何俊婷 ,曹爱兰 ,赵新礼 ,王 倩 ,张 俏 ,杜文娟
(1.陕西新药技术开发中心,陕西 西安 710075; 2.陕西中药研究所,陕西 西安 710075)
不同基原与产地的黄精对比研究
何俊婷1,曹爱兰2,赵新礼2,王 倩1,张 俏2,杜文娟2
(1.陕西新药技术开发中心,陕西 西安 710075; 2.陕西中药研究所,陕西 西安 710075)
目的对不同产地黄精药材进行多糖和浸出物含量测定,为黄精药材的优选提供参考。方法在全国范围收集黄精样品,用紫外分光光度法测定黄精中多糖含量,用稀乙醇作为溶剂测定黄精浸出物。结果野生滇黄精多糖含量在11.01% ~17.22%,浸出物含量46.59% ~58.16%,根茎繁殖和种植的滇黄精优于野生滇黄精;野生多花黄精多糖含量在10.39% ~22.75%,浸出物含量48.67% ~63.90%;野生黄精多糖含量在6.34% ~16.79%,浸出物含量48.66% ~63.09%。结论野生品种黄精多糖含量大小顺序为多花黄精>滇黄精>黄精,浸出物含量未见明显规律。品种种植中,贵州产滇黄精多糖含量与浸出物含量均较高,其次为多花黄精。
黄精;多花黄精;滇黄精;多糖;浸出物
黄精始载于晋代《名医别录》,具有补气养阴、健脾、润肺、益肾的功效。黄精为百合科植物滇黄精、黄精或多花黄精的干燥根茎,按形状不同,习称“大黄精”“鸡头黄精”“姜形黄精”,属于多基原中药品种[1]。我国的黄精品种分布较广,黄精主要分布于东北、华北地区及陕西、宁夏、甘肃、河南、山东、江苏、安徽、浙江、福建、广东、广西、湖南,江西、贵州等地,多花黄精分布于中南地区及江苏、安徽、浙江、江西、福建、四川、贵州等地,滇黄精主产于云南、四川、贵州[2]。黄精的繁殖可采用有性繁殖(种子繁殖)和无性繁殖(根茎繁殖)两种方式[3]。黄精为根茎类药材,春、秋两季采挖,地上部位已经枯萎,新芽未萌出时采收最佳。黄精多糖是黄精的主要有效成分之一,含量高,黄精水提溶液中含有大量糖蛋白复合物,酸性、中性多糖,以及大量的半乳糖[4-5]。《中国药典》将黄精多糖含量作为黄精含量测定质量控制项,以无水葡萄糖计,黄精多糖不得低于7%。为实现中药质量的一致与可控性,本研究中对采集的栽培或野生药用植物准确鉴定,并进行质量研究。现报道如下。
101-3型紫外可见分光光度计(美国瓦里安公司);conc-50型电热鼓风干燥箱(北京科伟永兴仪器有限公司)。收集43个产地的野生或种植黄精、多花黄精、滇黄精的新鲜根茎,所有样品经陕西中药研究所赵新礼鉴定为正品;将黄精样品切片,60℃以下烘干,备用。葡萄糖对照品(中国食品药品检定研究院,批号为110833-201205);蒽酮(上海科丰实业有限公司);硫酸(国药集团化学试剂有限公司);无水乙醇(天津市富宇精细化工有限公司)。
1.2.1 黄精多糖含量测定[1]
对照品溶液的制备:称取经105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品33 mg,精密称定,置100 mL容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。
供试品溶液的制备:取60℃干燥至恒重的供试品细粉约0.25 g,精密称定,置圆底烧瓶中,加80%乙醇150 mL,置水浴中加热回流1 h,趁热滤过,残渣用80%热乙醇洗涤3次,每次10 mL,将残渣及滤纸置烧瓶中,加水150 mL,置沸水浴中加热回流1 h,趁热滤过,残渣及烧瓶用热水洗涤4次,每次10 mL,合并滤液与洗液,放冷,转移至250 mL容量瓶中,加水至刻度,摇匀,精密量取1 mL,置10 mL具塞干燥试管中,照标准曲线的制备方法,自“加水至 2.0 mL”起,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中含无水葡萄糖的重量,计算,即得。
标准曲线的制备:精密量取对照品溶液 0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6 mL,分别置 10 mL 具塞刻度试管中,各加水至2.0 mL,摇匀,在冰水浴中缓缓滴加0.2%蒽酮-硫酸溶液至刻度,混匀,放冷后置水浴中保温10 min,取出,立即置冰水浴中冷却10 min,取出,以相应试剂为空白溶液。照紫外可见分光光度法,在582 nm波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标(Y),质量浓度为横坐标(X)绘制标准曲线。标准曲线方程为 Y=0.041 79X+0.033 77,r=0.999 03(n=6)。结果表明,对照品溶液质量浓度在 3.636 ~ 21.816 μg/mL 范围内与吸光度线性关系良好。
1.2.2 黄精浸出物测定
参考2015年版《中国药典》通则2201项下的热浸法测定,用稀乙醇作为溶剂。
采收野生黄精3个品种,共30个产地的样品,其中滇黄精4份,多花黄精13份,黄精13份;种植黄精3个品种样品13份,其中野生根茎培育滇黄精和多花黄精各1份,均为贵州天柱县;种子繁育的3个品种黄精样品11份。品种、采收期及产地详见表1。
测定结果见表1。对野生、种植的3个品种黄精分别进行对比分析,结果见图1。
野生滇黄精 (Polygonatum kingianum Coll.et)多糖含量在 11.01% ~17.22% ,浸出物含量在 46.59% ~58.16%,其中云南产多糖含量最高,四川攀枝花产浸出物最高。
野生多花黄精(Polygonatumcyrtonema Hua)多糖含量在10.39% ~22.75%,浸出物含量在48.67% ~63.90%,其中四川广安产多花黄精多糖和浸出物含量均最高。
野生黄精(Polygonatum sibiricum Red.)多糖含量在6.34% ~ 16.79% ,浸出物含量 48.66% ~ 63.09% ,其中甘肃天水市产野生黄精的多糖含量和浸出物含量均最高。野生黄精多糖含量总体水平较其他两个种略低。
野生根茎繁殖的滇黄精和多花黄精,其产地均为贵州天柱县,采收期相同,但滇黄精的多糖含量和浸出物含量均明显高于多花黄精,且种植的滇黄精样品中多糖含量均大于17.62%,浸出物含量均超过60%,明显优于野生滇黄精。山东泰安种植的黄精和多花黄精,多糖含量和浸出物含量非常接近。
种植的多花黄精多糖含量为9.75% ~17.25%,浸出物含量51.35% ~64.94%。多糖含量略低于野生多花黄精,而浸出物含量略高于野生多花黄精。
表1 不同采收期、产地样品的鉴定及样品多糖与浸出物含量测定结果
野生的3个品种黄精种间对比,多糖含量有一定的规律性,野生多花黄精>野生滇黄精>野生黄精;浸出物含量则未发现规律性。种植的3个品种间相互对比,滇黄精多糖含量与浸出物含量均较高,其次为多花黄精。
图1 黄精多糖与浸出物含量
同种而不同产地的黄精多糖和浸出物含量波动较大,具有显著的差异性。究其原因,应与植株生长环境差异大有关。但从采收期上看未见规律性,后续研究应针对单品种进行分别详实的采收期研究。
[1]中国药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社,2015:305.
[2]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志[M].北京:科学技术出版社,1978:64-78.
[3]田启建,赵 致,谷甫刚.黄精栽培技术研究[J].湖北农业科学,2011,50(4):772 - 773.
[4]田启建,赵 致.黄精属植物种类识别及资源分布研究[J].现代中药研究与实践,2007,21(1):18 -21.
[5]国家中医药管理局中华本草编委会.中华本草第八册[M].上海:上海科学技术出版社,1999:142 -148.
Comparative Study on Polygonatum Sibiricum from Different Bases and Habitats
He Junting1,Cao Ailan2,Zhao Xinli2,Wang Qian1,Zhang Qiao2,Du Wenjuan2
(1.Shaanxi Pharmaceutical Development Center,Xi′an,Shaanxi,China 710075; 2.Shaanxi Chinese Medicine Institute,Xi′an,Shaanxi,China 710075)
Objective To determine the polysaccharide and extract of Polygonatum sibiricum from different habitats,in order to lay the foundation for the optimization of Polygonatum sibiricum.Methods Samples of Polygonatum sibiricum were collected nationwide,and the polysaccharide in Polygonatum sibiricum was determined by UV spectrophotometry,the extract of Polygonatum sibiricum was determined by dilute ethanol as solvent.Results The polysaccharide content of wild Polygonatum kingianum Coll.et was 11.01% - 17.22%,extract content was 46.59% - 58.16% .Rootstock breeding and planting Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl had better performance than wild Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl.The polysaccharide content of wild Polygonatum multiflorum was 10.39% - 22.75%,extract content was 48.67% - 63.90% .The polysaccharide content of wild Polygonatum sibiricum was 6.34% - 16.79%,extract content was 48.66% - 63.09% .Conclusion Thecomparison of the polysaccharide content of the three wild Polygonatum sibiricum was:Polygonatum cyrtonema Hua > Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl> Polygonatum sibiricum,the extract content was not observed regularly.To compare the three planting varieties,the polysaccharide and extract content ofPolygonatum kingianum Coll.et Hemsl in Guizhou were higher than others,followed by Polygonatum cyrtonema Hua.
Polygonatum sibiricum;Polygonatum cyrtonema Hua;Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl;polysaccharide;extract
R284.1;R282.71
A
1006-4931(2017)19-0023-04
10.3969 /j.issn.1006 - 4931.2017.19.006
陕西省科学技术研究发展计划项目[2015SF2-06]。
何俊婷(1981-),女,硕士研究生,高级工程师,主要从事药品研发工作,(电子信箱)52902245@qq.com。
2017-06-06)