9013例输血者不规则抗体筛查结果及意义

吴 迪

(首都医科大学附属北京朝阳医院输血科， 北京 100020)

·临床研究·

9013例输血者不规则抗体筛查结果及意义

吴 迪*

(首都医科大学附属北京朝阳医院输血科， 北京 100020)

目的分析9 013例输血者不规则抗体筛查结果，并探讨不规则抗体筛查的临床意义。方法回顾性分析自2013年7月至2016年8月于首都医科大学附属北京朝阳医院接受输血的病人9 013例，应用微柱凝胶技术筛查不规则抗体，并进行鉴定。统计分析不规则抗体的阳性率、分布及不同科室中不规则抗体的阳性率，另外分析性别及输血/妊娠史对不规则抗体阳性率的影响。结果9 013例输血者的血液标本中不规则抗体的阳性率为0.63%(57/9 013)，主要为Rh型，占42.11%(24/57)；其次为MNS型，占24.56%(14/57)；其他类型及所占比例分别为Lewis系统(10.53%)、Kidd系统(8.77%)。P系统(5.26%)及其他(8.77%)。外科输血者不规则抗体检出率为1.06%(14/1 321)，高于其他科室的0.59%(43/7 692),差异具有统计学意义(P<0.05)。女性输血者中不规则抗体的阳性率为0.94%(30/3 187)，明显高于男性病人的0.46%(27/5 826)，且差异具有统计学意义(P<0.05)。有输血/妊娠史输血者的血浆中不规则抗体的阳性率为0.85%(34/3 986)，显著高于无输血/妊娠史输血者的0.46%(23/5 027)(P<0.05)。结论输血前对不规则抗体进行筛查对于提高输血安全性具有重要意义，为筛查呈阳性病人提供适合的血型，从而降低临床免疫溶血事件的发生，提高输血的有效性。

输血；不规则抗体；筛查

输血是临床上常规的治疗方式，具有重要的作用，但是血液制品中含有多种复杂的成分，其安全性受到临床医师的重视[1]。血型抗体可以分为规则和不规则抗体，规则抗体主要是ABO型血型中的抗体，随着血型检测技术和输血前精确的检测，规则抗体引起的溶血反应已经显著减少[2-3]，不规则抗体指的是除ABO型以外的其他类型的抗体，由不规则抗体导致的输血不良反应发生率越来越高，轻者会导致输血失败，严重的情况可能致使病人丧失生命，目前随着临床对输血安全性的重视，在输血前对不规则抗体进行筛查与鉴定具有重要意义，输血前需要进行不规则抗体筛查[4]。不规则抗体又可以分为红细胞血型同种抗体和自身抗体两大类，其中主要类型为IgG类， 还存在一部分IgM类，不规则抗体的产生、分布及类型等原因受到多种因素的影响[5]。对输血者不规则抗体进行深入了解，对于减少输血时产生的溶血反应和提高输血的安全性具有重要作用[6-7]。

1 资料与方法

1.1样本来源

回顾性分析自2013年7月至2016年8月于首都医科大学附属北京朝阳医院住院部和门诊接受输血的病人9 013例，其中男性5 826例，女性3 187例；年龄5～65岁，平均年龄(48.64±4.26)岁；有输血/妊娠史病人3 986例，无输血/妊娠史者5 027例；单次输血量为200～3 000 mL，平均为(1 053.24±72.51)mL。在进行输血前1 d，抽取病人肘静脉血2 mL置于涂有肝素的采血管中，常温状态下静置20 min后，以转速 4 500 r/min离心10 min，分离血浆并待查。

1.2试剂与仪器

Diana Gel Coombs卡，由北京佰利申科贸有限公司提供；Ⅰ～Ⅲ 0.8%(质量分数)的不规则抗体筛查红细胞、各种抗体血清(包括抗C、D、E、M、N、S、c、e及PI)、Kidd血清、lewis血清、抗人球蛋白试剂、抗AI 血清均由上海血液生物医药有限公司提供。抗A、抗B单克隆抗体由长春博德公司提供。

WADiana 全自动血型鉴定仪、DG Spin离心机、Diana 恒温孵育器均购自西班牙Grifol公司；血型血清学离心机购自台湾贝索公司。

1.3筛查方法

不规则抗体筛查的方法为微柱凝胶技术。第一步将所有的样品和试剂平衡至室温，在微柱凝胶抗人球蛋白卡的相应位置进行标记，分别标记为1、2、3，相应地加入50 μL Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号0.8%(质量分数)的不规则抗体筛查红细胞；第二步，每个孔中加入25 μL病人的血浆，并将这个微柱凝胶抗人球蛋白卡置于37 ℃ Diana 恒温孵育器中，孵育时间为15 min；第三步，使用DG Spin细胞洗涤离心机离心2次，第一次离心4 min，离心速度为900 r/min，第二次离心5 min，离心速度为100 r/min，共计10 min，离心半径为7 cm。离心后将样品置于白色背景处进行观察，统计分析病人的不规则抗体的检出率。

1.4鉴定方法[8]

对不规则抗体的鉴定方法有3种，分别为菠萝酶法、抗人球蛋白以及盐水法。鉴定结束后，采用标准谱细胞进行对照，最终确定抗体的特异性，对不同类型的抗体检测方法均按照对应的研究和方法进行检测。

1.5判定标准[2]

结果评价标准参考：阳性，红细胞呈现凝聚和悬浮状态，主要分布在凝胶柱的上端或中部；阴性：游离的红细胞数量较多，并且都集中在凝胶柱的底部。应用1、11号谱细胞进行鉴定并了解不规则抗体的特异性，如果结果一致，表明抗体呈阳性。

1.6统计学方法

2 结果

2.19013例输血者中不规则抗体的检出情况

在9 013例输血者的血液标本中检出的不规则抗体的例数为57例，阳性率为0.63%。其中占比重最大的类型是Rh型，占42.11%(24/57)，排在第二位的是MNS型，占24.56%(14/57)；其他类型及占比分别为Lewis系统(10.53%)、Kidd系统(8.77%)、P系统(5.26%)及其他(8.77%)，具体情况如表1所示。

2.2不同科室输血者不规则抗体的检出情况

不同科室输血者不规则抗体检出情况如表2所示，外科输血者不规则抗体检出率为1.06%(14/1 321)，高于其他科室的0.59%(43/7 692),差异具有统计学意义(P<0.05)。

2.3不同性别输血者中不规则抗体的检出情况分析

女性输血者中不规则抗体的阳性率为0.94%(30/3 187)，而男性输血者中不规则抗体的阳性率为0.46%(27/5 826)。女性输血者中不规则抗体的阳性率明显高于男性病人，且差异具有统计学意义(P<0.05)，详见表3。

表1 9 013例输血者中不规则抗体的检出情况Tab.1 The irregular antibody screening results of 9 013 cases of blood transfusion n(%)

表2 不同科室输血者不规则抗体的检出情况Tab.2 The irregular antibody screening results of blood transfusion patients in different departments

表3 不同性别输血者不规则抗体检出情况Tab.3 The irregular antibody screening results of bloodpatients in different gender

2.4比较输血史/妊娠史对不规则抗体检出情况的影响

有输血/妊娠史输血者的血浆中不规则抗体的阳性率为0.85%(34/3 986)，显著高于无输血/妊娠史输血者的0.46%(23/5 027)，且差异具有统计学意义(P<0.05)，详见表4。

表4 输血史/妊娠史对不规则抗体检出情况影响Tab.4 The influence of blood transfusion/pregnancy history toirregular antibody screening results

3 讨论

不规则抗体的出现并无规律可循，可以引起输血失败和迟发型输血不良反应，尤其是对于反复输血的病人，如果接受输血的病人体内存在相应的抗原，就会逐步破坏输入血液的红细胞，诱发慢性溶血反应[9]，同时并不会明显提高血管活性物质的释放量和凝血系统的活化程度，导致输血病人出现的出血现象并未明显好转，不仅增加病人的经济负担，更重要的是贻误了救治病人的最佳时机[10]。在我国，约有超过10%的输血反应是由不规则抗体引起的，多数的不规则抗体为IgG类，当体内存在较低滴度的不规则抗体时，由于交叉配血试验的灵敏度差，给病人输入不完全匹配的血液样品，易诱发溶血性输血性反应[11-12]。对输血者进行不规则抗体的筛查已经成为管理输血质量的重要措施之一，从而降低可能发生的输血不良反应。对于存在不规则抗体的输血病人，应该在进行交叉配血反应的同时，相应的抗原呈现阳性的红细胞进行灌注，病人在进行大型手术前，需要提前1 d对抗体进行筛选，保证不规则抗体呈阳性的病人能够得到最佳的血液制品，保证手术的顺利进行[13-14]。

根据国内的相关研究[15]报道，不规则抗体的检出率在输血者中的检出率较低，通常在0.3%～2.0%之间，本研究对9 013例输血者的血液标本继续检测，发现不规则抗体的阳性率为0.63%(52/9 013)，符合国内的不规则抗体检出情况，略低于刘艳辉等[16]报道的0.74%阳性率，高于李慧等[17]报道的0.31%(137/44 194)，这可能是由于区域因素导致的。在检出的不规则抗体类型中占比重最大的类型是Rh型，占42.11%(24/57)，提示其是引起免疫性溶血性输血的主要抗体类型，在Rh亚型中占比例最高的是抗-E抗体[17.54%(10/57)]，出现这种现象的主要原因是汉族血型中E抗原呈阳性的比例将近50%，此外，国内的医院已将D抗原的检测列入常规的检测项目中，而E抗原的检测尚未进入常规检测项目中[3]。医院可以在输血前对Rh血液系统进行分型，选择合适的血液制品进行输注。排在第二位的是MNS型，其中主要的抗体类型为抗-M抗体[10.53(6/57)]，当病人处于低温麻醉的状态下，抗-M抗体通过激活补体，使得冷抗体在适当的反应温度范围内出现溶血反应，因此可以选择与M抗原呈阴性的血液制品，避免出现不良反应[18]。不同科室中不规则抗体检出率不同，本研究显示不规则抗体检出率外科明显高于其他科室，出现这种现象的原因可能是由于外科接受输血的情况较多，且经常反复输血，从而产生免疫性抗体，尤其是本院外科病人中接受肾移植和肝移植的病人数量较多，手术过程中出血较多，而且移植的器官容易产生特异性抗原导致机体出现不规则抗体，因此需要在术前对移植器官进行不规则抗体检查，术后严密观测。

对不同因素对不规则抗体的阳性率影响的研究显示，女性输血者中不规则抗体的阳性率明显高于男性病人，且差异具有统计学意义(P<0.05)，主要是由于女性病人在非正常状态下，如妊娠或流产，容易受到免疫因素的刺激，另外还会受到输血和免疫的双重刺激影响[19]。本研究还显示，有输血/妊娠史输血者的血浆中不规则抗体的阳性率为0.85%(34/3 986)，显著高于无输血/妊娠史输血者的0.46%(23/5 027)，且差异具有统计学意义(P<0.05)，以上结果说明有输血/妊娠史的输血者在输血前更需要进行不规则抗体筛查，女性病人在妊娠过程中，容易产生不规则抗体，输血过程也会提高输血者接触异型抗原的概率[2]。

综上所述，本院从2013年至2016年的4年间有一定的不规则抗体的阳性率，因此在输血前对不规则抗体进行筛查和鉴定，规范相应的科室的输血流程，对容易出现不规则抗体的输血者进行严密监督，提供合适的血液制品，是保证临床输血有效性和安全性的有效措施。

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Screeningresultsandsignificanceof9013casesoftransfusionirregularantibody

Wu Di*

(DepartmentofTransfusion,BeijingChaoyangHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100020,China)

ObjectiveTo analyze screening results of 9 013 cases of transfusion irregular antibody, and to explore the clinical significance of the irregular antibody screening.MethodsTotally 9 013 cases of patients underwent blood transfusion from July 2013 to August 2016 in Beijing Chaoyang Hospital, Capital Medical University were analyzed retrospectively. The irregular antibody screening and identification were applied with micro-column gel technology. The positive rate of irregular antibody, distribution and irregular antibody positive rate in the different departments were analyzed statistically. In addition, the influence of gender and blood transfusion/history of pregnancy on irregular antibody positive rate.ResultsThe irregular antibody positive rate of 9 013 cases of transfusion of blood specimen was 0.63% (57/9 013), in which mainly for the Rh, was accounted for 42.11% (24/57); Second of MNS type, which was accounting for 24.56% (14/57); Other type and proportion were Lewis system (10.53%), Kidd system (8.77%), P (5.26%) and other (8.77%), respectively. The irregular antibody rate in surgery department was 1.06% (14/1 321), significantly higher than other department 0.59% (43/7 692), with significant difference (P<0.05). The irregular antibody positive rate of women transfusion was 0.94% (30/3 187), which was significantly higher than the 0.46% of male patients (27/5 826), and the difference was statistically significant (P<0.05). The irregular antibody positive rate of patients with blood transfusion/pregnancy history was 0.85% (34/3 986), which was significantly higher than that with no history of transfusion blood transfusion/pregnancy[0.46% (23/5 027)] (P<0.05).ConclusionThe irregular antibody screening before blood transfusion is of great significance for the improvement of blood transfusion safety, which provides suitable for screening patients with positive blood type. It can reduce clinical immune hemolysis events in order to increase the effectiveness of blood transfusion.

blood transfusion; irregular antibody; screening

*Corresponding author， E-mail：wdclaie@163.com

时间：2017-10-14 16∶29

http://kns.cnki.net/kcms/detail/11.3662.R.20171014.1629.050.html

10.3969/j.issn.1006-7795.2017.05.023]

R457

2017-01-09)

编辑 孙超渊