比较差异具有显著性意义（P＜0.01）。

4 讨论

实验中，水浸束缚法诱导大鼠产生应激性胃溃疡，溃疡为棕色条索状，多沿着血管走向。为了防止取材过程中，胃粘膜变形影响结果观察，采用注射甲醛固定后测量溃疡长度的方法以减少误差。由浆膜层下注射醋酸导致的溃疡为不规则圆形，溃疡大小易受注射位置影响，因此操作时所有造模动物选取相同位置注射。

胃溃疡是一种常见疾病，主要表现为胃粘膜缺失，粘膜肌层暴露[3]，是由胃粘膜保护因子和攻击因子平衡失调，胃粘膜保护屏障被破坏所致。可导致胃粘膜损伤的因子包括胃酸、粘膜缺血、自由基和乙醇等等[4]。对于两种胃溃疡模型，丹芪祛瘀止痛颗粒均表现出较好的抑制溃疡作用，对于胃蛋白酶无抑制作用，但能降低胃液总酸度，减少对胃粘膜的损伤。

EGF是一种具有抑制胃酸分泌，促进上皮增殖，组织修复和细胞保护作用的内源性物质，TGF-α参与胃粘膜损伤后修复的主要调节肽，产生于整个胃肠道,具有对多种细胞的促有丝分裂作用。实验中，模型动物胃溃疡发生血清TGF-α和EGF含量增加，与报道[5]一致。与雷尼替丁相比，CBD给药组在抑制胃酸分泌和蛋白酶活性方面表现较差，但是能明显提高模型动物血清TGF-α和EGF含量，证明CBD对于胃溃疡具有预防和治疗作用，其机制主要是增加TGF-α和EGF水平，增强保护因子的作用，促进溃疡愈合和胃粘膜的修复，而且可能通过提高EGF含量，进而降低胃液总酸度。

[1] Belagihally M. Srikanta, Upparahally V. Sathisha,Shylaja M. Dharmesh. Alterations of matrix metalloproteinases, gastric mucin and prostaglandin E2 levels by pectic polysaccharide of swallow root(Decalepis hamiltonii) during ulcer healing[J].Biochimie 92 (2010) :94-103.

[2] 王海燕，刘亚明，牛欣，等.高良姜油抗实验性胃溃疡作用及其机制研究[J].中国中西医结合消化杂志，2011,19(2):71-73.

[3] Yeomans, N.D., Naesdal. Systematic review: ulcer definition in NSAID ulcer prevention trials[J].Aliment.Pharmacol. Ther. 2008,27 (6): 465–472.

[4] Ham M., Kaunitz, J 2007. Gastroduodenal defense. Curr.Opin. Gastroenterol. 23 (6): 607–616.

[5] 刘建平，卜涛，白建乐，等.EGF、TGF-α及EGFR在大鼠胃溃疡自愈过程中的表达及意义[J].中国药理学通报，2003,19(10):1085-1088.

* 西双版纳州人民医院·云南 景洪 666100