5628例预输血患者不规则抗体筛查结果分析

邓超干，罗钦泉，陆冰露，袁燕，钟金花

(深圳市罗湖区人民医院输血科，广东 深圳518001)

5628例预输血患者不规则抗体筛查结果分析

邓超干，罗钦泉，陆冰露，袁燕，钟金花

(深圳市罗湖区人民医院输血科，广东 深圳518001)

目的 通过对预输血患者不规则抗体筛查结果的分析，探讨不规则抗体产生的频率、分布情况及其临床意义。方法 采用微柱凝胶法对本院2015年1月至2016年12月共5628例输血申请的患者血清进行不规则抗体筛查，抗筛阳性者，使用谱细胞及相关试剂鉴别其不规则抗体特异性，部分患者血样送至深圳市血液中心进行不规则抗体特异性鉴定。结果5628例患者共检出不规则抗体40例，阳性率为0.71%；特异性抗体系统R h、Lewis、MNS及混合抗体构成比分别为72.5%、5.0%、5.0%、12.5%，特异性鉴定结果显示以Rh血型系统居多，其中出现频率最高的是抗E，共检出26例占65.0%；混合抗体检出5例占12.5%；无特异性抗体占7.5%，冷抗体占10.0%。不规则抗体阳性患者中，女性占77.50%，显著高于男性患者的22.50%(χ2=17.352，P＜0.001)；有输血史占57.50%、阳性率为1.62%，无输血史患者占42.50%、阳性率为0.40%，两者比较差异有统计学意义（χ2=22.132，P＜0.000）；有妊娠史患者占67.50%、阳性率为1.38%，无妊娠史占32.50%、阳性率为0.35%，两者比较差异有统计学意义（χ2=19.075，P＜0.001），既有输血史又有妊娠史者阳性率为2.08%，显著高于其他患者的阳性率(0.45%)。结论 输血前对患者尤其是有输血史或妊娠史的患者进行不规则抗体筛查，对有效减少或避免输血不良反应，提高临床用血安全性及有效性具有重要的临床意义。

不规则抗体；抗体筛查；抗体分布；妊娠史；输血史

血型不规则抗体是指血清中抗-A、抗-B以外的其他血型抗体，这类抗体多为IgG抗体，主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生[1]，是引起免疫性溶血性输血反应、新生儿溶血病、血型鉴定正反不符、交叉配血不相容以及血液输注无效的主要因素。因此，输血前血清不规则抗体的筛查与鉴定对输血安全性和有效性非常重要[2，3]。本研究通过对5628例输血前患者血清不规则抗体筛查和鉴定结果进行回顾性分析，以探讨不同性别、输血史、妊娠史对患者不规则抗体检测结果的种类分布影响及其临床意义，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象抽取2015年1月至2016年12月间深圳市罗湖区人民医院有输血需求患者的血液样本5628例，其中男性2247例，女性3381例，有输血史的1423例，有妊娠史的1955例，既有输血史又有妊娠史的914例。常规静血3ml，所有标本都采用EDTA-K2抗凝，筛查前保存于2～8℃。

1.2 仪器与试剂西班牙WADiana全自动血型配血系统，微柱凝胶检测卡 (西班牙Diana公司，批号：15010.01、16025.01)，KA-2200 血库专用离心机(日本久保田)、Diana孵育器和Diana离心机。抗体筛选细胞(Diana 批号：15002.01、16023.01)，抗体特异性鉴定谱细胞 (上海血液生物批号：20154601、20163602)，IgG 抗-D、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e、抗-M、抗-N、抗-P、抗-H试剂血清(上海血液生物批号：20155704、20164702)。以上试剂均批检合格并在有效期内使用。

1.3 方法

1.3.1 不规则抗体筛查仪器方法按照西班牙WADiana全自动血型配血型仪说明书严格执行。

1.3.2 不规则抗体筛查手工方法使用微柱凝胶卡方法。离心被检者血液标本分离血浆与红细胞，吸取分别被检者血清50μl和抗体筛选细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号25μl加入抗球蛋白检测卡中，置 37℃孵育15min，1000r/min离心10min，肉眼观察结果。红细胞均匀沉于管底者为阴性，悬浮于凝胶表面或凝胶中段者为阳性。

1.3.3 吸收放散实验将患者血清加入与患者ABO及Rh血型同型且与患者主侧配血凝集的细胞中，置于37℃水浴箱中吸收1h，将吸收后的血清做抗体鉴定，同时将吸收后的细胞在56℃水浴箱中振荡10min进行热放散，并对放散液做抗体鉴定。

1.3.4 不规则抗体特异性鉴定分别吸取抗筛阳性者血浆 40μl， 谱细胞 1～10号 20μl及自身细胞20μl加入抗球蛋白检测卡中，置37℃孵育15min，1000r/min离心10min，肉眼观察结果。红细胞均匀沉于管底者为阴性，悬浮于凝胶表面或凝胶中段者为阳性。在自身细胞对照阴性的情况下，根据谱细胞反应格局对应细胞谱，鉴定不规则抗体。结合患者抗原表型后确定不规则抗体特异性。部分谱细胞反应格局无特异性，或科室内无对应试剂血清可鉴定者，将患者血样送至深圳市血液中心进行不规则抗体特异性鉴定。所有操作在室内质控合格后，严格按照操作规程进行。

1.3.5 交叉配血实验在盐水介质、聚凝胺介质及LISS/Coombs凝胶卡中进行交叉配血，观察是否有凝集。

1.4 统计学分析实验数据用SPSS 22.0统计软件分析，对计量资料采用均数、标准差进行描述，计数资料采用率、构成比等指标进行描述，对计数指标采用卡方检验等方法进行统计分析，所有统计学的检验均为双侧检验，检验水平α值设为0.05，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 性别、输血及妊娠史对不规则抗体产生的影响5628例标本中共检出抗体阳性40例，阳性率为0.71%。其中，男性9例，女性31例，既往有输血史的23例，有妊娠史的27例，有输血及妊娠史的19例，结果见表1。

2.2 不规则抗体阳性的分布40例不规则抗体中同种特异性抗体33例，主要涉及3个血型系统，其中Rh系统29例(72.5%)，Lewis系统2例(5.0%)，MNS系统2例(5.0%)，混合抗体5例(12.5%)，结果见表2。

3 讨论

血型不规则抗体一般不按规律出现，其存在是导致临床发生溶血性输血反应的主要原因之一[4]。由于血型抗原的表现型在不同地区、不同种族和不同人群之间存在一定的差异，受到抗原免疫刺激的机会不相同，因此血型不规则抗体的检出率及其特异性也不一致[5]。国内文献报道红细胞不规则抗体在输血患者中的检出率为0.3%～2.0%[6-8]。本结果不规则抗体的检出率为0.71%(40/5628)；与国内戚超等报道的0.64%[9]及王谦等报道的0.68%[10]结果相近，低于日本一项为期3年的调查结果1.43%[11]。从不规则抗体的分布来看，40例不规则抗体中同种特异性抗体33例，主要涉及3个血型系统，其中Rh系统占72.5%、Lewis系统占5.0%、MNS系统占5.0%、混合抗体占12.5%；Rh血型系统中出现频率最高的是抗E占65.0%（26/40），而未检出抗D。究其原因可能是近年来我国采供血机构及输血科普遍进行RhD定型试验，并针对RhD阴性患者同型输注，从而预防和降低了抗D的产生；而抗E检出率增高的原因可能是采供血机构及输血科未进行RhE定型试验而被忽视，而Rh血型系统中RhE是除RhD之外最强的抗原[12]，当RhE抗原阴性的患者输入RhE抗原阳性的血液时，因同种免疫较易产生抗-E。魏亚明等研究表明RhE抗原的阳性率为47.88%，临床因RhE血型不合的比率是RhD血型的2.5倍[13]。这表明抗E是临床最常见且最有临床意义的不规则抗体，当产生抗E的患者再次输入RhE抗原阳性的血液或再次怀孕时，可引起迟发性溶血输血反应或母婴血型不合新生儿溶血病。因此，采供血机构及输血科在常规血型鉴定的基础上有必要增加RhE定型试验，并针对RhE阴性患者同型输注。另外，本检测中发现4例冷抗体，对于高效价冷抗体的患者需输血治疗时，输血科应告知临床医生使用专业的血液加温仪将血液加温至37℃时方可输注。

表1 性别、输血及妊娠史对不规则抗体产生的影响

表2 40名抗筛阳性患者的不规则抗体分布

表1结果显示女性患者检出率显著高于男性患者，有妊娠史患者检出率显著高于无妊娠史患者，有输血史患者的阳性率显著高于无输血史患者，既有输血史又有妊娠史患者的阳性率显著高于其他患者(P＜0.001)；国内刘仁强等研究结果也表明临床输血产生疗效的同时也增加患者接触异型抗原的机会，多次输血产生不规则抗体的几率可达到15%～20%[14，15]。以上结果表明不规则抗体的产生与患者的性别、妊娠及输血史有显著相关性；不规则抗体的出现频率可能随调查人群的不同而表现出一定差异性。这可能与女性由于怀孕、流产及分娩等因素使机体受到的免疫刺激多于男性，且女性同时存在着输血和妊娠双重免疫机会有关。

综上所述，不规则抗体是导致临床配血困难及发生溶血性输血反应的主要原因，而妊娠和输血是诱导不规则抗体产生的主因。输血前对患者进行不规则抗体筛查和鉴定十分必要，尤其是对有输血史、妊娠史及短期内需要接受多次输血者。可及早发现患者体内有临床意义的不规则抗体，及时为患者选择配合的成分血进行输血治疗，有效减少或避免溶血反应的发生，提高临床用血安全性及有效性。

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R457.1+1

A

1674-1129(2017)05-0814-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2017.05.065

2017-05-09；

2017-08-28)