马铃薯品种辽薯6号茎尖脱毒及快繁技术研究

付雪娇，孟令文

马铃薯品种辽薯6号茎尖脱毒及快繁技术研究

付雪娇，孟令文

（辽宁省农业科学院作物研究所，辽宁 沈阳 110161）

以马铃薯品种辽薯6号为试材，研究不同消毒方法、不同浓度激素配比的诱导培养基、不同茎尖大小、不同培养条件对茎尖脱毒和成苗效果的影响。结果表明：自来水冲洗1～2 min，0.05%次氯酸钠溶液浸泡10 min后用无菌水冲洗3～5次，可达到理想的消毒效果；茎尖分生组织0.3～0.4 mm（带2个叶原基）、诱导培养基：“MS＋1.0 mg/L BA＋0.05 mg/L NAA＋30 g/L蔗糖＋7 g/L琼脂”、光照时长14 h/d、光照强度2 000 lx条件下培养温度28℃时成苗效果最好。

马铃薯；茎尖脱毒；快繁

辽薯6号是辽宁省农业科学院选育的鲜食型马铃薯品种。该品种薯块椭圆形，黄皮黄肉，食味较好，一般产量2 500 kg/667m2左右，是辽宁省的主栽品种之一。但是近几年由于马铃薯受病毒侵染导致种性退化，造成了该品种的产量下降、品质严重受损，给该品种的开发利用造成较大影响。目前，最有效的防治方法是采用马铃薯茎尖脱毒技术。本研究以辽薯6号为试材，探索影响马铃薯茎尖分生组织培养和试管苗快繁的有关因素，为马铃薯的工厂化育苗提供依据。

1 材料与方法

1.1 供试材料

试验材料为辽薯6号。

1.2 试验设计

1.2.1 不同消毒方法比较

2017年4月初，选择健康薯块进行催芽，用刀片切取2～3 cm的壮芽作为茎尖接种材料，对茎尖表面进行消毒处理。试验设4个处理：处理1（先用自来水冲洗30 m in，再用70%乙醇浸30 s，然后用 0.1%NaClO溶液浸15 min，无菌水冲洗3～5次）；处理2（自来水冲洗 1～2 min，70%乙醇浸30 s，0.1%NaClO溶液浸10 min，无菌水冲洗3～5次）；处理 3（自来水冲洗 1～2 m in，0.1%Na-ClO溶液浸10 m in，无菌水冲洗3～5次）；处理4（自来水冲洗 1～2 m in，0.05%NaClO溶液浸泡10 m in，无菌水冲洗3～5次）。

1.2.2 茎尖诱导培养基

采用MS为基本培养基，添加琼脂7 g/L，蔗糖30 g/L，加入两种不同浓度的激素（见表1），调节pH值为5.8。

在无菌环境下，剥离马铃薯茎尖0.2～0.4 mm，接种在不同激素浓度的培养基上培养，每个处理3次重复，每个重复接种20个茎尖。培养室温度 28℃，每日光照 14 h，光照强度2 000 lx。接种后调查马铃薯茎尖分化生长的情况，60 d后统计芽的生长情况和成苗率。

1.2.3 剥离茎尖大小对茎尖成苗率

将接种材料消毒后，剥离带有1个叶原基（0.1～0.2 mm）、带2个叶原基（0.3～0.4 mm）、带3个叶原基（0.6～0.7 mm）的茎尖接种于诱导培养基上培养60 d，统计单茎尖芽数、成苗率、脱毒率。

1.2.4 不同温度对脱毒苗生长的影响

马铃薯茎尖经诱导培养基培养18 d后转入快繁培养基中，放置于不同培养温度（22℃、25℃、28℃、31℃）下进行培养，光照时长14 h/d，光照强度2 000 lx，观察记载马铃薯茎尖的生长情况。

2 结果与分析

2.1 不同消毒方法对茎尖存活率的影响

试验结果表明，各处理对接种材料都能起到很好的消毒作用，但不同消毒方法的污染率与茎尖存活率之间存在差异，其中处理1的污染率最低，但成活率不高；处理4的存活率最高，适于马铃薯茎尖分生组织培养（表2）。将接种材料自来水冲洗1～2 min，0.05%NaClO溶液浸泡10 min，无菌水冲洗3～5次，即可达到理想的消毒效果。

2.2 不同浓度激素配比对马铃薯茎尖分生组织成苗率的影响

从表3可以看出，随着6-BA浓度逐渐升高，成苗率先增加后降低，且以1 mg/L为好。在6-BA浓度达到1.5 mg/L时，茎尖分成组织出现大块的愈伤组织，成苗率也逐渐降低。可见愈伤组织的过度生长，对芽的生长有抑制作用，对成苗是不利的。本试验条件下，辽薯6号诱导培养基的最佳方案为：MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.05 mg/L NAA＋30 g/L蔗糖＋7 g/L琼脂，成苗率最高。

2.3 剥离茎尖大小对马铃薯成苗率的影响

从表4可以看出，马铃薯成苗率与茎尖大小成正比，茎尖越大，成苗率越高；而脱毒率与茎尖大小成反比，茎尖越大，脱毒效果越差。综合考虑，处理2（2个叶原基）的大小比较适宜。

2.4 不同温度对脱毒苗生长的影响

从表5可以看出，在光照时长14 h/d、光照强度为2 000 lx条件下，不同温度对脱毒苗的生长有显著影响。随着温度的升高，株高逐渐增大再降低，温度在28℃条件下，株高最高；叶片数随着温度的升高逐渐增加再降低，温度在28℃条件下，叶片数最多；节间长随着温度的升高逐渐增长，温度在31℃条件下，节尖数最长；鲜重随着温度的升高逐渐增加再降低，温度在28℃条件下，鲜重最重。综合考虑，当温度在28℃条件下，茎尖分生组织株高、单株叶片数、单株鲜重都高于其它处理，脱毒苗生长健壮。因此，最适宜辽薯6号脱毒苗培养的温度为28℃。

表1 不同浓度激素配比

表2 不同处理对茎尖存活率的影响

表3 不同浓度激素配比对马铃薯茎尖分生组织成苗率的影响

表4 剥离茎尖大小对马铃薯成苗率的影响

表5 不同培养温度对脱毒苗生长的影响

3 结论

在本试验条件下，辽薯6号茎尖消毒处理的最适方法为自来水冲洗1～2 min，0.05%次氯酸钠溶液浸泡10 m in，然后用无菌水冲洗3～5次；辽薯6号的茎尖成苗培养基的最佳配比为：MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.05 mg/L NAA＋30 g/L蔗糖＋7 g/L琼脂，pH值为5.8。辽薯6号的最佳剥离茎尖的大小为0.3～0.4 mm（即2个叶原基），成苗率、脱毒率比较高；光照时长14 h/d，光照强度2 000 lx条件下辽薯6号的脱毒苗快繁最佳培养温度为28℃。

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S531.01

B

1002-1728（2017）05-0085-03

10.3969/j.issn.1002-1728.2017.05.022

2017-02-19

沈阳市重点科技研发计划项目（17-154-300）

付雪娇（1982-），女，主要从事马铃薯、甘薯新品种及配套栽培技术研究。

孟令文（1963-），男，研究员，主要从事作物高产高效栽培技术研究。E-mail：Lnsm lw2004@163.com